Integración dirigida en la localización Zp15.
Un método para integrar una o más secuencias de ácido nucleico exógenas en el genoma de una célula vegetal,
método que comprende:
introducir la una o más secuencias de ácido nucleico exógenas en la célula vegetal, en donde las secuencias de ácido nucleico exógenas incluyen una o más regiones de homología con un gen Zp15;
y
romper una secuencia de cadena doble en un gen endógeno Zp15 en el genoma de la célula vegetal usando al menos una proteína de fusión que comprende un dominio de ruptura y una proteína de dedos de zinc que comprende las regiones de hélice de reconocimiento mostradas en una única fila en la Tabla 1, dando como resultado de este modo la integración de un polinucleótido que comprende la una o más secuencias exógenas en el genoma de la célula,
en donde la ruptura de cadena doble se realiza
(a) expresando una primera proteína de fusión en la célula, comprendiendo dicha primera proteína de fusión un primer dominio de unión de dedos de zinc y un primer semi-dominio de ruptura, en donde el primer dominio de unión de dedos de zinc ha sido diseñado para unirse a un primer sitio diana en la localización de Zp15, o en sus proximidades, del genoma de la célula vegetal; y
(b) expresar una segunda proteína de fusión en la célula, comprendiendo dicha segunda proteína de fusión un segundo dominio de unión de dedos de zinc y un segundo semi dominio de ruptura, en donde el segundo dominio de unión de dedos de zinc se une a un segundo sitio diana en la localización Zp15, o en sus proximidades, del genoma de la célula vegetal, en donde el segundo sitio diana es diferente del primer sitio diana; y en donde la unión de la primera proteína de fusión al primer sitio diana, y la unión de la segunda proteína de fusión al segundo sitio diana, posicionan los semi dominios de ruptura de tal modo que se rompe el genoma de la célula vegetal en la localización Zp15, o en sus proximidades.
Tipo: Patente Internacional (Tratado de Cooperación de Patentes). Resumen de patente/invención. Número de Solicitud: PCT/US2009/006606.
Solicitante: DOW AGROSCIENCES LLC.
Nacionalidad solicitante: Estados Unidos de América.
Dirección: 9330 ZIONSVILLE ROAD INDIANAPOLIS, IN 46268-1054 ESTADOS UNIDOS DE AMERICA.
Inventor/es: CORBIN,DAVID R, URNOV,FYODOR, SHUKLA,VIPULA K, WORDEN,SARAH E, BUTLER,HOLLY J, DOYON,YANNICK, GAO,ZHIFANG.
Fecha de Publicación: .
Clasificación Internacional de Patentes:
- C12N15/05 QUIMICA; METALURGIA. › C12 BIOQUIMICA; CERVEZA; BEBIDAS ALCOHOLICAS; VINO; VINAGRE; MICROBIOLOGIA; ENZIMOLOGIA; TECNICAS DE MUTACION O DE GENETICA. › C12N MICROORGANISMOS O ENZIMAS; COMPOSICIONES QUE LOS CONTIENEN; PROPAGACION, CULTIVO O CONSERVACION DE MICROORGANISMOS; TECNICAS DE MUTACION O DE INGENIERIA GENETICA; MEDIOS DE CULTIVO (medios para ensayos microbiológicos C12Q 1/00). › C12N 15/00 Técnicas de mutación o de ingeniería genética; ADN o ARN relacionado con la ingeniería genética, vectores, p. ej. plásmidos, o su aislamiento, su preparación o su purificación; Utilización de huéspedes para ello (mutantes o microorganismos modificados por ingeniería genética C12N 1/00, C12N 5/00, C12N 7/00; nuevas plantas en sí A01H; reproducción de plantas por técnicas de cultivo de tejidos A01H 4/00; nuevas razas animales en sí A01K 67/00; utilización de preparaciones medicinales que contienen material genético que es introducido en células del cuerpo humano para tratar enfermedades genéticas, terapia génica A61K 48/00; péptidos en general C07K). › Células vegetales.
- C12Q1/68 C12 […] › C12Q PROCESOS DE MEDIDA, INVESTIGACION O ANALISIS EN LOS QUE INTERVIENEN ENZIMAS, ÁCIDOS NUCLEICOS O MICROORGANISMOS (ensayos inmunológicos G01N 33/53 ); COMPOSICIONES O PAPELES REACTIVOS PARA ESTE FIN; PROCESOS PARA PREPARAR ESTAS COMPOSICIONES; PROCESOS DE CONTROL SENSIBLES A LAS CONDICIONES DEL MEDIO EN LOS PROCESOS MICROBIOLOGICOS O ENZIMOLOGICOS. › C12Q 1/00 Procesos de medida, investigación o análisis en los que intervienen enzimas, ácidos nucleicos o microorganismos (aparatos de medida, investigación o análisis con medios de medida o detección de las condiciones del medio, p. ej. contadores de colonias, C12M 1/34 ); Composiciones para este fin; Procesos para preparar estas composiciones. › en los que intervienen ácidos nucleicos.
PDF original: ES-2654923_T3.pdf
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