Análisis automatizado de células tumorales circulantes.

Un procedimiento de análisis de una muestra que contiene células tumorales circulantes (CTC) usando un instrumento automatizado,

que comprende:

depositar una muestra de un sujeto con cáncer de próstata sobre un sustrato configurado para su uso con el instrumento automatizado,

fijar la muestra con formol al 0,4 % durante 1 a 5 minutos seguido de formol tamponado neutro (FTN) al 10 % durante 5 a 15 minutos y metanol durante 1 a 5 minutos,

permeabilizar la muestra con Tween 20 al 0,2 % en solución salina tamponada con fosfato (PBS), retener al menos un 90 % de las CTC en la muestra sobre el sustrato tras la fijación y permeabilización,

disponer el sustrato en el instrumento automatizado,

recuperar las dianas de moléculas de proteína y ácido nucleico en la muestra, en el que la recuperación se hace mediante el instrumento automatizado, en el que la recuperación comprende:

(i) poner en contacto la muestra con reactivos de identificación de CTC, en el que el contacto de la muestra con reactivos de identificación de CTC se hace mediante el instrumento automatizado,

(ii) poner en contacto la muestra con sondas de ácido nucleico dirigidas al gen relacionado con ETS (ERG), homólogo de fosfatasa y tensina (PTEN) y centrómero 10 (CEN-10), en el que el contacto de la muestra con las sondas de ácido nucleico se hace mediante el instrumento automatizado,

obtener imágenes de la muestra,

(iii) localizar las CTC en la muestra sobre el sustrato localizando los reactivos de identificación de CTC, en el que los reactivos de identificación de CTC son reactivos inmunohistoquímicos dirigidos a una proteína CD45, una proteína citoqueratina (CQ), una proteína ERG, un receptor androgénico (RA), una proteína PSMA, o combinaciones de los mismos, en el que la localización de los reactivos inmunohistoquímicos se hace mediante el instrumento automatizado, y

(iv) obtener imágenes espectrales de las CTC por localización para detectar las sondas de ácido nucleico, en el que la obtención de imágenes espectrales de las CTC se hace mediante el instrumento automatizado, y analizar la muestra analizando las imágenes espectrales y los reactivos de caracterización de CTC detectados.

Tipo: Patente Internacional (Tratado de Cooperación de Patentes). Resumen de patente/invención. Número de Solicitud: PCT/US2012/071924.

Solicitante: VENTANA MEDICAL SYSTEMS, INC..

Nacionalidad solicitante: Estados Unidos de América.

Dirección: 1910 E. INNOVATION PARK DRIVE TUCSON, ARIZONA 85755 ESTADOS UNIDOS DE AMERICA.

Inventor/es: PESTANO,GARY, GARSHA,KARL, OTTER,MICHAEL, YUN,CHOL S, NAGY,ALEXANDRA DEA, DITTAMORE,RYAN.

Fecha de Publicación: .

Clasificación Internacional de Patentes:

  • C12Q1/68 SECCION C — QUIMICA; METALURGIA.C12 BIOQUIMICA; CERVEZA; BEBIDAS ALCOHOLICAS; VINO; VINAGRE; MICROBIOLOGIA; ENZIMOLOGIA; TECNICAS DE MUTACION O DE GENETICA.C12Q PROCESOS DE MEDIDA, INVESTIGACION O ANALISIS EN LOS QUE INTERVIENEN ENZIMAS O MICROORGANISMOS (ensayos inmunológicos G01N 33/53 ); COMPOSICIONES O PAPELES REACTIVOS PARA ESTE FIN; PROCESOS PARA PREPARAR ESTAS COMPOSICIONES; PROCESOS DE CONTROL SENSIBLES A LAS CONDICIONES DEL MEDIO EN LOS PROCESOS MICROBIOLOGICOS O ENZIMOLOGICOS. › C12Q 1/00 Procesos de medida, investigación o análisis en los que intervienen enzimas o microorganismos (aparatos de medida, investigación o análisis con medios de medida o detección de las condiciones del medio, p. ej. contadores de colonias, C12M 1/34 ); Composiciones para este fin; Procesos para preparar estas composiciones. › en los que intervienen ácidos nucleicos.
  • G01N33/574 SECCION G — FISICA.G01 METROLOGIA; ENSAYOS.G01N INVESTIGACION O ANALISIS DE MATERIALES POR DETERMINACION DE SUS PROPIEDADES QUIMICAS O FISICAS (procedimientos de medida, de investigación o de análisis diferentes de los ensayos inmunológicos, en los que intervienen enzimas o microorganismos C12M, C12Q). › G01N 33/00 Investigación o análisis de materiales por métodos específicos no cubiertos por los grupos G01N 1/00 - G01N 31/00. › para el cáncer.

PDF original: ES-2695101_T3.pdf

 

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