Métodos para aumentar la pureza de proteínas utilizando la cromatografía basada en proteína A.

Un método para reducir el nivel de agregados de proteínas en una mezcla de elución que contiene una proteína que contiene Fc,

y el método comprende las etapas de:

(a) proporcionar una muestra que comprende una proteína que contiene Fc y agregados de proteína;

(b) poner en contacto la muestra con un ligando de Proteína A inmovilizado sobre un soporte sólido, en donde el ligando de Proteína A comprende la secuencia de aminoácidos expuesta en la SEQ ID Nº: 3 o la SEQ ID Nº: 4, de manera que la proteína que contiene la región Fc se une al ligando de Proteína A;

(c) obtener una mezcla de elución que contiene la proteína que contiene Fc usando:

i) un método de gradiente de pH que emplea un tampón de pH alto y un tampón de pH bajo;

o

ii) un método de etapas de pH que emplea dos o más tampones usados secuencialmente en el orden de valores de pH descendentes, en donde en cualquier caso al menos el 30% de los agregados de proteínas se eliminan antes de la elución de la proteína que contiene Fc, además de los agregados de proteínas que se eliminan después de la elución de la proteína que contiene Fc, lo que reduce el nivel de agregados de proteínas en la mezcla de elución.

Tipo: Patente Internacional (Tratado de Cooperación de Patentes). Resumen de patente/invención. Número de Solicitud: PCT/US2014/021802.

Solicitante: EMD Millipore Corporation.

Nacionalidad solicitante: Estados Unidos de América.

Dirección: 400 Summit Drive Burlington, MA 01803 ESTADOS UNIDOS DE AMERICA.

Inventor/es: BIAN, NANYING, HOLSTEIN,MELISSA.

Fecha de Publicación: .

Clasificación Internacional de Patentes:

  • B01D15/38 SECCION B — TECNICAS INDUSTRIALES DIVERSAS; TRANSPORTES.B01 PROCEDIMIENTOS O APARATOS FISICOS O QUIMICOS EN GENERAL.B01D SEPARACION (separación de sólidos por vía húmeda B03B, B03D, mesas o cribas neumáticas B03B, por vía seca B07; separación magnética o electrostática de materiales sólidos a partir de materiales sólidos o de fluidos, separación mediante campos eléctricos de alta tensión B03C; aparatos centrifugadores B04B;   aparato de vórtice   B04C; prensas en sí para exprimir los líquidos de las sustancias que los contienen B30B 9/02). › B01D 15/00 Procedimientos de separación que implican el tratamientos de líquidos con absorbentes sólidos; Aparatos para ello. › implicando una interacción no cubierta por uno o varios grupos B01D 15/30 - B01D 15/36, p.ej. afinidad, intercambio de ligando o cromatografía quiral.
  • C07K1/22 SECCION C — QUIMICA; METALURGIA.C07 QUIMICA ORGANICA.C07K PEPTIDOS (péptidos que contienen β -anillos lactamas C07D; ipéptidos cíclicos que no tienen en su molécula ningún otro enlace peptídico más que los que forman su ciclo, p. ej. piperazina diones-2,5, C07D; alcaloides del cornezuelo del centeno de tipo péptido cíclico C07D 519/02;   proteínas monocelulares, enzimas C12N; procedimientos de obtención de péptidos por ingeniería genética C12N 15/00). › C07K 1/00 Procedimientos generales de preparación de péptidos. › Cromatografía de afinidad o técnicas análogas basadas en procesos de absorción selectiva.
  • C07K1/36 C07K 1/00 […] › por una combinación de varios procesos de diferentes tipos.
  • C07K14/31 C07K […] › C07K 14/00 Péptidos con más de 20 aminoácidos; Gastrinas; Somatostatinas; Melanotropinas; Sus derivados. › de Staphylococcus (G).

PDF original: ES-2735354_T3.pdf

 

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