Derivados de amidoacridina útiles como inhibidores selectivos de la proteasa 7 específica para la ubiquitina.

Compuesto de fórmula (I):**Fórmula**

en la que:

- i es un número entero seleccionado de entre 0,

1, 2, 3 o 4;

- j es un número entero seleccionado de entre 0, 1, 2 o 3;

- k es un número entero seleccionado de entre 0 o 1;

- cada Ri situado en cualquier posición disponible del anillo A es idéntico o diferente y se selecciona 15 de entre halógeno, alquilo, arilo, -alquilarilo, OR, NRR', CN, CF3, COR, COOR, CONRR';

- cada Rj situado en cualquier posición disponible del anillo C es idéntico o diferente y se selecciona de entre halógeno, alquilo, arilo, -alquilarilo, OR, NRR', CN, COR, COOR, CONRR';

- Rk se selecciona independientemente de entre halógeno;

- X se selecciona de entre H, alquilo, arilo, -alquilarilo, en el que dichos alquilo y/o arilo están opcionalmente sustituidos por halógeno, alquilo, CN, CF3, OR, NRR', COR, COOR, CONRR';

- Y se selecciona de entre:

- (CHT')pNRaRb en el que

· Ra y Rb, idénticos o diferentes, se seleccionan independientemente de entre H, alquilo, arilo o arilalquilo, en el que dicho arilo está opcionalmente sustituido por halógeno, alquilo, CN, CF3, ≥O, OR, NRR', COR, COOR, CONRR';

* o Ra y Rb forman conjuntamente con el átomo de N al que están unidos un N que comprende un heterociclo de 5 a 7 eslabones que puede comprender uno o dos heteroátomos más seleccionados de entre N, O o S, estando dicho heterociclo opcionalmente sustituido por uno o más de entre halógeno; ≥O; alquilo; -alquilarilo o arilo en el que dicho arilo está opcionalmente sustituido por halógeno; CN;

CF3; OR; NRR'; COR; COOR; CONRR';

· p es un número entero seleccionado de entre 0 a 6;

- cada T', idéntico o diferente se selecciona independientemente de entre H o alquilo;**Fórmula**

Derivados de amidoacridina útiles como inhibidores selectivos de la proteasa 7 específica para la ubiquitina.

La presente invención se refiere al descubrimiento de nuevos inhibidores selectivos de proteasas específicas de ubiquitina, a su procedimiento de preparación y a su utilización terapéutica.

Las proteasas específicas de ubiquitina (USP) son cisteína proteasas que pertenecen a la familia de enzimas de desubiquitinilación (DUB).

La desregulación del sistema ubiquitina-proteasoma ha estado implicada en la patogenia de muchas enfermedades humanas, como por ejemplo el cáncer (Hoeller et al. Nat. Rev. Cáncer 26, 6(1), 776-788), trastornos neurodegenerativos (Rubinsztein, Nature 26, 443(7113), 78-786) y enfermedades víricas (Gao v Luo Can J. Physiol. Pharmacol. 26, 84(1), 5-14). El éxito en el mercado del inhibidor del proteasoma Velcade® (bortezomib) para el tratamiento del mieloma múltiple y del linfoma de células del manto ha establecido este sistema como un objetivo válido para el tratamiento del cáncer (Adams, Nat. Rev. Cáncer 24, 4(5), 349-36). Una alternativa prometedora a dirigirse al propio proteasoma sería interferir con el mecanismo de conjugación/desconjugación de ubiquitina corriente arriba, para generar agentes anticancerígenos más específicos y menos tóxicos.

Las enzimas desubiquitinizadoras, que escinden específicamente el enlace isopeptídico en el terminal C de ubiquitina, pueden invertir la mono- y poliubiquitinación. Las enzimas proteasas específicas de ubiquitina e hidrolasas del terminal C de ubiquitina (UCH) son los miembros mejor caracterizados de la familia DUB (Komander et al. Nat. Rev. Mol. Cell Biol. 29, 1(8), 55-63; Nijman et al. Ce//25, 123(5), 773-786). Se cree que las UCH escinden pequeños sustratos proteicos preferentemente y están involucradas principalmente en el tratamiento y reciclo de ubiquitina, pero sus funciones específicas siguen siendo poco comprendidas. Las USP constituyen la mayor subfamilia de DUB, con más de 6 miembros. Eliminan la ubiquitina de sustratos proteicos específicos, evitando de este modo su orientación al proteasoma o regulando su localización la activación subcelular (Daviet & Colland, Biochimie 28, 9(2), 27-83). Las USP están surgiendo como posibles objetivos para la interferencia farmacológica con el mecanismo de regulación de ubiquitina, basándose en su actividad de proteasa y en la implicación en varias enfermedades humanas.

