METODO Y DISPOSITIVO DE ANALISIS MICROBIOLOGICO RAPIDO.

Dispositivo para el análisis microbiológico rápido de un soporte microporoso (19) que tiene dos caras opuestas (10,

11) adaptadas para retener microorganismos, que incluye:

- unos medios (5) para sujetar dicho soporte (19) en una posición predeterminada en la cual una primera cara (10) de dichas caras enfrentadas de dicho soporte (19), está en una primera posición predeterminada y una segunda cara (11) de dichas caras enfrentadas de dicho soporte (19) está en una segunda posición predeterminada;

- una estación (2) para rociar sobre dicho soporte (19) un reactivo para revelar la presencia de ATP por luminiscencia, estando dicha estación (2) enfrente de dicha primera posición; y

- una estación (4) para medir dicha luminiscencia, enfrente de dicha segunda posición; caracterizado porque dicha estación de rociado y dicha estación de medición están una enfrente de la otra; por lo que dicho dispositivo es adecuado para analizar soportes cuando dicha luminiscencia es emitida por lo menos en el lado enfrentado al lado en el que se pulveriza dicho reactivo

Método y dispositivo de análisis microbiológico rápido.

La presente invención se refiere a un dispositivo y a un método de análisis microbiológico rápido.

Actualmente, en el marco de las actividades industriales y médicas, el control de la calidad microbiológica de líquidos, gases o superficies, tiene que ajustarse a unas normas estrictas.

Por ello, las autoridades industriales y sanitarias y de seguridad tienen que poder disponer de herramientas para detectar una contaminación microbiológica lo más rápido posible, para poder aplicar con tiempo un remedio con un coste reducido.

En la práctica, la vigilancia microbiológica se realiza sobre un medio gelificado, sobre el cual los microorganismos que se han recogido sobre una membrana microporosa, se cultivan hasta que son visibles a simple vista.

El tiempo de incubación varía de un microorganismo a otro, pero generalmente es de al menos 24 horas y a veces más largo para microorganismos de crecimiento más lento (por ejemplo, las microbacterias) o porque los microorganismos están sometidos a estrés debido a sus condiciones ambientales.

Un modo de acelerar la detección, es reducir la duración mínima del cultivo (o incluso eliminarlo totalmente, en el caso de determinados microorganismos) basando la detección de los microorganismos en su actividad metabólica.

Un marcador metabólico universal, generalmente el trifosfato de adenosina (ATP), contenido en microorganismos vivos, se mide poniéndole en contacto con un reactivo que revela la presencia de ATP por luminiscencia, de modo que se puede detectar la presencia de microorganismos sin tener que esperar a que se formen las colonias sobre un medio gelificado y que sean visibles a simple vista.

La cantidad de luz emitida es una función de la masa del ATP y, por lo tanto, del número de microorganismos.

Ya se conoce en la técnica el dispositivo para la detección microbiológica rápida, Milliflex®, del solicitante que incluye:

- una estación en la cual un volumen de líquido se filtra a través de una membrana para capturar sobre la membrana del filtro cualquier microorganismo contenido en ese líquido;

- una estación para rociar un agente adaptado para hacer que el ATP de esos microorganismos sea accesible y un reactivo para revelar la presencia de ATP por luminiscencia, enfrente de la cual, el técnico coloca la membrana, después de la etapa de filtración, para que los reactivos se depositen sucesivamente; y

- una estación de medición de la cantidad de luz emitida en respuesta al depósito del reactivo, para revelar la presencia de ATP por luminiscencia, enfrente de la cual, el técnico coloca la membrana después de la etapa de rociado, recogiendo la luz emitida por la membrana con una cámara CCD, tratando y después analizado para detectar la presencia de microorganismos sobre la membrana.

El documento de patente de EE.UU. 3.940.250 sobre el que se basa el preámbulo de la reivindicación 1, describe otro dispositivo detector microbiológico rápido que comprende una estación de rociado y una estación de medición, para películas enrolladas en ambos lados.

El objetivo de la invención es proporcionar un dispositivo del mismo tipo que sea compacto y rápido, y que ofrezca una alta eficacia.

