Ensayo para detectar entactógenos.

Compuesto de fórmula:**Fórmula**

en la que:

R1 es H, alquilo inferior que es un radical hidrocarbonado monovalente saturado ramificado o no ramificado que contiene de 1 a 10 átomos de carbono,

un grupo protector, o se toma junto con R2 para formar un anillo,

R2 es H, alquilo inferior que es un radical hidrocarbonado monovalente saturado ramificado o no ramificado que contiene de 1 a 10 átomos de carbono, un grupo protector, -(CH2)nSCH2C(O)R6 o -(CH2)nC(SO2Re)≥CH2, o se toma junto con R1 para formar un anillo,

R3 y R4 son independientemente H o alquilo inferior que es un radical hidrocarbonado monovalente saturado ramificado o no ramificado que contiene de 1 a 10 átomos de carbono o un grupo protector, o, cuando R1 se toma junto con R2 para formar un anillo, al menos uno de R3 o R4 es

-C(O)(CH2)nNHC(O)R5, -C(O)(CH2)nNHC(O)(CH2)nSR5, -(CH2)nSCH2C(O)R5 o -(CH2)nC(SO2R5)≥CH2, o cuando R1 no se toma junto con R2 para formar un anillo, R2 no es H o alquilo inferior que es un radical hidrocarbonado monovalente saturado ramificado o no ramificado que contiene de 1 a 10 átomos de carbono,

R5 es H, -OH, -SH, -O-alquilo inferior que es un radical hidrocarbonado monovalente saturado ramificado o no ramificado que contiene de 1 a 10 átomos de carbono, halógeno, NH2, -succinimidilo, -maleimidilo, portador inmunogénico o marcador,

R6 es H, -OH, -SH, -O-alquilo inferior que es un radical hidrocarbonado monovalente saturado ramificado o no ramificado que contiene de 1 a 10 átomos de carbono, halógeno, NH2, -succinimidilo, -maleimidilo, portador inmunogénico o marcador, y

n es un número entero de desde 1 hasta 5,

e incluyendo sales de ácido del mismo.

Antecedentes de la invención Esta invención se refiere a métodos, composiciones y kits para detectar la presencia y/o cantidades de 3, 4metilendioxianfetamina (MDA) , 3, 4-metilendioxi-metanfetamina (MDMA) , 3, 4-metilendioxi-etilanfetamina (MDEA) y 4hidroxi-3-metoxi-metanfetamina (HMMA) en muestras que se sospecha que contienen las mismas. En particular, la invención se refiere a haptenos, inmunógenos y ensayos para detectar MDA, MDMA, MDEA y HMMA.

El campo del diagnóstico clínico ha presenciado una amplia expansión en los últimos años, tanto en lo que respecta a la variedad de materiales de interés que pueden determinarse de manera precisa y fácil, como en los métodos para la determinación. A lo largo de la última década, las pruebas para detectar drogas se han convertido en algo corriente. Estas pruebas no sólo son para la monitorización de delincuentes criminales y drogadictos, sino que los empresarios también las usan para la selección de trabajadores. En los últimos años, se ha investigado de manera extensa un inmunoensayo basado en la reacción de un anticuerpo con un antígeno para este fin. El inmunoensayo puede clasificarse en líneas generales en radioinmunoensayo, que usa un isótopo radiactivo, inmunoensayo enzimático (EIA) que usa una enzima y ensayos de luminiscencia, que usan marcadores fluorescentes, por ejemplo, polarización de fluorescencia, y marcadores quimioluminiscentes.

La anfetamina y metanfetamina estimulan el sistema nervioso central y se han usado en medicina para tratar hipotensión, narcolepsia y obesidad. Debido a sus efectos estimulantes, se ha abusado de los fármacos y derivados.

Las drogas de diseño, metilendioxianfetamina (MDA) , 1-3’, 4’-metilendioxifenil-2-propanamina, “píldoras del amor”, metilendioxi-metanfetamina (MDMA) , “Adam”, “éxtasis” y metilendioxietilanfetamina (MDEA) , “Eve” son entactógenos, que producen sensación de euforia y amistad. Estas drogas son populares actualmente y se denominan “drogas de fiesta”. Se ha demostrado mediante varios estudios experimentales en ratas y seres humanos que estas drogas son peligrosas para los seres humanos. De hecho, se han notificado toxicidad y muertes asociadas con MDMA. Revisiones recientes también han notificado hepatotoxicidad, neurotoxicidad, psicopatología y abuso potencial de estas drogas. El uso común de estas drogas se ha generalizado en el mundo y aparecen recientemente como las drogas más populares en determinados países.