USP7 (Proteasa 7 específica para ubiquitina)/HAUSP (Proteasa específica para ubiquitina asociada al herpes) es una proteína de 135 kDa de la familia USP. Se ha demostrado que USP7 interactúa con proteínas víricas, tales como ICP (Vmw 11), una iniciación estimulante del ciclo lítico vírico del gen precoz inmediato del virus del herpes simple (Everett et al., J. Virol. 73, 1999, 417-426), y EBNA1 (Epstein-Barr Nuclear Antigen-1/Antígeno-1 nuclear de Epstein-Barr) (Holowaty et al., J. Biol. Chem. 23, 278, 29987-29994 y 47753-47761). Las proteínas humanas, tales como p53 y la E3 ligasa mayor de p53, Mdm2, también se han identificado como asociadas y sustratos de USP7 (Cummins et al. Nature 24, 486, Cummins y Vogelstein, Cell Cycle, 24, 3, 689-692; Li et al. Mol. Cell 24, 13, 879-886.; Li et al., Nature 22, 416, 648-653). Más en general USP7 puede desubiquitinizar diferentes objetivos, entre ellos Mdm2 y p53, y la desubiquitinación neta de estos últimos objetivos determina en última instancia, niveles de p53 funcional. Según informes recientes, se ha demostrado también que el silenciamiento de USP7 aumenta los niveles de p53 en estado estacionario al favorecer la degradación de Mdm2. La unión de USP7 a p53 ha demostró recientemente que está regulada por TSPYL5, una proteína potencial mente implicada en la oncogenia de mama a través de una competencia con p53 para la unión a la misma región de USP7 (Epping et al., Nat. Cell Biol. 211, 13(1): 12-8). Más recientemente, tanto el aumento como la disminución de USP7 se ha demostrado que inhiben la proliferación de células de cáncer de colon in vitro y el crecimiento tumoral in vivo, dando como resultado niveles constitutivamente elevados de p53 (Becker et al. Cell Cycle 28, 7(9), 125-13).

La USP7 altera además el nivel del supresor tumoral p16INK4a por estabilización de Bmi1/Mel18 (Maertens et al., EMBO J. 21 29, 2553-2565). Otras proteínas que participan en la integridad /regulación genómica como la DNMT1 ADN metilasa y el adaptador de Claspin también son también estabilizados por USP7 (Du et al., Science Signaling 21, 3(146):ra8; Faustrup et al., J. Cell. Biol. 29,184(1): 13-9). Es importante destacar la abundancia de USP7 y DNMT1, una proteína implicada en el mantenimiento de la metilación epigenética requerida para silenciar genes que intervienen en el desarrollo y el cáncer, se correlaciona en el cáncer de colon humano (Du et al., Science Signaling, 21, 3(146): ra8). La USP7 también se ha presentado en células humanas para desubiquitinizar el conocido gen supresor de tumores PTEN, lo que provoca su exportación nuclear y por lo tanto su inactivación (Song et al., Nature 28, 455(7214), 813-7). Más significativamente, la sobreexpresión de USP7 se describió por primera vez en cáncer de próstata y esta sobreexpresión se asoció directamente a la agresividad del tumor (Song et al., Nature 28, 455(7214), 813-7).

La USP7 también se ha presentado en células humanas para desubiquitinizar FOX4, lo que provoca su exportación nuclear y por lo tanto su inactivación; por consiguiente, la vía PI3K/PKB de señalización oncogénica se activó (van der Horst et al., Nat. Cell Biol. 26, 8, 164-173). Por último, USP7 desempeña una función importante en las respuestas celulares mediadas por p53 a diversos tipos de estrés, tales como daños en el ADN y estrés oxidativo (Marchenko et al., EMBO J. 27 26, 923-934, Meulmeester et al. Mol. Cell 25, 18, 565-576, van der Horst et al., Nat. Cell Biol. 26, 8, 164-173).

