Procedimiento no radioactivo de determinación de la acción citolítica de un agente frente a células diana, su utilización y su kit asociado.

Procedimiento no radioactivo de determinación (control y cuantificación) in vitro directo de la acción citolítica de un agente activo frente a células diana y/o de un medio que lo rodea de las células diana que comprende las etapas sucesivas siguientes:



i) Transformación genética de células diana para expresar una enzima exógena a dichas células diana,

ii) Exposición de dichas células diana genéticamente transformadas con el agente activo y/o con dicho medio que lo rodea a ensayar, pudiendo llevar a la lisis de al menos una parte de las células diana liberando dicha enzima exógena en el medio extracelular,

iii) Medir la actividad de la enzima exógena liberada durante la lisis de dichas células diana

caracterizado por que dicha enzima exógena es una enzima de masa molar inferior o igual a 45 kDa que posee una secuencia peptídica que presenta al menos un 60% de homología con la secuencia peptídica salvaje de la subunidad 19 kDa de la luciferasa producida por la gamba Oplophorus gracilirostris, y cuya actividad es detectable por luminiscencia o fluorescencia y por que dicha enzima exógena se expresa sola y en forma libre en el citoplasma de dichas células diana.

Tipo: Patente Internacional (Tratado de Cooperación de Patentes). Resumen de patente/invención. Número de Solicitud: PCT/FR2016/050458.

Solicitante: Clean Cells.

Nacionalidad solicitante: Francia.

Dirección: Parc d'Activité Vendée Sud Loire 85600 Bouffere FRANCIA.

Inventor/es: BONNAUDET,VÉRONIQUE, BRETAUDEAU,LAURENT, ROSSIGNOL,ALEXIS.

Fecha de Publicación: .

Clasificación Internacional de Patentes:

  • C12Q1/66 SECCION C — QUIMICA; METALURGIA.C12 BIOQUIMICA; CERVEZA; BEBIDAS ALCOHOLICAS; VINO; VINAGRE; MICROBIOLOGIA; ENZIMOLOGIA; TECNICAS DE MUTACION O DE GENETICA.C12Q PROCESOS DE MEDIDA, INVESTIGACION O ANALISIS EN LOS QUE INTERVIENEN ENZIMAS O MICROORGANISMOS (ensayos inmunológicos G01N 33/53 ); COMPOSICIONES O PAPELES REACTIVOS PARA ESTE FIN; PROCESOS PARA PREPARAR ESTAS COMPOSICIONES; PROCESOS DE CONTROL SENSIBLES A LAS CONDICIONES DEL MEDIO EN LOS PROCESOS MICROBIOLOGICOS O ENZIMOLOGICOS. › C12Q 1/00 Procesos de medida, investigación o análisis en los que intervienen enzimas o microorganismos (aparatos de medida, investigación o análisis con medios de medida o detección de las condiciones del medio, p. ej. contadores de colonias, C12M 1/34 ); Composiciones para este fin; Procesos para preparar estas composiciones. › en los que interviene una luciferasa.
  • G01N33/50 SECCION G — FISICA.G01 METROLOGIA; ENSAYOS.G01N INVESTIGACION O ANALISIS DE MATERIALES POR DETERMINACION DE SUS PROPIEDADES QUIMICAS O FISICAS (procedimientos de medida, de investigación o de análisis diferentes de los ensayos inmunológicos, en los que intervienen enzimas o microorganismos C12M, C12Q). › G01N 33/00 Investigación o análisis de materiales por métodos específicos no cubiertos por los grupos G01N 1/00 - G01N 31/00. › Análisis químico de material biológico, p. ej. de sangre, de orina; Investigación o análisis por métodos en los que interviene la formación de uniones bioespecíficas con grupos coordinadores; Investigación o análisis inmunológico (procedimientos de medida, de investigación o análisis diferentes de los procedimientos inmunológicos en los que intervienen enzimas o microorganismos, composiciones o papeles reactivos a este efecto; procedimientos para preparar estas composiciones, procedimientos de control sensibles a las condiciones del medio en los procedimientos microbiológicos o enzimáticos C12Q).

PDF original: ES-2715557_T3.pdf

 

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