Procedimiento para el enriquecimiento de ácidos nucleicos de cadena corta.
Un procedimiento para enriquecer acidos nucleicos con una longitud de menos de 300 nucleotidos de una muestra que se selecciona del grupo constituido por plasma,
suero, un fluido corporal, un frotis y un lisado celular, que comprende las etapas de procedimiento
i) Proporcionar una fase fluida P1, preferiblemente acuosa, que contiene (α1) al menos un acido nucleico con una longitud de menos de 300 nucleotidos, asi como (α2) al menos un componente distinto de este acido nucleico (α1),
ii) poner en contacto la fase P1 con una matriz de intercambio anionico para unir el acido nucleico (α1) a la matriz de intercambio anionico, realizandose la union de los acidos nucleicos a la matriz de intercambio anionico a un valor de pH en un intervalo de 3 a 7, presentando la matriz de intercambio anionico grupos funcionales seleccionados del grupo constituido por grupos amino, grupos hidracina y grupos imina que estan al menos parcialmente presentes en forma cationica en las condiciones bajo las que se pone en contacto la fase acuosa P1 con la matriz de intercambio anionico, y estando la matriz de intercambio anionico presente en forma de un recubrimiento sobre particulas magneticas y para la union de los acidos nucleicos la fase acuosa P1 puesta en contacto con las particulas se mueve continuamente, y separandose las particulas magneticas de la fase acuosa P1 como agregados magneticos,
iii) dado el caso lavar la matriz de intercambio anionico con un tampon de lavado, permaneciendo el acido nucleico (α1) unido a la matriz de intercambio anionico, asi como
iv) eluir el acido nucleico (α1) unido a la matriz de intercambio anionico de la matriz de intercambio anionico mediante la sustitucion de la fase acuosa P1 o del tampon de lavado con un tampon de elucion manteniendo una fase acuosa P2 que contiene el acido nucleico (α1).
Tipo: Patente Internacional (Tratado de Cooperación de Patentes). Resumen de patente/invención. Número de Solicitud: PCT/EP2006/069484.
Solicitante: QIAGEN GMBH.
Nacionalidad solicitante: Alemania.
Dirección: QIAGEN STRASSE 1 40724 HILDEN ALEMANIA.
Inventor/es: WEBER, MARTIN, RITT,CHRISTOPH, HIMMELREICH,RALF.
Fecha de Publicación: .
Clasificación Internacional de Patentes:
- A61K31/7088 NECESIDADES CORRIENTES DE LA VIDA. › A61 CIENCIAS MEDICAS O VETERINARIAS; HIGIENE. › A61K PREPARACIONES DE USO MEDICO, DENTAL O PARA EL ASEO (dispositivos o métodos especialmente concebidos para conferir a los productos farmacéuticos una forma física o de administración particular A61J 3/00; aspectos químicos o utilización de substancias químicas para, la desodorización del aire, la desinfección o la esterilización, vendas, apósitos, almohadillas absorbentes o de los artículos para su realización A61L; composiciones a base de jabón C11D). › A61K 31/00 Preparaciones medicinales que contienen ingredientes orgánicos activos. › Compuestos que tienen al menos tres nucleósidos o nucleótidos.
- C12N15/10 QUIMICA; METALURGIA. › C12 BIOQUIMICA; CERVEZA; BEBIDAS ALCOHOLICAS; VINO; VINAGRE; MICROBIOLOGIA; ENZIMOLOGIA; TECNICAS DE MUTACION O DE GENETICA. › C12N MICROORGANISMOS O ENZIMAS; COMPOSICIONES QUE LOS CONTIENEN; PROPAGACION, CULTIVO O CONSERVACION DE MICROORGANISMOS; TECNICAS DE MUTACION O DE INGENIERIA GENETICA; MEDIOS DE CULTIVO (medios para ensayos microbiológicos C12Q 1/00). › C12N 15/00 Técnicas de mutación o de ingeniería genética; ADN o ARN relacionado con la ingeniería genética, vectores, p. ej. plásmidos, o su aislamiento, su preparación o su purificación; Utilización de huéspedes para ello (mutantes o microorganismos modificados por ingeniería genética C12N 1/00, C12N 5/00, C12N 7/00; nuevas plantas en sí A01H; reproducción de plantas por técnicas de cultivo de tejidos A01H 4/00; nuevas razas animales en sí A01K 67/00; utilización de preparaciones medicinales que contienen material genético que es introducido en células del cuerpo humano para tratar enfermedades genéticas, terapia génica A61K 48/00; péptidos en general C07K). › Procedimientos para el aislamiento, la preparación o la purificación de ADN o ARN (preparación química de ADN o ARN C07H 21/00; preparación de polinucleótidos no estructurales a partir de microorganismos o con la ayuda de enzimas C12P 19/34).
PDF original: ES-2572630_T3.pdf
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