Los inhibidores sintéticos de la proteína de unión USP7 que contiene la porción de polipéptido P1-Gly-P3-Ser, donde P1 es un resto de ácido glutámico o un aminoácido con una cadena lateral apolar y P3 es un resto de glicina o un aminoácido con cadena lateral apolar, se han descrito (documento WO 26/7248).

Los fenotipos asociados al silenciamiento de USP7 y las conexiones conocidas entre USP7 y las proteínas víricas esenciales y las vías oncogénicas, tales como el p53/Mdm2 y las vías PI3K/PKB, sugieren fuertemente que el objetivo USP7 con inhibidores de molécula pequeña puede ser beneficioso en el tratamiento de cánceres y enfermedades víricas. Un inhibidor contra USP7 se describió recientemente (Colland et al. Molecular Cáncer Therapeutics 29, 8, 2286-95 y el documento EP 1 749 822).

Sin embargo, hasta la fecha, no parecen haberse descrito inhibidores de pequeña molécula de USP7 no específicos.

La presente invención se refiere a un compuesto según cualquiera de las reivindicaciones 1 a 4 y 6, para el procedimiento de la reivindicación 5 y a la composición de la reivindicación 7, para la utilización de las reivindicaciones 8 a 11 y a la combinación de la reivindicación 12.

Según un primer objeto, la presente invención se refiere a un compuesto de fórmula (I):

O

X

Y

en la que:

- i es un número entero seleccionado de entre , 1,2, 3 o 4;

- j es un número entero seleccionado de entre , 1,2 o 3; k es un número entero seleccionado de entre o 1;

- cada Ri situado en cualquier posición disponible del anillo A es idéntico o diferente y se selecciona de entre halógeno, alquilo, arilo, alquilarilo, OR, NRR1, CN, CF3, COR, COOR, CONRR';

- cada Rj situado en cualquier posición disponible del anillo C es idéntico o diferente y se selecciona de entre halógeno, alquilo, arilo, alquilarilo, OR, NRR1, CN, COR, COOR, CONRR';

Rk se selecciona independientemente de entre halógeno;

- X se selecciona de entre H, alquilo, arilo, alquilarilo, en el que dichos alquilo y/o arilo está opcionalmente sustituido por halógeno, alquilo, CN, CF3, OR, NRR1, COR, COOR, CONRR';

- Y se selecciona de entre:

- (CFIT')pNRaRb donde

Ra y Rb, idénticos o diferentes, se seleccionan independientemente de entre H, alquilo, arilo o arilalquilo, en los que dicho arilo está opcionalmente sustituido por halógeno, alquilo, CN, CF3, =, OR, NRR', COR, COOR, CONRR';

o Ra y Rb forman juntos con el átomo de N al que están unidos un N que comprende un heterociclo de 5 a 7 eslabones que puede comprender uno o dos heteroátomos más seleccionados entre N, O o S, estando dicho heterociclo opcionalmente sustituido por uno o más de entre halógeno; =; alquilo; - alquilarilo o arilo en el que dicho arilo está... [Seguir leyendo]

1. Compuesto de fórmula (I):

Y

en la que:

- i es un número entero seleccionado de entre , 1, 2, 3 o 4;

- j es un número entero seleccionado de entre , 1, 2 o 3;

- k es un número entero seleccionado de entre o 1;

- cada R¡ situado en cualquier posición disponible del anillo A es idéntico o diferente y se selecciona de entre halógeno, alquilo, arllo, -alqullarllo, OR, NRR1, CN, CF3, COR, COOR, CONRR';

- cada Rj situado en cualquier posición disponible del anillo C es idéntico o diferente y se selecciona de entre halógeno, alquilo, arilo, -alqullarllo, OR, NRR1, CN, COR, COOR, CONRR';

- Rk se selecciona independientemente de entre halógeno;

- X se selecciona de entre H, alquilo, arilo, -alquilarilo, en el que dichos alquilo y/o arilo están opclonalmente sustituidos por halógeno, alquilo, CN, CF3, OR, NRR1, COR, COOR, CONRR';

