LOS ANTIGENOS SM-B-B1, EL CLONADO DE LOS ANTIGENOS SM-B-B1 Y LA DETECCION DE LUPUS ERITEMATOSUS SISTEMATICO UTILIZANDO LOS ANTIGENOS SM-B-B1 O UNA MEZCLA DE LOS ANTIGENOS SM-B-B1 Y SM-D.

SE AISLAN PROTEINAS SNRNP, POR CROMATOGRAFIA DE INMUNOAFINIDAD,

UTILIZANDO ANTICUERPOS DE UNA MUESTRA DE SUERO DE UN SER VIVO AFECTADO POR LUPUS ERITEMATOSUS SITEMICO. LOS POLIPEPTIDOS SM-B Y/O SM-B' SE AISLAN A PARTIR DEL COMPLEJO PROTEINICO SNRNP POR ELECTROFORESIS DE GELES Y ELECTROELUCION. LUEGO SE SECUENCIAN LOS AMINO TERMINALES DE LOS POLIPEPTIDOS SM-B Y/O SM-B', Y SE SINTETIZAN LAS SONDAS DE DNA MARCADAS CON SECUENCIAS DE NUCLEOTIDOS COMPLEMENTARIAS CON LAS QUE CODIFICAN LA SECUENCIA DE AMINOACIDOS. UNA BIBLIOTECA DE CDNA HUMANO EN UN VECTOR DE CLONACION LAMBDA SE TRANSFIERE A FILTROS ADECUADOS TALES COMO FILTRO DE NITROCELULOSA. ESTOS FILTROS SON INVESTIGADOS POR HIBRIDACION CON SONDAS MARCADAS PARA IDENTIFICAR LOS CLONES DE CDNA EN LA BIBLIOTECA CON SECUENCIAS QUE IGUALAN A LAS DE LAS SONDAS MARCADAS. LUEGO SE SUBCLONA EL CDNA QUE CODIFICA LAS PROTEINAS DE SM-B Y/O SM-B'. LUEGO SE AISLAN LOS POLIPEPTIDOS DE SM-B Y/O SM-B' POR CROMATOGRAFIA DE INMUNOAFINIDAD Y, SI SE DESEA ADEMAS, POR CROMATOGRAFIA HPLC. LUEGO SE HACE UN ENSAYO CON LOS POLIPEPTIDOS DE SM-B Y/O SM-B' AISLADOS HACIENDO REACCIONAR DICHOS POLIPEPTIDOS CON UNA MUESTRA DE SUERO DE UN SER VIVO PARA DETERMINAR SI ESTE ESTA AFECTADO POR LUPUS ERITEMATOSUS SISTEMICO. EL ENSAYO TAMBIEN SE PUEDE HACER CON UNA MEZCLA DE LOS POLIPEPTIDOS DE SM-B Y/O SM-B' AISLADOS Y UN POLIPEPTIDO DE SM-D AISLADO (AISLADO ESENCIALMENTE COMO SE DESCRIBIO ANTES). EL ENSAYO SE PUEDE LLEVAR A CABO CON INMUNOABSORBENTE LIGADO A ENZIMA, TAL COMO ANTICUERPOS DE IGG-IGM ANTIHUMANO UNIDOS COVALENTEMENTE A UN INDICADOR ENZIMATICO. LACTOPEROXIDASA FOSFATASA ALCALINA SON CADA UNA UN EJEMPLO DE UN INDICADOR ENZIMATICO PARA INDICAR, MEDIANTE UN COLOR CARACTERISTICO, UNA PERSONA AFECTADA.

Tipo: Resumen de patente/invención.

Solicitante: THE AGOURON INSTITUTE.

Nacionalidad solicitante: Estados Unidos de América.

Dirección: 505 COAST BOULEVARD SOUTH, LA JOLLA CALIFORNIA 92037.

Inventor/es: HOCH, SALLIE O., ROKEACH, LUIS A., HASELBY, JEANNE A.

Fecha de Publicación: 1 de Agosto de 1994.

Fecha Concesión Europea: 10 de Marzo de 1993.

Clasificación Internacional de Patentes:

C12N15/00 QUIMICA; METALURGIA. › C12 BIOQUIMICA; CERVEZA; BEBIDAS ALCOHOLICAS; VINO; VINAGRE; MICROBIOLOGIA; ENZIMOLOGIA; TECNICAS DE MUTACION O DE GENETICA. › C12N MICROORGANISMOS O ENZIMAS; COMPOSICIONES QUE LOS CONTIENEN; PROPAGACION, CULTIVO O CONSERVACION DE MICROORGANISMOS; TECNICAS DE MUTACION O DE INGENIERIA GENETICA; MEDIOS DE CULTIVO (medios para ensayos microbiológicos C12Q 1/00). › Técnicas de mutación o de ingeniería genética; ADN o ARN relacionado con la ingeniería genética, vectores, p. ej. plásmidos, o su aislamiento, su preparación o su purificación; Utilización de huéspedes para ello (mutantes o microorganismos modificados por ingeniería genética C12N 1/00, C12N 5/00, C12N 7/00; nuevas plantas en sí A01H; reproducción de plantas por técnicas de cultivo de tejidos A01H 4/00; nuevas razas animales en sí A01K 67/00; utilización de preparaciones medicinales que contienen material genético que es introducido en células del cuerpo humano para tratar enfermedades genéticas, terapia génica A61K 48/00; péptidos en general C07K).
G01N33/531 FISICA. › G01 METROLOGIA; ENSAYOS. › G01N INVESTIGACION O ANALISIS DE MATERIALES POR DETERMINACION DE SUS PROPIEDADES QUIMICAS O FISICAS (procedimientos de medida, de investigación o de análisis diferentes de los ensayos inmunológicos, en los que intervienen enzimas o microorganismos C12M, C12Q). › G01N 33/00 Investigación o análisis de materiales por métodos específicos no cubiertos por los grupos G01N 1/00 - G01N 31/00. › Producción de materiales de investigación o de análisis inmunoquímicos.
G01N33/535 G01N 33/00 […] › con un marcador enzimático.
G01N33/541 G01N 33/00 […] › en los que interviene un doble o un segundo anticuerpo.
G01N33/564 G01N 33/00 […] › para complejos inmunológicos preexistentes o enfermedades autoinmunes.

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