Aunque hay una necesidad para la detección de MDMA, MDA y sus metabolitos tales como 4-hidroxi-3metoximetanfetamina (HMMA) , etcétera, la bibliografía da a conocer métodos de detección mediante CG-EM, HPLC, que son caros y requieren mucho tiempo. Parece que los investigadores han tratado de usar tecnología de inmunoensayo existente para anfetamina/metanfetamina para la detección de MDMA y MDA debido a su reactividad cruzada. La esperanza era que el anticuerpo que reconoce anfetamina y metanfetamina también sería útil para ensayos para detectar MDMA, MDA o sus metabolitos. Por ejemplo, se han investigado tres ensayos comerciales para detectar anfetamina/metanfetamina, concretamente, EMIT®, FPIA y RIA, para la detección de MDA, MDMA y MDEA. (Ruangyuttikarn, et al., “Comparison of three commercial amphetamine immunoassays for detection of methamphetamine, methylene-dioxyamphetamine, methylenedioxy-methamphetamine and methylenedioxyethylamphetamine” J. Anal. Toxicol. 1988, 12, 229; Kunsman, et al., “Application of the Syva Emit and Abbott TDX amphetamine Immunoassays to the detection of 3, 4-Methylenedioxy-methamphetamine (MDMA) and 3, 4-Methylenedioxyethamphetamine (MDEA) in Urine” J. Anal. Toxicol. 1990, 14, 149; Cody, J. T. “Detection of D, Lamphetamine, D, L-methamphetamine, and illicit amphetamine analogs using diagnostic products corporation’s amphetamine and methamphetamine radioimmunoassay” J. Anal. Toxicol. 1990, 14, 321; Ensslin, et al., “Toxicological detection of the designer drug 3, 4-methylenedioxyethylamphetamine (MDE, “Eve”) and its metabolites in urine by gas chromatography spectrometr y and fluorescence polarization immunoassay” J. Chromatogr. 1996, B683, 189.

Sin embargo, según la bibliografía publicada, los enfoques anteriores han logrado poco éxito, si es que lo hay. Este resultado no es inesperado debido a las estructuras químicas muy diferentes entre análogos de metanfetamina y MDMA. Es decir, MDMA y MDA tienen un anillo de cinco miembros extra (metilendioxi) en comparación con metanfetamina y anfetamina, respectivamente.

K. TAKAGI et al., “Synthesis of n-acyl derivatives of alfa-methyl-3, 4-methylene-dioxyphenethylamine and their analgesic activity”, CHEMICAL AND PHARMA-CEUTICAL BULLETIN, vol. 11, n.º 5, 1963, págs. 654-657, XP008100828, JP PHARMA-CEUTICAL SOCIETY OF JAPAN; Tokio da a conocer determinados compuestos de fórmula I

Fórmula I

en la que uno de R3/R4 es -C (O) (CH2) nR5. Los compuestos de la presente invención no comprenden un radical de este tipo.

El documento EP-A-1 340 981 da a conocer un “resto J-M-T” en la posición R3/R4 de compuestos similares a la fórmula I anterior, en el que J se define como 1-15 átomos de carbono y 0-6 heteroátomos, M se selecciona del

grupo que consiste en -O-, -CO-, -NR4-, -S-, -C (=NH) O-, -NH (CO) -, -NH (CO) NH-, -NH (CS) -, -NH (CS) NH-, -O (CO) NH-, -NH (C=NH) -y maleimidotioéter, seleccionándose R4 de hidrógeno y un grupo alquilo. T se selecciona del grupo que consiste en hidrógeno, un hidroxilo, un grupo saliente, un portador macromolecular y un marcador.

Por tanto, hay una necesidad de ensayos para la detección de las drogas de diseño mencionadas anteriormente y, 15 en algunos casos, sus metabolitos principales. Los ensayos deben poder detectar las drogas de diseño con el fin de monitorizar y tratar pacientes adictos a estas drogas.

Sumario de la invención Una realización de la presente invención es un compuesto de fórmula:

Fórmula I tal como se define en la reivindicación 1. Otra realización de la presente invención es un compuesto de fórmula:

Fórmula II

tal como se define en la reivindicación 6.

