Taurolidina o taurultamo para uso en el tratamiento de tumores de próstata, de colon, de pulmón y para el tratamiento del glioblastoma multiforme recurrente.

Un compuesto para su uso para inducir la apoptosis en células cancerosas en un mamífero,

en el que dichocompuesto es taurolidina o taurultamo, y en el que dicho cáncer se selecciona de cáncer de colon, cáncer de pulmóny cáncer de próstata.

Taurolidina o taurultamo para uso en el tratamiento de tumores de próstata, de colon, de pulmón y para el tratamiento del glioblastoma multiforme recurrente Antecedentes de la invención La invención se refiere a la terapia del cáncer.

A pesar de los avances en la identificación de agentes quimioterapéuticos para inhibir el crecimiento de células cancerosas, el cáncer sigue siendo una temible enfermedad con una alta tasa de mortalidad. Un problema importante de los agentes quimioterapéuticos es la baja especificidad. Muchos agentes anticáncer no distinguen de modo adecuado entre las células normales y las células cancerosas. Como resultado, a menudo producen efectos secundarios graves no deseados.

Sumario de la invención La invención proporciona un compuesto para su uso para inducir la apoptosis en células cancerosas en un mamífero, en el que dicho compuesto es taurolidina o taurultamo, y en el que dicho cáncer se selecciona de un cáncer de colon, un cáncer de pulmón y un cáncer de próstata. El compuesto se administra para que se ponga en contacto directo con una célula tumoral a una dosis suficiente para inducir la muerte celular por apoptosis. Preferiblemente, el compuesto se administra de una manera y a una dosis que induce preferentemente la muerte apoptótica, comparada con la muerte necrótica. El compuesto se administra por vía sistémica, por ejemplo, por vía oral o intravenosa. El compuesto que se va a administrar es taurolidina o taurultamo. La taurolidina también se proporciona para su uso en el tratamiento del glioblastoma multiforme recurrente avanzado.

Taurolidina Taurultamo Los compuestos se administran solos o en combinación con otro agente antineoplásico. Preferiblemente, el agente coadministrado mata a las células tumorales a través de un mecanismo distinto de la apoptosis. Por ejemplo, se administra un antimetabolito, un análogo de purina o pirimidina, un agente alquilante, un agente reticulante (por ejemplo, un compuesto de platino) y un agente intercalante y/o un antibiótico en un régimen de terapia de combinación. El fármaco coadministrado se administra antes, después o al mismo tiempo que la taurolidina o el taurultamo.

La invención también incluye tratar un tumor resistente a fármacos, por ejemplo, un tumor resistente a múltiples fármacos (MDR) , en un mamífero, mediante la administración al mamífero de un compuesto de taurolidina o taurultamo. El tumor que se va a tratar es un carcinoma. El tumor resistente a fármacos se selecciona del grupo que consiste en cáncer de colon, cáncer de próstata, y cáncer de pulmón.

Preferiblemente, la taurolidina o el taurultamo se administra de una manera que permite el contacto directo con la superficie de la célula tumoral. El compuesto se une a un componente, por ejemplo, un ligando polipeptídico de la superficie celular u otro resto de la superficie celular, para iniciar una cascada de transducción de señales intracelular que cultima con la muerte celular por apoptosis. Los tumores que van a tratar son el cáncer de colon, el cáncer de próstata y el cáncer de pulmón. La liberación lenta del compuesto hacia cualquier tejido se logra implantando una matriz cargada con el fármaco en contacto directo o adyacente al sitio tumoral.

Los compuestos se formulan para la administración para el contacto directo con las células cancerosas, por ejemplo, en forma de una disolución acuosa. Las formulaciones incluyen una composición que forma una película terapéutica contenida o revestida con el compuesto terapéutico, así como ungüentos, pastas, pulverizados, parches, cremas, geles, esponjas y espumas.

Otras características y ventajas de la invención serán evidentes a partir de la siguiente descripción detallada y a partir de las reivindicaciones.

Breve descripción de los dibujos La figura 1 es un diagrama de la estructura de la taurolidina y sus principales productos de la degradación o metabolitos (taurultamo, taurinamida y taurina) . Después de la degradación, cada molécula de taurolidina genera 3 restos que contienen metilol implicados en las actividades antibióticas y antiendotoxinas de la taurolidina.

La figura 2 es un diagrama de barras que muestra el efecto de la 48ª exposición a taurolidina sobre el aspecto de los residuos de ADN en células PA-1, SKOV-3 y NIH-3T3. Se sembraron 3 x 105 células en matraces de cultivo de tejidos de plástico. Veinticuatro horas después se añadió taurolidina para lograr unas concentraciones finales de 25 μM, 50 μM o 100 μM. Los cultivos control recibieron un volumen apropiado de Kollidine-17P. Después de un periodo de 48 h de exposición a la taurolidina, las células se recolectaron y se tiñeron con yoduro de propidio. Se evaluó el porcentaje de residuos de ADN en la región sub-G0/G1 utilizando técnicas citofluorométricas. Cada barra representa la media (±EE) de tres determinaciones. **, p ≤ 0, 01; ***, p ≤ 0, 001; ****, p ≤ 0, 0001.

