Ensayos mejorados de la actividad de ADN polimerasa y métodos que facilitan la detección de microbios viables.
Un método in vitro para llevar a cabo un ensayo diagnóstico para la detección de la presencia o cantidad de un microorganismo en una muestra que contiene ADN polimerasa activa mediante la medición de la actividad de extensión de la ADN polimerasa,
cuyo ensayo comprende las etapas de incubar la ADN polimerasa de la muestra con un sustrato seleccionado adecuado, y llevar a cabo el ciclado y la detección por PCR mediante el uso de una sonda de ácido nucleico seleccionada adecuada, para detectar de esta manera la actividad de extensión de la ADN polimerasa endógena de la muestra como una indicación de la presencia o cantidad de dicho microorganismo, donde dicho sustrato con el que dicha ADN polimerasa se incuba consiste en dos oligonucleótidos pre-hibridados donde uno de dichos nucleótidos contiene nucleósidos de desoxiuridina, y antes de dicho ciclado de PCR dicha ADN polimerasa extiende solo el extremo 3' del oligonucleótido que no contiene nucleósidos de desoxiuridina y posteriormente se añade uracil ADN glucosilasa para degradar el oligonucleótido que contiene nucleósidos de desoxiuridina de manera que solamente el producto de cadena sencilla derivado de la extensión mediada por polimerasa pasa al ciclado de PCR.
Tipo: Patente Internacional (Tratado de Cooperación de Patentes). Resumen de patente/invención. Número de Solicitud: PCT/US2013/020180.
Solicitante: Zeus Scientific, Inc.
Nacionalidad solicitante: Estados Unidos de América.
Dirección: P.O. Box 38 Raritan, NJ 08869 ESTADOS UNIDOS DE AMERICA.
Inventor/es: O'HARA,SHAWN MARK, ZWEITZIG,DANIEL R.
Fecha de Publicación: .
Clasificación Internacional de Patentes:
- C12Q1/68 QUIMICA; METALURGIA. › C12 BIOQUIMICA; CERVEZA; BEBIDAS ALCOHOLICAS; VINO; VINAGRE; MICROBIOLOGIA; ENZIMOLOGIA; TECNICAS DE MUTACION O DE GENETICA. › C12Q PROCESOS DE MEDIDA, INVESTIGACION O ANALISIS EN LOS QUE INTERVIENEN ENZIMAS, ÁCIDOS NUCLEICOS O MICROORGANISMOS (ensayos inmunológicos G01N 33/53 ); COMPOSICIONES O PAPELES REACTIVOS PARA ESTE FIN; PROCESOS PARA PREPARAR ESTAS COMPOSICIONES; PROCESOS DE CONTROL SENSIBLES A LAS CONDICIONES DEL MEDIO EN LOS PROCESOS MICROBIOLOGICOS O ENZIMOLOGICOS. › C12Q 1/00 Procesos de medida, investigación o análisis en los que intervienen enzimas, ácidos nucleicos o microorganismos (aparatos de medida, investigación o análisis con medios de medida o detección de las condiciones del medio, p. ej. contadores de colonias, C12M 1/34 ); Composiciones para este fin; Procesos para preparar estas composiciones. › en los que intervienen ácidos nucleicos.
- C12Q1/70 C12Q 1/00 […] › en los que intervienen virus o bacteriófagos.
- G01N33/50 FISICA. › G01 METROLOGIA; ENSAYOS. › G01N INVESTIGACION O ANALISIS DE MATERIALES POR DETERMINACION DE SUS PROPIEDADES QUIMICAS O FISICAS (procedimientos de medida, de investigación o de análisis diferentes de los ensayos inmunológicos, en los que intervienen enzimas o microorganismos C12M, C12Q). › G01N 33/00 Investigación o análisis de materiales por métodos específicos no cubiertos por los grupos G01N 1/00 - G01N 31/00. › Análisis químico de material biológico, p. ej. de sangre o de orina; Ensayos mediante métodos en los que interviene la formación de uniones bioespecíficas con grupos coordinadores; Ensayos inmunológicos (procedimientos de medida o ensayos diferentes de los procedimientos inmunológicos en los que intervienen enzimas o microorganismos, composiciones o papeles reactivos a este efecto, procedimientos para preparar estas composiciones, procedimientos de control sensibles a las condiciones del medio en los procedimientos microbiológicos o enzimáticos C12Q).
- G01N33/53 G01N 33/00 […] › Ensayos inmunológicos; Ensayos en los que interviene la formación de uniones bioespecíficas; Materiales a este efecto.
PDF original: ES-2624871_T3.pdf
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