Método de tinción reversible de una célula diana.

Un método in vitro de tinción reversible de una célula diana, comprendiendo dicha célula diana una molécula de receptor sobre la superficie de la misma, con una marca detectable, comprendiendo el método:



poner en contacto una mezcla de células que comprende dicha célula diana con

(i) un reactivo de unión a receptor, comprendiendo el reactivo de unión a receptor al menos un sitio de unión B, en el que el sitio de unión B se une específicamente a dicha molécula de receptor, en el que la constante de la velocidad de disociación (kdis) como se ha determinado por resonancia de plasmones superficiales para la unión entre dicho reactivo de unión a receptor mediante el sitio de unión B y dicha molécula de receptor tiene un valor de 0,5 x 10-4 s-1 o mayor, comprendiendo el reactivo de unión a receptor además al menos un componente de unión C, en el que el componente de unión C es capaz de ser reversiblemente unido a un sitio de unión Z de un reactivo de multimerización,

(ii) un reactivo de multimerización, comprendiendo el reactivo de multimerización al menos dos sitios de unión Z para la unión reversible del componente de unión C del reactivo de unión a receptor, en el que el reactivo de unión a receptor (i) y el reactivo de multimerización (ii) forman complejos de unión multivalentes que se unen a dicha célula diana, comprendiendo cada complejo de unión multivalente al menos dos de dichos reactivos de unión a receptor unidos a uno de dicho reactivo de multimerización, proporcionando dicho complejo de unión multivalente elevada avidez, con respecto a dicho reactivo de unión a receptor; y

(iii) dicha marca detectable unida o capaz de unirse a dicho complejo de unión multivalente, en el que dicha célula diana se tiñe uniendo dicho complejo de unión multivalente a dicha célula diana, y en el que la tinción de dicha célula diana es reversible tras la rotura de la unión entre dicho componente de unión C de dicho reactivo de unión a receptor y dichos sitios de unión Z de dicho reactivo de multimerización,

en el que dicho reactivo de unión a receptor que se une específicamente a dicha molécula de receptor se selecciona del grupo que consiste en un anticuerpo, un fragmento de anticuerpo divalente, un fragmento de anticuerpo monovalente, una molécula de unión proteinácea con propiedades de unión de tipo anticuerpo y una molécula de MHC,

en el que dicha célula diana es una célula de mamífero.

Tipo: Patente Internacional (Tratado de Cooperación de Patentes). Resumen de patente/invención. Número de Solicitud: PCT/EP2012/063969.

Solicitante: IBA GmbH.

Nacionalidad solicitante: Alemania.

Dirección: Rudolf-Wissell-Strasse 28 37079 Göttingen ALEMANIA.

Inventor/es: SCHMIDT, THOMAS, GERMEROTH,LOTHAR, STEMBERGER,CHRISTIAN, BUSCH,DIRK H.

Fecha de Publicación: .

Clasificación Internacional de Patentes:

  • C07K14/36 SECCION C — QUIMICA; METALURGIA.C07 QUIMICA ORGANICA.C07K PEPTIDOS (péptidos que contienen β -anillos lactamas C07D; ipéptidos cíclicos que no tienen en su molécula ningún otro enlace peptídico más que los que forman su ciclo, p. ej. piperazina diones-2,5, C07D; alcaloides del cornezuelo del centeno de tipo péptido cíclico C07D 519/02;   proteínas monocelulares, enzimas C12N; procedimientos de obtención de péptidos por ingeniería genética C12N 15/00). › C07K 14/00 Péptidos con más de 20 aminoácidos; Gastrinas; Somatostatinas; Melanotropinas; Sus derivados. › de Actinomyces; de Streptomyces (G).
  • G01N33/50 SECCION G — FISICA.G01 METROLOGIA; ENSAYOS.G01N INVESTIGACION O ANALISIS DE MATERIALES POR DETERMINACION DE SUS PROPIEDADES QUIMICAS O FISICAS (procedimientos de medida, de investigación o de análisis diferentes de los ensayos inmunológicos, en los que intervienen enzimas o microorganismos C12M, C12Q). › G01N 33/00 Investigación o análisis de materiales por métodos específicos no cubiertos por los grupos G01N 1/00 - G01N 31/00. › Análisis químico de material biológico, p. ej. de sangre, de orina; Investigación o análisis por métodos en los que interviene la formación de uniones bioespecíficas con grupos coordinadores; Investigación o análisis inmunológico (procedimientos de medida, de investigación o análisis diferentes de los procedimientos inmunológicos en los que intervienen enzimas o microorganismos, composiciones o papeles reactivos a este efecto; procedimientos para preparar estas composiciones, procedimientos de control sensibles a las condiciones del medio en los procedimientos microbiológicos o enzimáticos C12Q).

PDF original: ES-2682750_T3.pdf

 

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