La figura 3 es un diagrama de barras que muestra el efecto de la 24ª exposición a taurolidina sobre la externalización de fosfotidilserina sobre la membrana en células PA-1, SKOV-3 y NIH-3T3. Se sembraron 3 x 105 células en matraces de cultivo de tejidos de plástico. Veinticuatro horas después se añadió taurolidina para lograr unas concentraciones finales de 25 μM, 50 μM o 100 μM. Los cultivos control recibieron un volumen apropiado de Kollidine-17P. Después de 24 h más, las células se recolectaron y se determinó la externalización de fosfotidilserina evaluando la unión de anexina-V/FITC utilizando técnicas citofluorométricas. Cada barra representa la media ± MEE de cuatro determinaciones. **, p ≤ 0, 01; ***, p ≤ 0, 001.

La figura 4 es una fotografía que muestra los resultados de un análisis de la transferencia Western del efecto de una exposición de 24 h a taurolidina 50 o 100 μM sobre la expresión de PARP y el aspecto del principal producto de la ruptura de PARP en células PA-1, SKOV-3 y NIH-3T3. Se sembraron 2 x 106 células en matraces de cultivo de tejidos de 150 cm2. Veinticuatro horas después se añadió taurolidina a unas concentraciones 50 μM o 100 μM. Después de 24 h más, las celulas se recolectaron, se determinó el número de células y se generaron partes alícuotas derivadas de un número idéntico de células de cada condición de exposición. Las proteínas totales de estos lisados de células completas se separaron mediante SDS-PAGE y se trasladaron a filtros de nitrocelulosa. Los filtros después se inmunotransfirieron para detectar la proteína PARP intacta y los fragmentos de la ruptura utilizando el anticuerpo anti-PARP monoclonal de ratón del clon C-2-10 (Zymed Laboratories, San Francisco, CA) . Los complejos de proteína-anticuerpo resultantes se visualizaron mediante técnicas de quimioluminiscencia.

La figura 5 es un diagrama de barras que muestra el efecto de la administración retrasada de un único régimen de inyección en embolada intraperitoneal (i.p.) de 3 días (3d) de taurolidina (20 mg/ratón/inyección) sobre la aparición de xenoinjertos de tumor humano i.p. en ratones hembra atímicos después de la administración i.p. de 5 x 106 células de tumor de ovario humano SKOV-3. La terapia con taurolidina se inició en el día de la inoculación de las células tumorales o hasta 5d después. Catorce días después de la última inyección de taurolidina los ratones de todos los grupos se sacrificaron y se estudió la cavidad peritoneal para la presencia de tumores. Cada experimento se repitió tres veces y el número reunido de animales en cada grupo varió de 15-21.

La figura 6 es un diagrama de barras que muestra el efecto de la administración retrasada de un único régimen de inyección en embolada i.p. 3d de taurolidina (20 mg/ratón/inyección) sobre el peso de xenoinjertos de tumor humano i.p. en ratones hembra atímicos después de la administración i.p. de 5 x 106 células de tumor de ovario humano SKOV-3. La terapia con taurolidina se inició en el día de la inoculación de las células tumorales o hasta 5d después. Catorce días después de la última inyección de taurolidina los ratones de todos los grupos se sacrificaron, se retiraron los xenoinjertos de tumor de ovario i.p. y se pesaron los tumores. Cada experimento se repitió tres veces y el número reunido de animales en cada grupo varió de 15-21. Cada barra representa la media (±EE) del peso tumoral de 15-21 animales. ***, p ≤ 0, 001; ****, p ≤ 0, 0001.

Descripción detallada Se ha descubierto que la taurolidina y el taurultamo son agentes antineoplásicos seguros y eficaces que inducen preferentemente la muerte apoptótica en células cancerosas. Los compuestos inducen la muerte apoptótica de células tumorales.

1. Un compuesto para su uso para inducir la apoptosis en células cancerosas en un mamífero, en el que dicho compuesto es taurolidina o taurultamo, y en el que dicho cáncer se selecciona de cáncer de colon, cáncer de pulmón y cáncer de próstata.

2. Un compuesto según la reivindicación 1 para el uso según la reivindicación 1, en el que dichas células cancerosas expresan un gen que codifica la resistencia a múltiples fármacos.

3. Un compuesto según la reivindicación 1 o 2 para el uso según la reivindicación 1, para la administración para un contacto directo con dichas células cancerosas.

4. Un compuesto según la reivindicación 3 para el uso según la reivindicación 1, formulado como una matriz 10 cargada con fármaco para la implantación en contacto directo o adyacente a dichas células cancerosas.

5. Un compuesto según la reivindicación 1 o 2 para el uso según la reivindicación 1, formulado para la administración intraperitoneal.

6. Un compuesto según cualquiera de las reivindicaciones 1-3 para el uso según la reivindicación 1, para la administración antes, al mismo tiempo o después de la administración de un segundo agente quimioterapéutico que 15 se selecciona de un antimetabolito, un análogo de purina, un análogo de pirimidina, un agente alquilante, un agente intercalante, un agente reticulante y un antibiótico.

7. La taurolidina para su uso en el tratamiento del glioblastoma multiforme recurrente avanzado mediante la administración sistémica.