Para ello, se propone un dispositivo para el análisis microbiológico rápido, de un soporte microporoso, que tiene dos caras enfrentadas, adaptadas para retener microorganismos, que incluye:

- unos medios para sujetar dicho soporte en una posición predeterminada en la cual una primera cara de dichas caras enfrentadas de dicho soporte, está en una primera posición predeterminada y una segunda cara de dichas caras enfrentadas de dicho soporte está en una segunda posición predeterminada;

- una estación de rociado sobre dicho soporte, de un reactivo para revelar la presencia de ATP por luminiscencia, estando dicha estación enfrente de dicha primera posición; y

- una estación de medición de dicha luminiscencia, enfrente de dicha segunda posición;

caracterizado porque dicha estación de rociado y dicha estación de medición están una frente a otra;

por lo que dicho dispositivo es adecuado para analizar soportes cuando dicha luminiscencia se emite por lo menos en el lado enfrentado al lado en el que se pulveriza dicho reactivo.

Ya que la luz es emitida por el soporte en el lado que está enfrente de la estación de medición, la estación de medición y la estación de rociado están dispuestas cada una en un lugar óptimo para satisfacer sus funciones respectivas, simultáneamente.

Así, la estación de medición está situada lo más cerca posible del soporte, para recoger la mayor cantidad posible de luz emitida, sin estar impedida por la estación de rociado y sin impedir la pulverización.

De acuerdo con las características de la invención, que se prefieren por razones de sencillez y comodidad en la fabricación y en el uso:

- dicha estación de rociado está alineada con dicha primera posición;

- dicha estación de medición está alineada con dicha segunda posición;

- dichos medios de sujeción incluyen una placa que tiene un orificio en su centro;

- dicha placa incluye una pestaña anular alrededor de dicho orificio;

- dicha estación de medición incluye un fotomultiplicador y un miembro de cierre;

- dicho miembro de cierre incluye una placa fina opaca, móvil entre una posición en la que está lejos de dicho fotomultiplicador y una posición en la que aísla dicho fotomultiplicador de la luz;

- dicha estación de rociado incluye una boquilla de pulverización;

- dicho dispositivo incluye además, una estación de lisis de los microorganismos;

- dicha estación de lisis incluye una caja de microondas y un magnetrón;

- dicha caja de microondas tiene forma de paralelepípedo;

- dicha caja incluye un primer cuerpo de caja, un segundo cuerpo de caja y una abrazadera a la cual están unidos dichos primer y segundo cuerpos de la caja;

- dicha caja tiene una ventana en dicha abrazadera entre dichos primer y segundo cuerpos de la caja;

- dicha ventana se abre sobre dicha estación de rociado y dicha estación de medición;

- dichos medios de sujeción están adaptados para mover dicho soporte desde dicha posición predeterminada a una posición en la que dicho soporte está en el interior de dicha estación de lisis;

- dichos medios de sujeción están conectados con una cinta a un motor; y/o

- dicho reactivo se basa en luciferina-luciferasa.

Un segundo aspecto de la invención consiste en un método de análisis microbiológico rápido de un soporte susceptible de contener microorganismos, caracterizado porque incluye:

- la etapa de obtener un dispositivo del tipo anterior;

- la etapa de situar dicho soporte en dicha posición predeterminada;

- la etapa de rociar dicho reactivo sobre dicho soporte; y

- y simultáneamente a dicha etapa de rociado, la etapa de medición de la cantidad de luz emitida como respuesta a dicho reactivo.

La configuración del dispositivo con la estación de rociado situada enfrente de la estación de medición, indica que las etapas de rociado y de medición se pueden efectuar simultáneamente y de forma óptima durante el desarrollo del método.

Según las características que se prefieren por razones de sencillez y de comodidad para la fabricación y el uso, se selecciona como soporte una membrana microporosa.

Las características y las ventajas de la invención se revelan con la siguiente descripción, que se ofrece a modo de ejemplo preferido pero no limitativo, haciendo referencia a los dibujos adjuntos, en los cuales:

- la figura 1 es una vista en perspectiva, de un dispositivo para análisis microbiológico rápido, que muestra un carro móvil del dispositivo en una posición en la cual recibe una unidad de filtro;

- la figura 2 es una vista en perspectiva a una escala mayor que en la figura 1, de este dispositivo en una sección de un plano vertical centrado en la trayectoria del carro;

- las figuras 3 y 4 son vistas similares a la figura 2, pero que muestran respectivamente la posición que ocupa el carro móvil...