- Y se selecciona de entre:

- (CFIT')pNRaRb en el que

Ra y Rb, idénticos o diferentes, se seleccionan independientemente de entre H, alquilo, arilo o arilalquilo, en el que dicho arilo está opclonalmente sustituido por halógeno, alquilo, CN, CF3, =, OR, NRR', COR, COOR, CONRR';

o Ra y Rb forman conjuntamente con el átomo de N al que están unidos un N que comprende un heterociclo de 5 a 7 eslabones que puede comprender uno o dos heteroátomos más seleccionados de entre N, O o S, estando dicho heterociclo opclonalmente sustituido por uno o más de entre halógeno; =; alquilo; -alquilarilo o arilo en el que dicho arilo está opcionalmente sustituido por halógeno; CN; CF3; OR; NRR'; COR; COOR; CONRR';

p es un número entero seleccionado de entre a 6;

- cada T, idéntico o diferente se selecciona independientemente de entre H o alquilo;

-----(CHT)qCH

en la que:

CHv@y

es un heterociclo saturado o parcialmente insaturado o heteroarllo, mono o bicíclico, que comprende 1, 2 o 3 heteroátomo(s) selecclonado(s) de entre N, O o S, opclonalmente sustituido por uno o más de entre alquilo; -alquilarilo; OR; C(=)OR; =; CN; CF3; COR; NRR'; CONRR'; arilo o -alquilarilo en el que dicho arilo está opcionalmente sustituido por alquilo, halógeno, OR o COR;

q es un número entero seleccionado de entre a 6;

cada T, idéntico o diferente se selecciona independientemente de entre H o alquilo;

- (CHT)r-arilo en el que:

dicho arilo mono o bicíclico está opcionalmente sustituido por uno o más de alquilo; OR; CF3, SO2NRR'; -C(=)R; halógeno; CN; -NRR'; CONRR; C(=O)-Oalquil en el que dicho alquilo está opcionalmente sustituido por NRR'; y/o dicho arilo mono o bicíclico está opcionalmente fusionado con un heterociclo monocíclico de 5 a 7 eslabones;

r es un número entero seleccionado de entre a 6;

cada T, idéntico o diferente se selecciona independientemente de entre H o alquilo;

- (CHT)s-(C3-C7)cicloalquilo en el que

s es un número entero seleccionado de entre a 6;

cada T, idéntico o diferente se selecciona independientemente de entre H o alquilo;

dicho cicloalquilo es monocíclico, o está fusionado con un arilo;

- alquilo opcionalmente sustituido por CN, Oalquilo;

- U-S()ralquilo en el que

t es un número entero seleccionado de entre , 1 o 2;

-U- es un alquileno opcionalmente sustituido por uno o más de entre halógeno; CN; NRR'; CONRR; C(=)OR;

- o X e Y forman conjuntamente con el átomo de N al que están unidos un átomo de N y opcionalmente uno o dos heteroátomos más, estando insaturado y/o

estando opcionalmente sustituido por uno o más de entre: =; Hal, cicloalquilo; heterociclo; C(=)-Oalquilo; arilo o -alquilarilo en el que dicho arilo está opcionalmente fusionado con un heterociclo y/o estando dicho arilo opcionalmente sustituido por alquilo o COalquilo;

estando opcionalmente fusionado con un arilo;

en el que R y R', idénticos o diferentes se seleccionan independientemente de entre H, alquilo, arilo, alquilarilo, o un tautómero del mismo, y/o una sal farmacéuticamente aceptable del mismo.

2. Compuesto según la reivindicación 1, en el que k = 1.

3. Compuesto según cualquiera de las reivindicaciones anteriores, en el que:

- X se define como en cualquiera de las reivindicaciones 1 a 2 e Y se selecciona de entre:

- (CHT')pNRaRb en el que

Ra y Rb, idénticos o diferentes, se seleccionan independientemente de entre H, alquilo, arilo, -alquilarilo, en los que dicho arilo está opcionalmente sustituido por alquilo;

p es de a 4; o cuando

Ra y Rb forman conjuntamente con el átomo de N al que están unidos un heterociclo de 5 a 7 eslabones que comprende opcionalmente uno o dos heteroátomos más seleccionados de entre N, O o S, estando dicho heterociclo opcionalmente sustituido con uno o más de entre halógeno; =; alquilo; -alquilarilo o arilo, en el que arilo está opcionalmente sustituido por halógeno; =; CN;CF3; OR; NRR'; COR; COOR;

