DETECCION DE BIBLIOTECAS COMBINATORIAS DE PEPTIDOS PARA SELECCION DE UN LIGANDO PEPTIDICO UTIL EN PURIFICACION POR AFINIDAD DE PROTEINAS DIANA.
LIGANDOS QUE INTERACTUAN CON UN OBJETIVO PUEDEN SER MAS FACILMENTE IDENTIFICADOS SI LAS INTERACCIONES POSITIVAS FALSAS (BIEN ESPECIFICAS O NO) DEL SISTEMA DETECTOR SE DIFERENCIAN DE LA INTERACCION DIANA-ESPECIFICA.
SE PRESENTA UN METODO MEJORADO DE IDENTIFICACION DE PEPTIDOS QUE SE FIJAN A UNA PROTEINA DIANA. LOS PASOS SON: UNIR UNA BIBLIOTECA DE PEPTIDOS JUNTO CON UN MATERIAL DE SOPORTE, PERMITIENDO QUE REAGENTES DE DETECCION ENTREN EN CONTACTO CON LOS PEPTIDOS Y CON EL MATERIAL DE SOPORTE, IDENTIFICANDO ENTONCES ESTAS INTERACCIONES Y PERMITIENDO QUE LA PROTEINA DIANA SE FIJE SELECTIVAMENTE A LOS PEPTIDOS, PERMITIENDO QUE LOS REAGENTES DE DETECCION ENTREN EN CONTACTO CON LA PROTEINA DIANA AGLOMERADA, Y CARACTERIZANDO EL PEPTIDO FIJADO AL MATERIAL DE SOPORTE IDENTIFICADO. LA INTERACCION DE UN LIGANDO O DEL MATERIAL DE SOPORTE CON LOS REAGENTES DE DETECCION PROVOCARA UN CAMBIO DE COLOR DISTINTIVO QUE DISTINGUE A AQUELLOS LIGANDOS QUE SE FIJAN SELECTIVAMENTE A LA PROTEINA DIANA. EL PEPTIDO CARACTERIZADO PUEDE ENTONCES UTILIZARSE EN LA PURIFICACION DE AFINIDAD DE LA PROTEINA DIANA. EN UNA ADAPTACION, LA AUTOMATIZACION DEL ENSAYO SE DEMUESTRA MEDIANTE EL FLUJO DE TODOS LOS REAGENTES INMUNOLOGICOS A TRAVES DE BOLITAS EN UN FORMATO DE COLUMNA QUE ASEGURA UN LAVADO ALTAMENTE EFICAZ. EN UNA ADAPTACION PREFERIDA, UNA RESINA PARA LA SINTESIS PEPTIDA QUE ES HIDROFILICA CONTIENE ESPACIADORES Y PUEDE EXHIBIR UN FONDO NO ESPECIFICO MENOR QUE OTRAS RESINAS QUE PERMITE LA SINTESIS Y DIRIGEN LA EVALUACION DE LOS BIBLIOTECAS DE PEPTIDOS COMBINATORIOS PARA LA FIJACION A PROTEINAS DIANA UTILIZADAS. TAMBIEN SE PRESENTAN EJEMPLOS PARA EL USO DE ESTA NUEVA RESINA Y LA METODOLOGIA PARA IDENTIFICAR LIGANDOS PEPTIDOS PARA LA IDENTIFICACION DE PROTEINAS.
Tipo: Resumen de patente/invención.
Solicitante: BAYER CORPORATION.
Nacionalidad solicitante: Estados Unidos de América.
Dirección: 100 BAYER ROAD, PITTSBURGH, PA 15205.
Inventor/es: BUETTNER, JOSEPH A.
Fecha de Publicación: .
Fecha Solicitud PCT: 29 de Abril de 1996.
Clasificación PCT:
- C07K1/04 QUIMICA; METALURGIA. › C07 QUIMICA ORGANICA. › C07K PEPTIDOS (péptidos que contienen β -anillos lactamas C07D; ipéptidos cíclicos que no tienen en su molécula ningún otro enlace peptídico más que los que forman su ciclo, p. ej. piperazina diones-2,5, C07D; alcaloides del cornezuelo del centeno de tipo péptido cíclico C07D 519/02; proteínas monocelulares, enzimas C12N; procedimientos de obtención de péptidos por ingeniería genética C12N 15/00). › C07K 1/00 Procedimientos generales de preparación de péptidos. › sobre soportes.
- C07K1/22 C07K 1/00 […] › Cromatografía de afinidad o técnicas análogas basadas en procesos de absorción selectiva.
- C40B30/04 C […] › C40 TECNOLOGIA COMBINATORIA. › C40B QUIMICA COMBINATORIA; BIBLIOTECAS, p. ej. QUIMIOTECAS (bibliotecas combinatorias in silico de ácidos nucleicos, proteínas o péptidos G16B 35/00; química combinatoria in silico G16C 20/60). › C40B 30/00 Procedimientos de selección de bibliotecas. › midiendo la capacidad para unirse específicamente a una molécula diana, p. ej. unión anticuerpo-antígeno, unión receptor-ligando.
- G01N33/53 FISICA. › G01 METROLOGIA; ENSAYOS. › G01N INVESTIGACION O ANALISIS DE MATERIALES POR DETERMINACION DE SUS PROPIEDADES QUIMICAS O FISICAS (procedimientos de medida, de investigación o de análisis diferentes de los ensayos inmunológicos, en los que intervienen enzimas o microorganismos C12M, C12Q). › G01N 33/00 Investigación o análisis de materiales por métodos específicos no cubiertos por los grupos G01N 1/00 - G01N 31/00. › Ensayos inmunológicos; Ensayos en los que interviene la formación de uniones bioespecíficas; Materiales a este efecto.
- G01N33/543 G01N 33/00 […] › con un soporte insoluble para la inmovilización de compuestos inmunoquímicos.
- G01N33/68 G01N 33/00 […] › en los que intervienen proteínas, péptidos o aminoácidos.
Países PCT: Austria, Bélgica, Suiza, Alemania, Dinamarca, España, Francia, Reino Unido, Grecia, Italia, Liechtensein, Luxemburgo, Mónaco, Irlanda, Finlandia.
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