1. Dispositivo para el análisis microbiológico rápido de un soporte microporoso (19) que tiene dos caras opuestas (10, 11) adaptadas para retener microorganismos, que incluye:

- unos medios (5) para sujetar dicho soporte (19) en una posición predeterminada en la cual una primera cara (10) de dichas caras enfrentadas de dicho soporte (19), está en una primera posición predeterminada y una segunda cara (11) de dichas caras enfrentadas de dicho soporte (19) está en una segunda posición predeterminada;

- una estación (2) para rociar sobre dicho soporte (19) un reactivo para revelar la presencia de ATP por luminiscencia, estando dicha estación (2) enfrente de dicha primera posición; y

- una estación (4) para medir dicha luminiscencia, enfrente de dicha segunda posición;

caracterizado porque dicha estación de rociado y dicha estación de medición están una enfrente de la otra;

por lo que dicho dispositivo es adecuado para analizar soportes cuando dicha luminiscencia es emitida por lo menos en el lado enfrentado al lado en el que se pulveriza dicho reactivo.

2. Dispositivo según la reivindicación 1, caracterizado porque dicha estación de rociado (2) está alineada con dicha primera posición.

3. Dispositivo según la reivindicación 1 o la reivindicación 2, caracterizado porque dicha estación de medición (4) está alineada con dicha segunda posición.

4. Dispositivo según una cualquiera de las reivindicaciones 1 a 3, caracterizado porque dichos medios de sujeción incluyen una placa (12) que tiene un orificio en su centro.

5. Dispositivo según la reivindicación 4, caracterizado porque dicha placa (12) incluye una pestaña anular (13) alrededor de dicho orificio.

6. Dispositivo según una cualquiera de las reivindicaciones 1 a 5, caracterizado porque dicha estación de medición incluye un fotomultiplicador (50) y un elemento de cierre (52).

7. Dispositivo según la reivindicación 6, caracterizado porque dicho elemento de cierre (52) incluye una placa opaca delgada (53) móvil entre una posición en la cual está alejada de dicho fotomultiplicador (50) y una posición en la cual aísla dicho fotomultiplicador (50) de la luz.

8. Dispositivo según una cualquiera de las reivindicaciones 1 a 7, caracterizado porque dicha estación de rociado (2) incluye una boquilla de pulverización (21).

9. Dispositivo según una cualquiera de las reivindicaciones 1 a 8, caracterizado porque incluye adicionalmente una estación de lisis de los microorganismos (3).

10. Dispositivo según la reivindicación 9, caracterizado porque dicha estación de lisis incluye una caja de microondas (30) y un magnetrón (31).

11. Dispositivo según la reivindicación 10, caracterizado porque dicha caja de microondas (30) tiene forma de paralelepípedo.

12. Dispositivo según la reivindicación 11, caracterizado porque dicha caja (30) incluye un primer cuerpo de la caja (28), un segundo cuerpo de la caja (29) y una abrazadera (32) a la que se unen dichos primer y segundo cuerpos de la caja.

13. Dispositivo según la reivindicación 12, caracterizado porque dicha caja (30) tiene una ventana (39) entre dichos primer y segundo cuerpos de la caja.

14. Dispositivo según la reivindicación 13, caracterizado porque dicha ventana (39) se abre sobre dicha estación de rociado (2) y dicha estación de medición (4).

15. Dispositivo según una cualquiera de las reivindicaciones 9 a 14, caracterizado porque dichos medios de sujeción (5) están adaptados para mover dicho soporte desde dicha posición predeterminada hasta una posición en la cual dicho soporte (19) está en el interior de dicha estación de lisis (3).

16. Dispositivo según la reivindicación 15, caracterizado porque dichos medios de sujeción (5) están conectados con una cinta (64) a un motor (65).

17. Dispositivo según una cualquiera de las reivindicaciones 1 a 16, caracterizado porque dicho reactivo se basa en luciferina-luciferasa.

18. Método de análisis microbiológico rápido de un soporte susceptible de contener microorganismos, caracterizado porque incluye:

- la etapa de proporcionar un dispositivo según una cualquiera de las reivindicaciones 1 a 17;

- la etapa de colocar dicho soporte (19) en dicha posición predeterminada;

- la etapa de rociar dicho reactivo sobre dicho soporte (19); y

- simultáneamente a dicha etapa de rociado, la etapa de medición de la cantidad de luz emitida como respuesta a dicho reactivo.

19. Método según la reivindicación 18, caracterizado porque como soporte se selecciona una membrana microporosa (19).