Otra realización de la presente invención es un compuesto de fórmula:

Fórmula III

tal como se define en la reivindicación 7.

Otra realización de la presente invención es un método para determinar un compuesto seleccionado del grupo que consiste en 3, 4-metilendioxianfetamina (MDA) , 3, 4-metilendioxi-metanfetamina (MDMA) , 3, 4-metilendioxietilanfetamina (MDEA) y 4-hidroxi-3-metoxi-metanfetamina (HMMA) tal como se explica resumidamente en las reivindicaciones 15 a 21 y 30 a 33.

Otra realización de la presente invención es un kit para determinar un compuesto seleccionado del grupo que consiste en 3, 4-metilendioxianfetamina (MDA) , 3, 4-metilendioxi-metanfetamina (MDMA) , 3, 4-metilendioxietilanfetamina (MDEA) y 4-hidroxi-3-metoxi-metanfetamina (HMMA) tal como se explica resumidamente en las reivindicaciones 22 a 29.

Breve descripción de los dibujos La figura 1 (que sólo es para fines de referencia) es un esquema de reacción que representa un ejemplo de una 20 síntesis de inmunógeno de MDMA-KLH (10) .

La figura 2 (que sólo es para fines de referencia) es un esquema de reacción que representa un ejemplo de una síntesis de inmunógeno de MDA-KLH (14) .

La figura 3 es un esquema de reacción que representa un ejemplo de una síntesis de haptenos de MDMA (15) - (17) .

La figura 4A es un esquema de reacción que representa un ejemplo de una síntesis de haptenos de MDA (18) - (19) .

La figura 4B es un esquema de reacción que representa un ejemplo de una síntesis de hapteno de MDA (20) .

La figura 5 (que sólo es para fines de referencia) es un esquema de reacción que representa un ejemplo de una síntesis de producto intermedio de HMMA (29) para el inmunógeno (30) .

La figura 6 (que sólo es para fines de referencia) es un esquema de reacción que representa un ejemplo de una 35 síntesis de inmunógeno de HMMA-KLH (30) .

La figura 7 es un esquema de reacción que representa un ejemplo de una síntesis de inmunógeno de HMMA-KLH (36) .

La figura 8A es un esquema de reacción que representa un ejemplo de una síntesis de hapteno de MDMA (38) .

La figura 8B (que sólo es para fines de referencia) es un esquema de reacción que representa un ejemplo de una síntesis de producto intermedio de hapteno de MDMA (40) .

La figura 9 (que sólo es para fines de referencia) es un esquema de reacción que representa un ejemplo de... [Seguir leyendo]

1. Compuesto de fórmula:

Fórmula I

en la que:

R1 es H, alquilo inferior que es un radical hidrocarbonado monovalente saturado ramificado o no ramificado que contiene de 1 a 10 átomos de carbono, un grupo protector, o se toma junto con R2 para formar un anillo,

R2 es H, alquilo inferior que es un radical hidrocarbonado monovalente saturado ramificado o no ramificado que contiene de 1 a 10 átomos de carbono, un grupo protector, - (CH2) nSCH2C (O) R6 o - (CH2) nC (SO2Re) =CH2, o se toma junto con R1 para formar un anillo,

R3 yR4 son independientemente H o alquilo inferior que es un radical hidrocarbonado monovalente saturado ramificado o no ramificado que contiene de 1 a 10 átomos de carbono o un grupo protector, o, cuando R1 se toma junto con R2 para formar un anillo, al menos uno de R3 oR4 es -C (O) (CH2) nNHC (O) R5, -C (O) (CH2) nNHC (O) (CH2) nSR5, - (CH2) nSCH2C (O) R5 o- (CH2) nC (SO2R5) =CH2, o cuando R1 no se toma junto con R2 para formar un anillo, R2 no es H o alquilo inferior que es un radical hidrocarbonado monovalente saturado ramificado o no ramificado que contiene de 1 a 10 átomos de carbono,

R5 es H, -OH, -SH, -O-alquilo inferior que es un radical hidrocarbonado monovalente saturado ramificado o no ramificado que contiene de 1 a 10 átomos de carbono, halógeno, NH2, -succinimidilo, -maleimidilo, portador inmunogénico o marcador,

R6 es H, -OH, -SH, -O-alquilo inferior que es un radical hidrocarbonado monovalente saturado ramificado o no ramificado que contiene de 1 a 10 átomos de carbono, halógeno, NH2, -succinimidilo, -maleimidilo, portador inmunogénico o marcador, y

n es un número entero de desde 1 hasta 5,

e incluyendo sales de ácido del mismo.

