Método para la evaluación cuantitativa en una muestra biológica de la forma fosforilada y no fosforilada de RKIP.

Método para la medición cuantitativa de la proteína RKIP y de la proteína p-RKIP en una muestra biológica,

que comprende las etapas de:

a) recubrir con dos soportes distintos:

a1) un anticuerpo que reconoce una primera secuencia de aminoácidos presente en la proteína p-RKIP y

a2) un anticuerpo que reconoce una primera secuencia de aminoácidos presente en la proteína RKIP;

b) añadir una solución de bloqueo a ambos soportes,

c) añadir dicha muestra biológica;

d) añadir, en los respectivos soportes

d1) un anticuerpo que reconoce una segunda secuencia de aminoácidos presente en la proteína p-RKIP y

d2) un anticuerpo que reconoce una segunda secuencia de aminoácidos presente en la proteína RKIP;

siendo una de dichas secuencias de aminoácidos primera y segunda común entre RKIP y p- RKIP, y siendo la otra una secuencia que contiene la fosforilación de la serina 153, y por lo tanto, diferente para p-RKIP y RKIP;

e) añadir un marcador capaz de determinar una variación de las propiedades ópticas proporcional a la cantidad de dicho anticuerpo unido a dicha segunda secuencia de aminoácidos, cuando está en contacto con dicho anticuerpo que reconoce dicha segunda secuencia de aminoácidos;

f) medir una propiedad óptica de las dos muestras y compararla con una curva de calibración obtenida midiendo la misma propiedad óptica de dos series de soportes, en los cuales se han añadido, en el orden:

i) un anticuerpo que reconoce dicha primera secuencia de aminoácidos presente en la proteína p-RKIP para la primera de dichas series y dicha primera secuencia de aminoácidos presente en la proteína RKIP para la segunda de dichas series ii) una solución de bloqueo

iii) cantidades conocidas y crecientes de un patrón híbrido recombinante que comprende dichas secuencias de aminoácidos tanto primera como segunda presentes en la proteína p-RKIP para la primera de dichas series y dichas secuencias de aminoácidos tanto primera como segunda presentes en la proteína RKIP para la segunda de dichas series;

iv) anticuerpos que reconocen específicamente dicha segunda secuencia de aminoácidos presente en p-RKIP o dicha segunda secuencia presente en RKIP, respectivamente;

v) un marcador capaz de determinar una variación de las propiedades ópticas proporcional a la cantidad de dicho anticuerpo unido a dicha segunda secuencia de aminoácidos, cuando está en contacto con dicho anticuerpo que reconoce dicha segunda secuencia de aminoácidos.

Tipo: Patente Internacional (Tratado de Cooperación de Patentes). Resumen de patente/invención. Número de Solicitud: PCT/IB2017/051628.

Solicitante: Fluidia S.r.l.

Nacionalidad solicitante: Italia.

Dirección: Viale Giovanni Gentile 30 71122 Foggia ITALIA.

Inventor/es: PAPALE,MASSIMO.

Fecha de Publicación: .

Clasificación Internacional de Patentes:

  • G01N33/574 FISICA.G01 METROLOGIA; ENSAYOS.G01N INVESTIGACION O ANALISIS DE MATERIALES POR DETERMINACION DE SUS PROPIEDADES QUIMICAS O FISICAS (procedimientos de medida, de investigación o de análisis diferentes de los ensayos inmunológicos, en los que intervienen enzimas o microorganismos C12M, C12Q). › G01N 33/00 Investigación o análisis de materiales por métodos específicos no cubiertos por los grupos G01N 1/00 - G01N 31/00. › para el cáncer.

PDF original: ES-2774107_T3.pdf

 

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