Método para determina la cigosidad del gen fad3 en canola.

Un método para determinar la cigosidad de una planta de canola que comprende un gen fad-3c,

comprendiendo dicho método:

obtener una muestra de DNA genómico de dicha planta de canola;

producir una muestra de contacto poniendo en contacto dicha muestra de DNA genómico con un primer cebador y un segundo cebador, donde dicho primer cebador consiste en la SEQ ID NO: 2, que se une a una región de dicho gen fad-3c aguas arriba de una localización de un polimorfismo de un solo nucleótido de interés, donde dicho segundo cebador consiste en la SEQ ID NO: 3, que se une a una región de dicho gen fad-3c aguas abajo del polimorfismo de un solo nucleótido de interés, en el que dicho primer cebador y dicho segundo cebador producen un amplicón cuando se someten a las condiciones de la reacción en cadena de la polimerasa (PCR);

someter dicha muestra de contacto a condiciones de la PCR, en las que se produzca dicho amplicón;

permitir que cada una de una primera sonda fluorescente, cuya secuencia consista en SEQ ID NO: 5, y una segunda sonda fluorescente, cuya secuencia consiste en SEQ ID NO: 4,

se hibriden con el amplicón durante un período de tiempo y en una temperatura entre 50-70 grados Celsius, hibridándose preferiblemente dicha primera sonda fluorescente con dicho amplicón cuando dicho polimorfismo de un solo nucleótido de interés no está presente en dicho amplicón, hibridándose preferiblemente dicha segunda sonda fluorescente con dicho amplicón cuando está presente en dicho amplicón dicho polimorfismo de un solo nucleótido de interés;

aumentar dicha temperatura después del período de tiempo especificado en la etapa de permisión; capturar dicha fluorescencia producida por cada una de dichas primera y segunda sondas durante la etapa de aumento; y

determinar la cigosidad de dicha planta de canola, comprendiendo la etapa de determinación una comparación de la fluorescencia producida por cada una de las primera y segunda sondas, donde la fluorescencia de las primera y segunda sondas refleja predominantemente la fluorescencia producida en una muestra de control positiva al SNP homocigótico, lo que indica la presencia de dicho polimorfismo de un solo nucleótido de interés, donde la fluorescencia de las primera y segunda sondas refleja predominantemente la fluorescencia producida en una muestra de control negativa al SNP homocigótico lo que indica una falta de la presencia de dicho polimorfismo de un solo nucleótido de interés y donde la fluorescencia de la primera y segunda sondas refleja predominantemente la fluorescencia producida en una muestra de control positiva al SNP heterocigótico lo que indica que dicha planta de canola comprende un primer alelo que incluye dicho polimorfismo de un solo nucleótido de interés y un segundo alelo que carece de dicho polimorfismo de un solo nucleótido de interés.