Composiciones de hemoglobina.

Una composición que comprende un conjugado covalente entre una molécula de hemoglobina nativa funcional y al menos una molécula de poli(etilenglicol),

comprendiendo dicha composición:

a. una fracción de hemoglobina soluble en agua que comprende un grupo de moléculas de hemoglobina en la que cada miembro de dicho grupo de moléculas de hemoglobina;

i. se conjuga covalentemente con al menos una molécula de dicho poli(etilenglicol) a través de una unidad estructural amina de un residuo de aminoácido (por ejemplo, una unidad estructural ε-amina de un residuo de lisina);

ii. está libre de agentes químicos de reticulación; y

iii. tiene una P50 de 9 mm Hg a 14 mm Hg; y

b. una fracción estabilizadora soluble en agua que hace que dicho grupo de moléculas de hemoglobina sea resistente a la oxidación, comprendiendo dicha fracción, un agente estabilizante que comprende un elemento estructural más reactivo con el oxígeno que dicho grupo de moléculas de hemoglobina; y

c. una fracción diluyente que comprende un diluyente farmacéuticamente aceptable en la que dicha fracción de hemoglobina es soluble,

estando dicha composición libre de actividad viral, y comprendiendo de manera estable menos del 5% de metahemoglobina;

dicha composición preparada por un método que comprende:

i. someter una solución de hemoglobina desoxigenada y un agente estabilizante a un procedimiento térmico de inactivación viral que comprende: exponer dicha solución a una temperatura elevada suficientemente para inactivar toda la actividad viral en dicha solución (por ejemplo, 60ºC), siendo dicha exposición durante un tiempo suficiente para lograr dicha inactivación de toda la actividad viral en dicha solución (por ejemplo, 10 horas),

comprendiendo dicho agente estabilizante un elemento estructural más reactivo con el oxígeno que dicha hemoglobina desoxigenada en dicha solución, minimizando así la unión del oxígeno por dicha hemoglobina desoxigenada, comprendiendo dicha solución una cantidad de dicho agente estabilizante suficiente para prevenir la formación de más de 5% de metahemoglobina en dicho en dicho procedimiento térmico de desactivación viral; y después oxigenar otra vez dicha hemoglobina desoxigenada para formar una solución de hemoglobina inactivada viralmente reoxigenada; y

ii. poner en contacto dicha solución de hemoglobina inactivada viralmente reoxigenada de la etapa (i) con una molécula activada de poli(etilenglicol) de reactividad complementaria a un residuo de aminoácido de dicha hemoglobina, formando así un conjugado covalente entre moléculas de poli(etilenglicol) y hemoglobina en dicha solución.