Métodos y composiciones para el diagnóstico y tratamiento de la encefalitis autoinmune o la epilepsia.

Un método para diagnosticar un receptor anti-NMDA de encefalitis en un sujeto,

consiste del paso de pruebas deuna muestra biológica obtenida del sujeto para detectar la presencia de un anticuerpo contra la subunidad NR de unreceptor NMDA, en donde una presencia de dicho anticuerpo en dicha muestra biológica indica dicho receptor anti-NMDA de encefalitis, y en donde el receptor anti-NMDA de encefalitis está asociado con movimiento distónico,disquinesias, o inestabilidad autónoma, diagnosticando por lo tanto a dicho receptor anti-NMDA de encefalitis endicho sujeto.

Métodos y composiciones para el diagnóstico y tratamiento de la encefalitis autoinmune o la epilepsia.

CAMPO DE LA INVENCiÓN

Esta invención proporciona métodos para diagnosticar o determinar una causa de una encefalitis autoinmune o una epilepsia en un sujeto y para diagnosticar un tumor en un sujeto, el cual consta en ensayar el líquido corporal del sujeto para detectar un anticuerpo a una subunidad NR del receptor NMDA.

ANTECEDENTES DE LA INVENCiÓN

Las alteraciones de la memoria, del comportamiento, de la cognición, y las crisis epilépticas pueden resultar de la encefalitis inmunomediada.Una causa de la encefalitis autoinmune es la manifestación paraneoplásica de un neoplasma. Hasta la fecha la mayoría de las encefalitis se han asociado con los anticuerpos a proteínas intracelulares onconeuronales y células-T citotóxicas presuntamente contra las mismas proteínas. Estos padecimientos generalmente se asocian con tumores malignos y una pobre respuesta a las inmunoterapias o a los tratamientos del cáncer.

En años recientes una encefalitis grave pero generalmente reversible de etiología desconocida que afecta predominantemente a mujeres jóvenes se ha reconocido cada vez más. El trastorno ha recibo varios nombres, incluyendo meningoencefalitis linfocítica difusa aguda, encefalitis límbica reversible aguda, encefalitis femenil juvenil no herpética aguda, o encefalitis no herpética aguda juvenil. Todavía no se ha establecido una asociación con infecciones, cáncer, o autoanticuerpos específicos, pero considerando que la mayoría de los pacientes desarrollan una enfermedad prodrómica de apariencia viral, se ha postulado una etiología pos infecciosa inmunomediada.

Los pacientes afectados fueron mujeres que desarrollaron síntomas psiquiátricos prominentes, crisis epilépticas, déficits de memoria, y disminución en los niveles de conciencia que con frecuencia requieren de soporte de ventilación. Tres características sobresalientes incluyeron pacientes jóvenes, la asociación con teratomas del ovario, y la detección de anticuerpos de antígenos desconocidos predominante expresados en la membrana celular de las neuronas del hipocampo (también conocido como un subgrupo de antígenos neurópilo) .

Un mejor entendimiento de la función paraneoplásica de los antígenos neuronales (u onconeuronales) junto con la simulación PND en animales resulta en estrategias de tratamiento mejoradas. Sin embargo, para el clínico que actualmente se afronta a estos pacientes, la mejor probabilidad de afectar el resultado neurológico depende de: (1) el rápido diagnóstico de la enfermedad, (2) el descubrimiento y el tratamiento temprano del tumor, y (3) el uso de inmunoterapia. En consecuencia, existe la necesidad de un método de diagnóstico confiable para la presencia de la encefalitis autoinmune y la posibilidad de que las crisis epilépticas observadas sean ocasionadas por tumores (a veces ocultos) .

Esta invención proporciona métodos para diagnosticar o determinar una causa de una encefalitis o una epilepsia autoinmune en un sujeto y para diagnosticar un tumor en un sujeto, el cual consta en ensayar el líquido corporal del sujeto para detectar un anticuerpo a una subunidad NR del receptor NMDA.

En una realización, la presente invención proporciona un método para determinar la causa de una encefalitis en un sujeto, el cual consta en ensayar el líquido corporal del sujeto para detectar un anticuerpo a una subunidad NR del receptor NMDA (NMDAR) , determinando por lo tanto una causa de una encefalitis en un sujeto. En otra realización, la presencia de un anticuerpo a una subunidad NR en el líquido corporal indica que la encefalitis es de etiología autoinmune. Cada posibilidad representa una realización separada de la presente invención.