2. Compuesto según la reivindicación 1, que tiene la fórmula 40

en la que: 45 R1’es H, R3’ es H o metilo o etilo, R4’

es H, alquilo inferior que es un radical hidrocarbonado monovalente saturado ramificado o no 50 ramificado que contiene de 1 a 10 átomos de carbono o un grupo protector

R9’ es - (CH2) nSCH2C (O) R6 o- (CH2) nC (SO2R6’) =CH2, R6’ es Z’, que es una enzima, y n’ es un número entero entre 1 y el peso molecular de dicha enzima dividido entre 500.

3. Compuesto según la reivindicación 1 que tiene la fórmula en la que: R1’ es H, R3’

es H, alquilo inferior que es un radical hidrocarbonado monovalente saturado ramificado o no ramificado que contiene de 1 a 10 átomos de carbono o un grupo protector

R4’

es H, alquilo inferior que es un radical hidrocarbonado monovalente saturado ramificado o no ramificado que contiene de 1 a 10 átomos de carbono o un grupo protector 20 R9’ es - (CH2) nSCH2C (O) R6’ o- (CH2) nC (SO2R6’) =CH2,

R6’ es Z’, que es una proteína inmunogénica o un portador inmunogénico distinto de poli (aminoácido) , y

n’ es un número entero entre 1 y el peso molecular de dicha proteína inmunogénica o portador inmunogénico distinto de poli (aminoácido) dividido entre 500.

4. Compuesto según la reivindicación 1, que tiene la fórmula en la que: R7’

es H, alquilo inferior que es un radical hidrocarbonado monovalente saturado ramificado o no 35 ramificado que contiene de 1 a 10 átomos de carbono o un grupo protector

R6’

es -C (O) (CH2) nNHC (O) R5’, -C (O) (CH2) nNHC (O) (CH2) nSR5’, - (CH2) nSCH2C (O) R5’ o - (CH2) nC (SO2R5’) =CH2,

R5’ es Z’’, que es una proteína inmunogénica o un portador inmunogénico distinto de poli (aminoácido) , y

n’’ es un número entero entre 1 y el peso molecular de dicha proteína inmunogénica o portador inmunogénico distinto de poli (aminoácido) dividido entre 500.

5. Compuesto según la reivindicación 1 que tiene la fórmula

en la que:

R7’ es H, alquilo inferior que es un radical hidrocarbonado monovalente saturado ramificado o no

5 ramificado que contiene de 1 a 10 átomos de carbono o un grupo protector

R5’ es -C (O) (CH2) nNHC (O) R5’, - (CH2) nC (SO2R5’) =CH2, -C (O) (CH2) nNHC (O) (CH2) nSR5’, - (CH2) nSCH2C (O) R5’ o

10 R5’ es Z’’, que es una enzima, y

n’’ es un número entero entre 1 y el peso molecular de dicha enzima dividido entre 500.

6. Compuesto según la reivindicación 1 que tiene la fórmula:

15

Fórmula II

en la que:

R7 es H, alquilo inferior que es un radical hidrocarbonado monovalente saturado ramificado o no ramificado que contiene de 1 a 10 átomos de carbono, un grupo protector, -C (O) (CH2) nNHC (O) R5, -C (O) (CH2) nNHC (O) (CH2) nSR5, - (CH2) nSCH2C (O) R5 o- (CH2) n- (SO2R5) =CH2,

R8 es H, alquilo inferior que es un radical hidrocarbonado monovalente saturado ramificado o no ramificado que contiene de 1 a 10 átomos de carbono, un grupo protector, -C (O) (CH2) nNHC (O) R5, -C (O) (CH2) nNHC (O) (CH2) nSR6, - (CH2) nSCH2C (O) R5 o- (CH2) nC (SO2R5) =CH2,

R5 es H, -OH, -SH, -O-alquilo inferior que es un radical hidrocarbonado monovalente saturado ramificado o no ramificado que contiene de 1 a 10 átomos de carbono, halógeno, NH2, portador inmunogénico, -succinimidilo, -maleimidilo o marcador, y

n es un número entero de desde 1 hasta 5,

con la condición de que al menos uno de R7 yR8 no son H o alquilo inferior que es un radical hidrocarbonado monovalente saturado ramificado o no ramificado que contiene de 1 a 10 átomos de carbono, e incluyendo las sales de ácido del mismo.

