METODO PARA LA DETECCION Y MEDICION DE ACIDOS NUCLEICOS CORTADOS Y EMPALMADOS.

Un método para detectar un ácido nucleico de fusión en una muestra, comprendiendo los pasos de: a) proporcionar una muestra que contenga un primer ácido nucleico de fusión de cadena simple comprendiendo la zona de empalme bcr-abl; b) poner en contacto bajo condiciones de amplificación de ácidos nucleicos: el primer ácido nucleico de fusión de cadena simple

, un primer cebador promotor que hibrida específicamente al primer ácido nucleico de fusión de cadena simple en un primer sitio de unión del cebador localizado 3’ respecto el sitio de la zona de empalme y en la secuencia abl, y al menos una actividad polimerasa de ácido nucleico; c) amplificando el primer ácido nucleico de fusión de cadena simple en una reacción de amplificación de ácidos nucleicos usando el primer cebador para producir varias hebras de ácidos nucleicos secundarias complementarias al menos a una porción del primer ácido nucleico de fusión de hebra simple, en donde cada segunda hebra de ácido nucleico comprende: un sitio de zona de empalme complementario, un primer sitio de unión a la sonda en una secuencia bcr localizada 3’ y no solapando el sitio de zona de empalme complementario, y un segundo sitio de unión a la sonda en una secuencia abl localizada hacia 5’ y no solapando el sitio de zona de empalme complementario, en donde el segundo sitio de unión a la sonda solapa o se localiza 3’ a la secuencia complementaria al primer sitio de unión al cebador; d) hibridando las segundas hebras de ácido nucleico bajo condiciones de hibridación con una sonda de oligonucleótidos que hibrida específicamente al primer sitio de unión a la sonda o al segundo sitio de unión a la sonda pero no a ambos sitios, formando así un híbrido sonda:diana; y e) detectar el híbrido sonda:diana en formato de ensayo homogéneo como una indicación de la presencia del primer ácido nucleico de fusión de cadena simple en la muestra.

Tipo: Resumen de patente/invención.

Solicitante: GEN-PROBE INCORPORATED.

Nacionalidad solicitante: Estados Unidos de América.

Dirección: 10210 GENETIC CENTER DRIVE,SAN DIEGO, CA 92121-4362.

Inventor/es: HARVEY, RICHARD, C., EASTMAN, PAUL, S.

Fecha de Publicación: .

Fecha Solicitud PCT: 23 de Julio de 1999.

Fecha Concesión Europea: 16 de Junio de 2004.

Clasificación Internacional de Patentes:

  • SECCION C — QUIMICA; METALURGIA > BIOQUIMICA; CERVEZA; BEBIDAS ALCOHOLICAS; VINO; VINAGRE;... > PROCESOS DE MEDIDA, INVESTIGACION O ANALISIS EN LOS... > Procesos de medida, investigación o análisis en... > C12Q1/68 (en los que intervienen ácidos nucleicos)

Países PCT: Austria, Bélgica, Suiza, Alemania, Dinamarca, España, Francia, Reino Unido, Grecia, Italia, Liechtensein, Luxemburgo, Países Bajos, Suecia, Mónaco, Portugal, Irlanda, Finlandia, Chipre, Oficina Europea de Patentes.

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