En otra realización, la presente invención proporciona un método para determinar una causa de una encefalitis autoinmune en un sujeto, el cual consta en ensayar el líquido corporal del sujeto para detectar un anticuerpo a una subunidad NR del receptor NMDA, determinando por lo tanto una causa de una encefalitis autoinmune en un sujeto. En otra realización, la presencia del anticuerpo indica una presencia de un tumor en el sujeto. En otra realización, el tumor es una causa de la encefalitis autoinmune. Cada posibilidad representa una realización separada de la presente invención.

En otra realización, la presente invención proporciona un método para determinar una causa de una encefalitis en un sujeto, el cual consta en ensayar el líquido corporal del sujeto para detectar un anticuerpo a una subunidad NR del receptor NMDA, determinando por lo tanto una causa de una epilepsia en un sujeto. En otra realización, el anticuerpo indica una presencia de un tumor en el sujeto. En otra realización, el tumor es una causa de la epilepsia. Cada posibilidad representa una realización separada de la presente invención.

En otra realización, la presente invención proporciona un método para diagnosticar un tumor en un sujeto que tiene una encefalitis, el cual consta en ensayar el líquido corporal del sujeto para detectar un anticuerpo a una subunidad NR del receptor NMOA, determinando por lo tanto un tumor en un sujeto que tiene una encefalitis. En otra realización, la presencia del anticuerpo indica una presencia de un tumor en el sujeto. Cada posibilidad representa una realización separada de la presente invención.

En otra realización, la presente invención proporciona un método para diagnosticar un tumor en un sujeto que tiene una epilepsia, el cual consta en ensayar el líquido corporal del sujeto para detectar un anticuerpo a una subunidad NR del receptor NMOA, diagnosticando por lo tanto un tumor en un sujeto que tiene una epilepsia. En otra realización, la presencia del anticuerpo indica una presencia de un tumor en el sujeto. Cada posibilidad representa una realización separada de la presente invención.

Figura 1: Anticuerpos de las neuronas del hipocampo en LE de etiología poco clara. Las secciones sagitales del cerebro de la rata reaccionaron con los sueros de varios pacientes LE. Fila superior: 3 casos mostraron reactividad intensa con el neurópilo del hipocampo. Los casos N°. 2 Y 6 compitieron por los mismos epítopos (no se muestran) ; el caso N°. 2 tenía un anticuerpo adicional contra un subconjunto de neuronas en la parte interna de la circunvolución dentada (se muestra en la fila del medio) . Las filas del medio e inferiores a ampliación alta muestran la reactividad de los casos N°. 1, 2, 5, 7 Y un control anti-Hu. Comparar la reactividad intracelular del caso N°. 7 Y anti-Hu con la reactividad predominante del neurópilo de los casos N° 1, 2 Y 5 que no afectan el núcleo y el citoplasma de las neuronas (con excepción del N°. 2 que etiqueta un subconjunto de células) . Sólo el caso N°.1 tuvo anticuerpos VGKC. Las flechas apuntan a las circunvoluciones dentadas para permitir la comparación entre paneles. (Fila superior x5, filas del medio e inferior x 200) .

Figura 2. Etiquetado inmune de neuronas con anticuerpos nobles de un paciente con LE. Cultivos de neuronas del hipocampo de rata: (A) incubados con el líquido cefalorraquídeo (LCR) de los pacientes, (B) co-etiquetados con sinaptofisina o (C) con espinofilina. Los anticuerpos de los pacientes (rojos en todos los paneles en el original) muestran una reactividad intensa con la membrana celular, con una colocalización limitada con la espinofilina (amarillos en C en el original) y menos con la sinaptofisina (B) . (x800 aceite) .

Figura 3. La reactividad de los anticuerpos de los pacientes con el hipocampo y el prosencéfalo, y la colocalización con la subunidad NR2B del receptor del N-metilo -O -aspartato (NMOAR) . (A) Sección sagital del cerebro de una rata inmunoetiquetada con el líquido cefalorraquídeo del paciente. Note la reactividad robusta con el hipocampo y la leve reactividad con el prosencéfalo. El cerebelo se escatima en gran parte. (B) Mayor ampliación de la capa molecular del hipocampo (flecha en A) ; este patrón de reactividad es idéntico al anteriormente reportado en pacientes con encefalitis paraneoplásica y teratomas del ovario. 4 (C-E) Inmunoetiquetación doble de los cultivos de neuronas del hipocampo de ratas usando anticuerpos del paciente (C, verde) y un anticuerpo contra NR2B de la NMOAR (E, rojo) ; note la importante colocalización de reactividades (O, amarillo) . Estos hallazgos sugirieron que los anticuerpos de los pacientes estaban dirigidos contra el NMOAR. Estudios posteriores demostraron que el paciente tenía también anticuerpos contra NR2A (no se muestran) , lo cual explica, en parte, la colocalización parcial de las reactividades. Ampliación original X2, 5 (A) y X400 (B) , ambas contrateñidas... [Seguir leyendo]