7. Compuesto según la reivindicación 1 que tiene la fórmula:

en la que: 45 R3’ es H, metilo o etilo o un grupo protector,

R1’

es H o alquilo inferior que es un radical hidrocarbonado monovalente saturado ramificado o no ramificado que contiene de 1 a 10 átomos de carbono o un grupo protector, 50 R9 es un grupo protector, - (CH2) SCH2C (O) R6 o- (CH2) nC (SO2R6) =CH2,

R6 es H, -OH, -SH, -O-alquilo inferior que es un radical hidrocarbonado monovalente saturado ramificado o no ramificado que contiene de 1 a 10 átomos de carbono, halógeno, NH2, portador

inmunogénico, -succinimidilo, -maleimidilo o marcador, y n es un número entero de desde 1 hasta 5,

e incluyendo sales de ácido del mismo.

8. Compuesto según la reivindicación 1, en el que dicho portador inmunogénico es un poli (aminoácido) .

9. Compuesto según la reivindicación 8, en el que dicho poli (aminoácido) es una proteína.

10. Compuesto según la reivindicación 6 ó 7, en el que dicha proteína se selecciona del grupo que consiste en KLH, BSA, BGG y ovoalbúmina.

11. Compuesto según la reivindicación 1, 6 ó 7, en el que n es 1. 15

12. Compuesto según la reivindicación 1, 6 ó 7, en el que dicho marcador es una enzima, un agente luminiscente o un radioisótopo.

13. Compuesto según la reivindicación 1, en el que dicho marcador es una enzima, un agente luminiscente o un radioisótopo y en el que R7 es H o alquilo inferior que es un radical hidrocarbonado monovalente saturado ramificado o no ramificado que contiene de 1 a 10 átomos de carbono.

14. Anticuerpos generados contra el entactógeno del compuesto según la reivindicación 9 ó 10.

15. Método para determinar en una muestra un compuesto seleccionado del grupo que consiste en 3, 4metilendioxianfetamina (MDA) , 3, 4-metilendioxi-metanfetamina (MDMA) , 3, 4-metilendioxietilanfetamina (MDEA) y 4-hidroxi-3-metoxi-metanfetamina (HMMA) , comprendiendo dicho método:

(a) proporcionar en combinación en un medio:

(i) una muestra que se sospecha que contiene dicho compuesto y

(ii) un anticuerpo generado contra el entactógeno del compuesto según la reivindicación 1, en el que

R5 yR6 son un portador inmunogénico, y 35

(b) examinar dicho medio para detectar la presencia de un complejo que comprende dicho compuesto en dicha muestra y dicho anticuerpo, indicando la presencia del mismo la presencia de dicho compuesto en dicha muestra.

16. Método según la reivindicación 15, en el que dicha combinación comprende además:

(iii) un conjugado de marcador según la reivindicación 1, en el que R5 yR6 son un marcador, excluyendo sales de compuestos según la reivindicación 1 y dicho examen comprende medir la señal de dicho marcador, estando relacionada la cantidad del mismo con la presencia de dicho compuesto en dicha 45 muestra.

17. Método según la reivindicación 16, en el que dicho método es un método homogéneo y dicho medio se examina para determinar la cantidad de dicha señal.

18. Método según la reivindicación 15, en el que dicho método es un método heterogéneo y dicho complejo, si está presente, está separado de dicho medio.

19. Método según la reivindicación 15, en el que dicha proteína se selecciona del grupo que consiste en KLH,

BSA, BGG y ovoalbúmina. 55

20. Método según la reivindicación 15, en el que n es 1.

21. Método según la reivindicación 16, en el que dicho marcador es una enzima, un agente luminiscente o un radioisótopo.

22. Kit para determinar en una muestra un compuesto seleccionado del grupo que consiste en 3, 4metilendioxianfetamina (MDA) , 3, 4-metilendioxi-metanfetamina (MDMA) , 3, 4-metilendioxietilanfetamina (MDEA) y 4-hidroxi-3-metoxi-metanfetamina (HMMA) , comprendiendo dicho kit:

(a) un anticuerpo generado contra un entactógeno de un compuesto según la reivindicación 1 en el que R5 yR6 son un portador inmunogénico, y

(b) reactivos auxiliares para determinar dicho compuesto en dicha muestra.

