Proceso y sistema para obtener neurotoxina botulínica.

Un proceso para producir un complejo de neurotoxina botulínica tipo A biológicamente activo que comprende las etapas secuenciales de:



(a) cultivar la bacteria Clostridium botulinum en un medio de cultivo que está completamente libre de productos derivados de animales o contiene productos derivados de animales en una cantidad inferior al 1% (p/v);

(b) fermentar bacterias de Clostridium botulinum a partir del medio de cultivo en 1,8 a 82,5 L de un medio de fermentación que está completamente libre de productos derivados de animales o contiene productos derivados de animales en una cantidad inferior al 1% (p/v);

(c) recolectar el medio de fermentación eliminando los restos celulares;

(d) concentrar el medio de fermentación recogido por filtración;

(e) diluir el medio de fermentación concentrado añadiéndole un tampón;

(f) realizar una primera etapa de contacto en la que el medio de fermentación recogido diluido se pone en contacto con un medio de cromatografía de intercambio aniónico de manera que la neurotoxina botulínica biológicamente activa en el medio se captura por el medio de intercambio aniónico;

(g) eluir la neurotoxina botulínica capturada del medio de intercambio aniónico para obtener un primer eluato;

(h) realizar una segunda etapa de contacto en la que el primer eluato se pone en contacto con un medio de cromatografía de intercambio catiónico para eliminar las impurezas del primer eluato, obteniendo de este modo un segundo eluato;

(i) realizar una tercera etapa de contacto en la que el segundo eluato se pone en contacto con un medio de cromatografía de interacción hidrofóbica y se eluye para obtener un tercer eluato;

(j) procesar el tercer eluato por diafiltración; y

(k) filtrar el tercer eluato procesado para obtener un producto que contiene complejo de neurotoxina botulínica de tipo A biológicamente activo que tiene una potencia de 1,8 x 107 a 6,6 × 107 unidades/mg;

en el que al menos uno del medio de cultivo y el medio de fermentación incluye una proteína vegetal y no se usa ninguna enzima derivada de un animal para purificar la neurotoxina botulínica; y

en el que el proceso se lleva a cabo en una semana o menos.

Tipo: Patente Internacional (Tratado de Cooperación de Patentes). Resumen de patente/invención. Número de Solicitud: PCT/US2010/041745.

Solicitante: ALLERGAN, INC..

Nacionalidad solicitante: Estados Unidos de América.

Dirección: 2525 DUPONT DRIVE IRVINE, CA 92612 ESTADOS UNIDOS DE AMERICA.

Inventor/es: TON,JENNIFER L, PATEL,HEMANT A, BATES,RONALD C, AHMAD,WAJDIE M.

Fecha de Publicación: .

Clasificación Internacional de Patentes:

  • A61K38/16 SECCION A — NECESIDADES CORRIENTES DE LA VIDA.A61 CIENCIAS MEDICAS O VETERINARIAS; HIGIENE.A61K PREPARACIONES DE USO MEDICO, DENTAL O PARA EL ASEO (dispositivos o métodos especialmente concebidos para conferir a los productos farmacéuticos una forma física o de administración particular A61J 3/00; aspectos químicos o utilización de substancias químicas para, la desodorización del aire, la desinfección o la esterilización, vendas, apósitos, almohadillas absorbentes o de los artículos para su realización A61L;   composiciones a base de jabón C11D). › A61K 38/00 Preparaciones medicinales que contienen péptidos (péptidos que contienen ciclos beta-lactama A61K 31/00; dipéptidos cíclicos que no tienen en su molécula ningún otro enlace peptídico más que los que forman su ciclo, p. ej. piperazina 2,5-dionas, A61K 31/00; péptidos basados en la ergolina A61K 31/48; que contienen compuestos macromoleculares que tienen unidades aminoácido repartidas estadísticamente A61K 31/74; preparaciones medicinales que contienen antígenos o anticuerpos A61K 39/00; preparaciones medicinales caracterizadas por los ingredientes no activos, p. ej. péptidos como soportes de fármacos, A61K 47/00). › Péptidos que tienen más de 20 aminoácidos; Gastrinas; Somatostatinas; Melanotropinas; Sus derivados.
  • C07K14/33 SECCION C — QUIMICA; METALURGIA.C07 QUIMICA ORGANICA.C07K PEPTIDOS (péptidos que contienen β -anillos lactamas C07D; ipéptidos cíclicos que no tienen en su molécula ningún otro enlace peptídico más que los que forman su ciclo, p. ej. piperazina diones-2,5, C07D; alcaloides del cornezuelo del centeno de tipo péptido cíclico C07D 519/02;   proteínas monocelulares, enzimas C12N; procedimientos de obtención de péptidos por ingeniería genética C12N 15/00). › C07K 14/00 Péptidos con más de 20 aminoácidos; Gastrinas; Somatostatinas; Melanotropinas; Sus derivados. › de Clostridium (G).
  • C12N1/20 C […] › C12 BIOQUIMICA; CERVEZA; BEBIDAS ALCOHOLICAS; VINO; VINAGRE; MICROBIOLOGIA; ENZIMOLOGIA; TECNICAS DE MUTACION O DE GENETICA.C12N MICROORGANISMOS O ENZIMAS; COMPOSICIONES QUE LOS CONTIENEN (biocidas, productos que repelen o atraen a los animales nocivos, o reguladores del crecimiento de los vegetales, que contienen microorganismos virus, hongos microscópicos, enzimas, productos de fermentación o sustancias obtenidas por o extraídas de microorganismos o sustancias animales A01N 63/00; preparaciones de uso médico A61K; fertilizantes C05F ); PROPAGACION,CULTIVO O CONSERVACION DE MICROORGANISMOS; TECNICAS DE MUTACION O DE INGENIERIA GENETICA; MEDIOS DE CULTIVO (medios para ensayos microbiológicos C12Q 1/00). › C12N 1/00 Microorganismos, p.ej. protozoos; Composiciones que los contienen (preparaciones de uso médico que contienen material de protozoos, bacterias o virus A61K 35/66, de algas A61K 36/02, de hongos A61K 36/06; preparación de composiciones de uso médico que contienen antígenos o anticuerpos bacterianos, p. ej. vacunas bacterianas, A61K 39/00 ); Procesos de cultivo o conservación de microorganismos, o de composiciones que los contienen; Procesos de preparación o aislamiento de una composición que contiene un microorganismo; Sus medios de cultivo. › Bacterias; Sus medios de cultivo.
  • C12P21/02 C12 […] › C12P PROCESOS DE FERMENTACION O PROCESOS QUE UTILIZAN ENZIMAS PARA LA SINTESIS DE UN COMPUESTO QUIMICO DADO O DE UNA COMPOSICION DADA, O PARA LA SEPARACION DE ISOMEROS OPTICOS A PARTIR DE UNA MEZCLA RACEMICA.C12P 21/00 Preparación de péptidos o de proteínas (proteína monocelular C12N 1/00). › que tienen una secuencia conocida de varios aminoácidos, p. ej. glutation.

PDF original: ES-2643554_T3.pdf

 

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