Método para la evaluación cuantitativa en una muestra biológica de la forma fosforilada y no fosforilada de RKIP.
Método para la medición cuantitativa de la proteína RKIP y de la proteína p-RKIP en una muestra biológica,
que comprende las etapas de:
a) recubrir con dos soportes distintos:
a1) un anticuerpo que reconoce una primera secuencia de aminoácidos presente en la proteína p-RKIP y
a2) un anticuerpo que reconoce una primera secuencia de aminoácidos presente en la proteína RKIP;
b) añadir una solución de bloqueo a ambos soportes,
c) añadir dicha muestra biológica;
d) añadir, en los respectivos soportes
d1) un anticuerpo que reconoce una segunda secuencia de aminoácidos presente en la proteína p-RKIP y
d2) un anticuerpo que reconoce una segunda secuencia de aminoácidos presente en la proteína RKIP;
siendo una de dichas secuencias de aminoácidos primera y segunda común entre RKIP y p- RKIP, y siendo la otra una secuencia que contiene la fosforilación de la serina 153, y por lo tanto, diferente para p-RKIP y RKIP;
e) añadir un marcador capaz de determinar una variación de las propiedades ópticas proporcional a la cantidad de dicho anticuerpo unido a dicha segunda secuencia de aminoácidos, cuando está en contacto con dicho anticuerpo que reconoce dicha segunda secuencia de aminoácidos;
f) medir una propiedad óptica de las dos muestras y compararla con una curva de calibración obtenida midiendo la misma propiedad óptica de dos series de soportes, en los cuales se han añadido, en el orden:
i) un anticuerpo que reconoce dicha primera secuencia de aminoácidos presente en la proteína p-RKIP para la primera de dichas series y dicha primera secuencia de aminoácidos presente en la proteína RKIP para la segunda de dichas series ii) una solución de bloqueo
iii) cantidades conocidas y crecientes de un patrón híbrido recombinante que comprende dichas secuencias de aminoácidos tanto primera como segunda presentes en la proteína p-RKIP para la primera de dichas series y dichas secuencias de aminoácidos tanto primera como segunda presentes en la proteína RKIP para la segunda de dichas series;
iv) anticuerpos que reconocen específicamente dicha segunda secuencia de aminoácidos presente en p-RKIP o dicha segunda secuencia presente en RKIP, respectivamente;
v) un marcador capaz de determinar una variación de las propiedades ópticas proporcional a la cantidad de dicho anticuerpo unido a dicha segunda secuencia de aminoácidos, cuando está en contacto con dicho anticuerpo que reconoce dicha segunda secuencia de aminoácidos.
Tipo: Patente Internacional (Tratado de Cooperación de Patentes). Resumen de patente/invención. Número de Solicitud: PCT/IB2017/051628.
Solicitante: Fluidia S.r.l.
Nacionalidad solicitante: Italia.
Dirección: Viale Giovanni Gentile 30 71122 Foggia ITALIA.
Inventor/es: PAPALE,MASSIMO.
Fecha de Publicación: .
Clasificación Internacional de Patentes:
- G01N33/574 FISICA. › G01 METROLOGIA; ENSAYOS. › G01N INVESTIGACION O ANALISIS DE MATERIALES POR DETERMINACION DE SUS PROPIEDADES QUIMICAS O FISICAS (procedimientos de medida, de investigación o de análisis diferentes de los ensayos inmunológicos, en los que intervienen enzimas o microorganismos C12M, C12Q). › G01N 33/00 Investigación o análisis de materiales por métodos específicos no cubiertos por los grupos G01N 1/00 - G01N 31/00. › para el cáncer.
PDF original: ES-2774107_T3.pdf
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