23. Kit para determinar en una muestra un compuesto seleccionado del grupo que consiste en 3, 4

metilendioxianfetamina (MDA) , 3, 4-metilendioxi-metanfetamina (MDMA) , 3, 4-metilendioxietilanfetamina (MDEA) y 4-hidroxi-3-metoxi-metanfetamina (HMMA) , comprendiendo dicho kit:

(a) un anticuerpo para dicho compuesto,

(b) un conjugado de marcador según la reivindicación 1, en el que R5 yR6 son un marcador, y

(c) reactivos auxiliares para determinar dicho compuesto en una muestra.

24. Kit según la reivindicación 22, en el que dicho portador inmunogénico se selecciona del grupo que consiste 15 en KLH, BSA, BGG y ovoalbúmina,

25. Kit según la reivindicación 22, en el que n es 1.

26. Kit según la reivindicación 23, en el que dicho marcador es una enzima, un agente luminiscente o un radioisótopo.

27. Kit que comprende en combinación envasada:

(i) un anticuerpo para metilendioxianfetamina, y/o 25

(ii) un anticuerpo para metilendioximetanfetamina, y/o

(iii) un anticuerpo para metilendioxietanfetamina, y

(iv) compuesto según la reivindicación 5.

28. Kit que comprende en combinación envasada:

(i) un anticuerpo para metilendioxianfetamina, 35

(ii) un anticuerpo para metilendioximetanfetamina, y/o (iii) un anticuerpo para metilendioxietanfetamina, y

(iv) compuesto según la reivindicación 3, en el que R1’ es OH.

29. Kit que comprende en combinación envasada:

(i) un conjugado de una enzima y un análogo de metilendioxianfetamina y/o un conjugado de una 45 enzima y un análogo de metilendioximetanfetamina y/o un conjugado de una enzima y un análogo de metilendioxietanfetamina, y

(ii) un anticuerpo para metilendioxianfetamina, estando generado dicho anticuerpo contra un entactógeno de un compuesto según la reivindicación 4, en el que R7’ es H, o un compuesto según la reivindicación 3, en el que R1’ es OH, R3’ es H y R4’ es H; y/o (iii) un anticuerpo para metilendioximetanfetamina, estando generado dicho anticuerpo contra un entactógeno de un compuesto según la reivindicación 4, en el que R7’ es metilo, o un compuesto según la reivindicación 3, en el que R1’ es OH, R3’ es metilo y R4’ es H; y/o (iv) un anticuerpo para metilendioxietanfetamina, estando generado dicho anticuerpo contra un entactógeno de un compuesto según la reivindicación 4, en el que R7’ es etilo, o un compuesto según la reivindicación 3, en el que R1’ es OH, R3’ es etilo y R4’ es H.

30. Método para determinar metilendioxianfetamina y/o metilendioxi-metanfetamina y/o metilendioxietanfetamina en una muestra que se sospecha que contiene metilendioxianfetamina y/o metilendioximetanfetamina y/o metilendioxietanfetamina, comprendiendo dicho método:

(a) proporcionar en combinación en un medio: 65

(i) dicha muestra,

(ii) un anticuerpo para metilendioxianfetamina, y/o

(iii) un anticuerpo para metilendioximetanfetamina, y/o

5

(iv) un anticuerpo para metilendioxietanfetamina, y

(v) un compuesto según la reivindicación 2, en el que R1’ es OH,

y

(b) examinar dicho medio para detectar la presencia de un complejo que comprende dicha

metilendioxianfetamina y dicho anticuerpo para metilendioxianfetamina y/o un complejo de dicha

metilendioximetanfetamina y dicho anticuerpo para metilendioximetanfetamina y/o un complejo de dicha

15 metilendioxietanfetamina y dicho anticuerpo para metilendioxietanfetamina, indicando la presencia del

mismo la presencia de dicha metilendioxianfetamina y/o metilendioximetanfetamina y/o

metilendioxietanfetamina en dicha muestra.

