Procedimiento de fabricación de vacunas virales en líneas de células madre derivadas de embriones aviares en suspensión.

Un procedimiento de alimentación discontinua de producción de virus de la gripe que comprende replicar un virus de la gripe,

en células de una línea celular aviar en el que dicha línea celular se ha obtenido por un método que comprende las etapas siguientes:

A) cultivo de células madre embrionarias aviares en un medio de cultivo que contiene los factores que permiten su crecimiento, en el que dichos factores comprenden

a. un factor trófico seleccionado del grupo que consiste en factor de células madre (SCF), Factor de Crecimiento de Insulina 1 (IGF-1), y Factor de Crecimiento de Fibroblastos básico (bFGF), y

b. una citoquina cuya acción es a través de un receptor que está asociado con la proteína gp, seleccionada del grupo que consiste en factor inhibidor de leucemia (LIF), interleuquina 11 (IL-11), interleuquina 6 (IL-6), receptor de interleuquina 6 (IL-6R), factor neurotrófico ciliar (CNTF), oncostatina y cardiotrofina

y complementado con suero animal en presencia de una capa alimentadora;

B) subcultivo mediante modificación del medio de cultivo para obtener una retirada de dichos factores de crecimiento y citoquinas exógenas, del suero y de la capa alimentadora;

C) establecimiento de líneas de células adherentes o no adherentes capaces de proliferar en ausencia de dichos factores de crecimiento exógenos, suero y capa alimentadora inactivada de dicho medio de cultivo celular;

comprendiendo dicho procedimiento de producción de virus de la gripe las etapas de:

a) proliferación de dichas células en un recipiente de cultivo, en suspensión, en un medio sin suero N°1;

b) infección de las células con dicho virus de la gripe cuando la densidad celular es de al menos 1,5 millones de células/ml, preferiblemente de al menos 4 millones de células/ml;

c) poco antes de la infección, simultáneamente a la infección, o poco después de la infección, adición al cultivo celular de medio sin suero N°2; y

d) cultivo adicional de dichas células infectadas con el fin de permitir la replicación del virus; y

e) opcionalmente, recogida de dicho virus,

en el que dicho procedimiento comprende la etapa adicional de alimentar las células en el que dicha etapa de alimentación comprende la adición discontinua de glutamina y/o D-glucosa durante las etapas a) a d); y

en el que la concentración de glutamina en el medio se cultivo se mantiene entre alrededor 1mM a alrededor 3mM, y la concentración de D-glucosa en el medio de cultivo se mantiene entre alrededor 1 g/l a 10 g/l.

Tipo: Patente Europea. Resumen de patente/invención. Número de Solicitud: E12157981.

Solicitante: Valneva.

Nacionalidad solicitante: Francia.

Dirección: 70, rue Saint-Jean de Dieu 69007 Lyon FRANCIA.

Inventor/es: MEHTALI, MAJID, CHAMPION-ARNAUD,PATRICK, LEON,ARNAUD.

Fecha de Publicación: .

Clasificación Internacional de Patentes:

  • C12N5/0735 QUIMICA; METALURGIA.C12 BIOQUIMICA; CERVEZA; BEBIDAS ALCOHOLICAS; VINO; VINAGRE; MICROBIOLOGIA; ENZIMOLOGIA; TECNICAS DE MUTACION O DE GENETICA.C12N MICROORGANISMOS O ENZIMAS; COMPOSICIONES QUE LOS CONTIENEN; PROPAGACION, CULTIVO O CONSERVACION DE MICROORGANISMOS; TECNICAS DE MUTACION O DE INGENIERIA GENETICA; MEDIOS DE CULTIVO (medios para ensayos microbiológicos C12Q 1/00). › C12N 5/00 Células no diferenciadas humanas, animales o vegetales, p. ej. líneas celulares; Tejidos; Su cultivo o conservación; Medios de cultivo para este fin (reproducción de plantas por técnicas de cultivo de tejidos A01H 4/00). › Células madre embrionarias; Células germinales embrionarias.

PDF original: ES-2555995_T3.pdf

 

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