1. Un método para diagnosticar un receptor anti-NMDA de encefalitis en un sujeto, consiste del paso de pruebas de una muestra biológica obtenida del sujeto para detectar la presencia de un anticuerpo contra la subunidad NR de un receptor NMDA, en donde una presencia de dicho anticuerpo en dicha muestra biológica indica dicho receptor antiNMDA de encefalitis, y en donde el receptor anti-NMDA de encefalitis está asociado con movimiento distónico, disquinesias, o inestabilidad autónoma, diagnosticando por lo tanto a dicho receptor anti-NMDA de encefalitis en dicho sujeto.

2. El método de la reivindicación 1, en donde la subunidad NR es NR1 o NR2.

3. Un método para diagnosticar la encefalitis autoinmune asociada con un tumor en un sujeto, consiste del paso de pruebas de una muestra biológica obtenida del sujeto para un anticuerpo a un heterómero NR de un receptor NMDA, en donde una presencia de dicho anticuerpo en dicha muestra biológica indica una encefalitis autoinmune asociada con un tumor, determinando por lo tanto una causa de dicha encefalitis en un sujeto.

4. El método de la reivindicación 3, en donde dicho tumor es un teratoma del ovario.

5. Un método de diagnosticar un tumor oculto asociado con una encefalitis autoinmune en un sujeto, consiste del paso de pruebas de un líquido corporal obtenido de un sujeto para un anticuerpo a un heterómero NR del receptor NMDA, donde una presencia de dicho anticuerpo indica una presencia de un tumor oculto en dicho sujeto y que dicho tumor es una causa de dicha encefalitis autoinmune.

6. El método de la reivindicación 5, donde dicha encefalitis autoinmune es

(i) una encefalitis autoinmune paraneoplásica, o

(ii) una encefalitis autoinmune que consiste de una encefalitis límbica; o

(iii) una encefalitis autoinmune que está asociada con crisis epilépticas; o (iv) una encefalitis autoinmune que está asociada con síntomas patológicos.

7. El método de la reivindicación 6 (iv) , donde dichos síntomas patológicos son síntomas psiquiátricos; una anormalidad en cognición y comportamiento, un trastorno del movimiento; una disminución del nivel de consciencia; inestabilidad autónoma; hipoventilación; amnesia o un déficit de memoria; o una combinación de los mismos.

8. Un método para diagnosticar epilepsia en un sujeto, consiste del paso de pruebas de un líquido corporal obtenido del sujeto para la presencia de un anticuerpo a un heterómero NR del receptor NMDA, donde una presencia de dicho anticuerpo indica una presencia de un tumor en dicho sujeto y que dicho tumor es una causa de dicha epilepsia, diagnosticando por lo tanto la epilepsia en dicho sujeto.

9. El método de cualquiera de las reivindicaciones 3 a 8, donde dicho heterómero NR es heterómero NR1 y NR2.

10. El método de la reivindicación 9, donde dicho heterómero NR

(i) es un heterómero NR2A; o

(ii) es un heterómero NR2B; o

(iii) es un heterómero NR2C.

11. El método de cualquiera de las reivindicaciones 1 a 10, donde el líquido corporal es líquido cefalorraquídeo (LCR) .

12. Un método de diagnosticar un tumor en un sujeto que tiene epilepsia, consiste del paso de pruebas de un líquido corporal obtenido del sujeto para un anticuerpo a un heterómero NR del receptor NMDA, donde una presencia de dicho anticuerpo indica una presencia de un tumor en dicho sujeto, por lo tanto diagnosticando un tumor en un sujeto que tiene una epilepsia.

13. El método de la reivindicación 12, donde el heterómero NR del receptor NMDA es un heterómero NR1, NR2 o ambos.

14. El método de la reivindicación 13, donde dichos heterómero NR2 es una subunidad NR2B, una subunidad NR2A

o una subunidad NR2C.

Figura 1

Figura 2

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Figura 3

Figura 4

Figura 5

Figura 6

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Figura 7

Figura 8