31. Método para determinar metilendioxianfetamina y/o metilendioximetanfetamina y/o metilendioxietanfetamina

en una muestra que se sospecha que contiene metilendioxianfetamina y/o metilendioximetanfetamina y/o

metilendioxietanfetamina, comprendiendo dicho método:

(a) proporcionar en combinación en un medio:

25 (i) dicha muestra,

(ii) un anticuerpo para metilendioxianfetamina, y/o

(iii) un anticuerpo para metilendioximetanfetamina, y/o

(iv) un anticuerpo para metilendioxietanfetamina, y

(v) un compuesto según la reivindicación 5

35 y

(b) examinar dicho medio para detectar la presencia de un complejo que comprende dicha

metilendioxianfetamina y dicho anticuerpo para metilendioxianfetamina y/o un complejo de dicha

metilendioximetanfetamina y dicho anticuerpo para metilendioximetanfetamina y/o un complejo de dicha

metilendioxietanfetamina y dicho anticuerpo para metilendioxietanfetamina, indicando la presencia del

mismo la presencia de dicha metilendioxianfetamina y/o metilendioximetanfetamina y/o

metilendioximetanfetamina en dicha muestra.

32. Método para determinar metilendioxianfetamina y/o metilendioximetanfetamina y/o metilendioxietanfetamina

45 en una muestra que se sospecha que contiene metilendioxianfetamina y/o metilendioximetanfetamina y/o

metilendioxietanfetamina, comprendiendo dicho método:

(a) proporcionar en combinación en un medio:

(i) dicha muestra,

(ii) un conjugado de una enzima y un análogo de metilendioxianfetamina y/o un conjugado de una

enzima y un análogo de metilendioximetanfetamina y/o un conjugado de una enzima y un análogo

de metilendioxietanfetamina,

55

(i) un anticuerpo, para metilendioxianfetamina, estando generado dicho anticuerpo contra un entactógeno de un compuesto según la reivindicación 3, en el que R1’ es OH y R3’ es H y/o

(ii) un anticuerpo para metilendioximetanfetamina, estando generado dicho anticuerpo contra un entactógeno de un compuesto según la reivindicación 3, en el que R1’ es OH y R3’ es

metilo y/o

(iii) un anticuerpo para metilendioxietanfetamina, estando generado dicho anticuerpo contra un entactógeno de un compuesto según la reivindicación 3, en el que R1’ es OH y R3’ es etilo

65

y

(b) examinar dicho medio para detectar la presencia de un complejo que comprende dicha

metilendioxianfetamina y dicho anticuerpo para metilendioxianfetamina y/o un complejo de dicha

metilendioximetanfetamina y dicho anticuerpo para metilendioximetanfetamina y/o un complejo de dicha

5 metilendioxietanfetamina y dicho anticuerpo para metilendioxietanfetamina, indicando la presencia del

mismo la presencia de dicha metilendioxianfetamina y/o metilendioximetanfetamina y/o

metilendioxietanfetamina en dicha muestra.

33. Método para determinar metilendioxianfetamina y/o metilendioximetanfetamina en una muestra que se

10 sospecha que contiene metilendioxianfetamina y/o metilendioximetanfetamina, comprendiendo dicho

método:

(a) proporcionar en combinación en un medio:

15 (i) dicha muestra,

(ii) un conjugado de una enzima y un análogo de metilendioxianfetamina y/o un conjugado de una

enzima y un análogo de metilendioximetanfetamina y/o un conjugado de una enzima y un análogo

de metilendioxietanfetamina,

20

(iii) un anticuerpo para metilendioxianfetamina, estando generado dicho anticuerpo contra un entactógeno de un compuesto según la reivindicación 4, en el que R7’ es H y/o

25 (iv) un anticuerpo para metilendioximetanfetamina, estando generado dicho anticuerpo contra un entactógeno de un compuesto según la reivindicación 4, en el que R7’ es metilo y/o

(v) un anticuerpo para metilendioxietanfetamina, estando generado dicho anticuerpo contra un entactógeno de un compuesto según la reivindicación 4, en el que R7’ es etilo

30 y

(b) examinar dicho medio para detectar la presencia de un complejo que comprende dicha

metilendioxianfetamina y dicho anticuerpo para metilendioxianfetamina y/o un complejo de dicha

metilendioximetanfetamina y dicho anticuerpo para metilendioximetanfetamina y/o un complejo de dicha

35 metilendioxietanfetamina y dicho anticuerpo para metilendioxietanfetamina, indicando la presencia del

mismo la presencia de dicha anfetamina y/o metanfetamina y/o metilendioxietanfetamina en dicha

muestra.