Fermentación total de oligosacáridos.
Un método para producir al menos un oligosacárido de interés por fermentación total mediante células hospedadoras modificadas genéticamente,
comprendiendo el oligosacárido de interés un disacárido de la galactosa-(1->4)-glucosa terminal, y comprendiendo el método las etapas de:
a) obtener
(i) una célula hospedadora bacteriana que puede producir oligosacáridos que comprenden un disacárido de galactosa-(1->4)-glucosa terminal, y que comprende
- al menos una secuencia de ácido nucleico recombinante que codifica una proteína que tiene una actividad beta-1,4-galactosiltransferasa y que puede galactosilar un monosacárido de glucosa libre para generar de forma intracelular lactosa,
- al menos una secuencia de ácido nucleico recombinante que codifica una glucosiltransferasa que se selecciona de al menos una de las siguientes: una fucosiltransferasa, una sialiltransferasa, una glucosamiltransferasa, una galactosiltransferasa,
y dicha célula hospedadora bacteriana puede generar el oligosacárido sin la adición exógena de lactosa, o
(ii) una primera célula hospedadora bacteriana que comprende una secuencia de ácido nucleico recombinante que codifica una proteína que tiene una actividad beta-1,4-galactosiltransferasa y que puede galactosilar un monosacárido de glucosa libre para generar de forma intracelular lactosa, y una segunda célula hospedadora bacteriana que comprende al menos una secuencia de ácido nucleico recombinante que codifica una glucosiltransferasa que se selecciona de al menos una de las siguientes: una fucosiltransferasa, una sialiltransferasa, una glucosamiltransferasa, una galactosiltransferasa;
b) cultivar dichas células hospedadoras bacterianas (i) o (ii) de la etapa a), en el que dicho cultivo se realiza (I) a partir de una fuente de carbono que se selecciona de al menos una de las siguientes: glucosa, sacarosa, glicerol, melazas, jarabe de maíz, galactosa, gas de síntesis, monóxido de carbono, metanol, succinato, piruvato, rafinosa, en el que la célula hospedadora puede general glucosa libre dentro de la célula a partir de dicha fuente de carbono, y (II) sin suministrar de forma externa lactosa durante la ejecución del método, produciendo de este modo dicho oligosacárido de interés.
Tipo: Patente Europea. Resumen de patente/invención. Número de Solicitud: E14162869.
Solicitante: Jennewein Biotechnologie GmbH.
Nacionalidad solicitante: Alemania.
Dirección: Maarweg 32 53619 Rheinbreitbach ALEMANIA.
Inventor/es: JENNEWEIN,STEFAN.
Fecha de Publicación: .
Clasificación Internacional de Patentes:
- C12N15/70 QUIMICA; METALURGIA. › C12 BIOQUIMICA; CERVEZA; BEBIDAS ALCOHOLICAS; VINO; VINAGRE; MICROBIOLOGIA; ENZIMOLOGIA; TECNICAS DE MUTACION O DE GENETICA. › C12N MICROORGANISMOS O ENZIMAS; COMPOSICIONES QUE LOS CONTIENEN; PROPAGACION, CULTIVO O CONSERVACION DE MICROORGANISMOS; TECNICAS DE MUTACION O DE INGENIERIA GENETICA; MEDIOS DE CULTIVO (medios para ensayos microbiológicos C12Q 1/00). › C12N 15/00 Técnicas de mutación o de ingeniería genética; ADN o ARN relacionado con la ingeniería genética, vectores, p. ej. plásmidos, o su aislamiento, su preparación o su purificación; Utilización de huéspedes para ello (mutantes o microorganismos modificados por ingeniería genética C12N 1/00, C12N 5/00, C12N 7/00; nuevas plantas en sí A01H; reproducción de plantas por técnicas de cultivo de tejidos A01H 4/00; nuevas razas animales en sí A01K 67/00; utilización de preparaciones medicinales que contienen material genético que es introducido en células del cuerpo humano para tratar enfermedades genéticas, terapia génica A61K 48/00; péptidos en general C07K). › Vectores o sistemas de expresión especialmente adaptados a E. coli.
- C12N9/10 C12N […] › C12N 9/00 Enzimas, p. ej. ligasas (6.); Proenzimas; Composiciones que las contienen (preparaciones para la limpieza de los dientes que contienen enzimas A61K 8/66, A61Q 11/00; preparaciones de uso médico que contienen enzimas A61K 38/43; composiciones detergentes que contienen enzimas C11D ); Procesos para preparar, activar, inhibir, separar o purificar enzimas. › Transferasas (2.) (ribonucleasas C12N 9/22).
- C12P19/04 C12 […] › C12P PROCESOS DE FERMENTACION O PROCESOS QUE UTILIZAN ENZIMAS PARA LA SINTESIS DE UN COMPUESTO QUIMICO DADO O DE UNA COMPOSICION DADA, O PARA LA SEPARACION DE ISOMEROS OPTICOS A PARTIR DE UNA MEZCLA RACEMICA. › C12P 19/00 Preparación de compuestos que contienen radicales sacárido (ácido cetoaldónico C12P 7/58). › Polisacáridos, es decir, compuestos que contienen más de cinco radicales sacárido unidos entre ellos por enlaces glucosídicos.
- C12P19/18 C12P 19/00 […] › preparados por acción de una transferasa glicosílica, p. ej. alfa-, beta- o gamma-ciclodextrinas.
PDF original: ES-2715010_T3.pdf
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