Procedimientos de conversión intracelular de proteínas de cadena sencilla a su forma bicatenaria.

Un procedimiento intracelular para convertir una proteína de cadena sencilla en su forma bicatenaria,

comprendiendo el procedimiento las etapas de:

a) hacer crecer una célula que comprende una construcción de expresión dual a una primera temperatura durante un cierto período de tiempo para alcanzar una densidad celular máxima, comprendiendo la construcción de expresión dual;

i) un marco de lectura abierto que codifica una proteína de cadena sencilla que comprende una región de bucle bicatenario que comprende un sitio de escisión de la proteasa TEV exógeno; y

ii) un marco de lectura abierto que codifica una proteasa TEV; en el que la proteasa puede escindir el sitio de escisión de proteasa exógeno situado en la región de bucle bicatenario.

b) hacer crecer la célula a una segunda temperatura durante un cierto periodo de tiempo para alcanzar la inducción máxima de la expresión proteica del marco de lectura abierto que codifica la proteína de cadena sencilla, en el que el crecimiento en la etapa (b) induce la expresión de la proteína de cadena sencilla y la proteasa a partir de la construcción de expresión dual; y

en el que la proteasa producida escinde la proteína de cadena sencilla en el sitio de escisión de proteasa exógeno situado en la región de bucle bicatenario, convirtiendo así la proteína de cadena sencilla en su forma bicatenaria.

Tipo: Patente Europea. Resumen de patente/invención. Número de Solicitud: E13188050.

Solicitante: ALLERGAN, INC..

Nacionalidad solicitante: Estados Unidos de América.

Dirección: 2525 DUPONT DRIVE IRVINE, CALIFORNIA 92612 ESTADOS UNIDOS DE AMERICA.

Inventor/es: STEWARD,LANCE,E, LIU,YI, GHANSHANI,SANJIV, LE,LINH Q.

Fecha de Publicación: 20 de Abril de 2016.

Clasificación Internacional de Patentes:

C07K14/33 QUIMICA; METALURGIA. › C07 QUIMICA ORGANICA. › C07K PEPTIDOS (péptidos que contienen β -anillos lactamas C07D; ipéptidos cíclicos que no tienen en su molécula ningún otro enlace peptídico más que los que forman su ciclo, p. ej. piperazina diones-2,5, C07D; alcaloides del cornezuelo del centeno de tipo péptido cíclico C07D 519/02; proteínas monocelulares, enzimas C12N; procedimientos de obtención de péptidos por ingeniería genética C12N 15/00). › C07K 14/00 Péptidos con más de 20 aminoácidos; Gastrinas; Somatostatinas; Melanotropinas; Sus derivados. › de Clostridium (G).
C12N15/62 C […] › C12 BIOQUIMICA; CERVEZA; BEBIDAS ALCOHOLICAS; VINO; VINAGRE; MICROBIOLOGIA; ENZIMOLOGIA; TECNICAS DE MUTACION O DE GENETICA. › C12N MICROORGANISMOS O ENZIMAS; COMPOSICIONES QUE LOS CONTIENEN; PROPAGACION, CULTIVO O CONSERVACION DE MICROORGANISMOS; TECNICAS DE MUTACION O DE INGENIERIA GENETICA; MEDIOS DE CULTIVO (medios para ensayos microbiológicos C12Q 1/00). › C12N 15/00 Técnicas de mutación o de ingeniería genética; ADN o ARN relacionado con la ingeniería genética, vectores, p. ej. plásmidos, o su aislamiento, su preparación o su purificación; Utilización de huéspedes para ello (mutantes o microorganismos modificados por ingeniería genética C12N 1/00, C12N 5/00, C12N 7/00; nuevas plantas en sí A01H; reproducción de plantas por técnicas de cultivo de tejidos A01H 4/00; nuevas razas animales en sí A01K 67/00; utilización de preparaciones medicinales que contienen material genético que es introducido en células del cuerpo humano para tratar enfermedades genéticas, terapia génica A61K 48/00; péptidos en general C07K). › Secuencias de ADN que codifican proteínas de fusión.
C12N15/70 C12N 15/00 […] › Vectores o sistemas de expresión especialmente adaptados a E. coli.
C12N15/866 C12N 15/00 […] › Vectores báculovirales.
C12N9/50 C12N […] › C12N 9/00 Enzimas, p. ej. ligasas (6.); Proenzimas; Composiciones que las contienen (preparaciones para la limpieza de los dientes que contienen enzimas A61K 8/66, A61Q 11/00; preparaciones de uso médico que contienen enzimas A61K 38/43; composiciones detergentes que contienen enzimas C11D ); Procesos para preparar, activar, inhibir, separar o purificar enzimas. › Proteinasas.
C12P21/02 C12 […] › C12P PROCESOS DE FERMENTACION O PROCESOS QUE UTILIZAN ENZIMAS PARA LA SINTESIS DE UN COMPUESTO QUIMICO DADO O DE UNA COMPOSICION DADA, O PARA LA SEPARACION DE ISOMEROS OPTICOS A PARTIR DE UNA MEZCLA RACEMICA. › C12P 21/00 Preparación de péptidos o de proteínas (proteína monocelular C12N 1/00). › que tienen una secuencia conocida de varios aminoácidos, p. ej. glutation.
C12P21/06 C12P 21/00 […] › preparados por hidrólisis de un enlace peptídico, p. ej. hidrolizados.

PDF original: ES-2592856_T3.pdf

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