OR; =; CF3, S2NRR'; -C(=)R;

heterociclo que comprende dicho dicho heterociclo opclonalmente

CN, NRR', C(=)alquilo, alquilo;

CONRR';

p se selecciona de entre 2 o 3;

cada T', idéntico o diferente, se selecciona independientemente de entre H o alquilo;

en la que:

es un heterociclo o heteroarilo bicíclico saturado o parcialmente ¡nsaturado, que comprende 1, 2 o 3 heteroátomo(s) seleccionado(s) de entre N, O o S, opcionalmente sustituido por uno o más de entre alquilo; OR; C(=)OR; arilo o -alquiladlo en el que dicho arilo está opcionalmente

sustituido por alquilo, halógeno, OR o COR;

q es un número entero seleccionado de entre , 1, 2 o 3;

cada T, Idéntico o diferente se selecciona independientemente de entre H o alquilo;

- (CHT)r-arllo en el que:

dicho arilo es mono o bicíclico, opcionalmente sustituido por uno o más de entre alquilo, OR, S2NRR'; -C(=)R; halógeno; CN; C(=)-Oalqu¡lo, en el que dicho alquilo está opcionalmente sustituido con NRR1; y dicho arilo está opcionalmente fusionado con un heterociclo;

r es un número entero seleccionado de entre , 1, 2 o 3;

cada uno de los T, idénticos o diferentes se selecciona independientemente de entre H o alquilo; o

- X e Y forman conjuntamente con el átomo de N al que están unidos un heterociclo que comprende dicho átomo de N y opcionalmente uno o dos heteroátomos más, estando dicho heterociclo opcionalmente ¡nsaturado y/o

estando opcionalmente sustituido por uno o más de entre: =; alquilo; cicloalquilo; heterociclo; C(=)- Oalquilo; arilo o -alquilarilo en el que dicho arilo está opcionalmente sustituido por alquilo;

estando opcionalmente fusionado con un arilo; en el que, preferentemente, q es 1, 2, o 3, r es 1, 2 o 3.

4. Compuesto según cualquiera de las reivindicaciones anteriores, en el que:

[1 -(3-metil-bencil)-piperidin-4-ilmetil]-amida del ácido 9-cloro-5,6,7,8-tetrahidro-acridina-3-carboxílico (1 -etil-pirrolidin-2-ilmetil)-amida del ácido 9-cloro-5,6,7,8-tetrahidro-acrid¡na-3-carboxílico (2-dlprop¡lamino-etil)-amida del ácido 9-cloro-5,6,7,8-tetrahidro-acridina-3-carboxíl¡co [2-(butil-etil-amino)-etil]-amida del ácido 9-cloro-5,6,7,8-tetrahidro-acr¡d¡na-3-carboxíl¡co [3-(bencil-et¡l-am¡no)-propil]-amida del ácido 9-cloro-5,6,7,8-tetrah¡dro-acr¡d¡na-3-carboxíl¡co (3-diprop¡lam¡no-prop¡l)-amida del ácido 9-cloro-5,6,7,8-tetrah¡dro-acr¡d¡na-3-carboxíl¡co (2-d¡et¡lam¡no-et¡l)-am¡da del ácido 9-cloro-5,6,7,8-tetrah¡dro-acr¡d¡na-3-carboxíl¡co (3-pirrolidin-1-il-propil)-amida del ácido 9-cloro-5,6,7,8-tetrah¡dro-acr¡d¡na-3-carboxíl¡co [3-(2,6-dimetil-piperidin-1 -il)-propil]-amida del ácido 9-cloro-5,6,7,8-tetrahidro-acr¡d¡na-3-carboxíl¡co (3-d¡et¡lam¡no-prop¡l)-am¡da del ácido 9-cloro-5,6,7,8-tetrah¡dro-acr¡d¡na-3-carboxílico (2-dimet¡lam¡no-et¡l)-am¡da del ácido 9-cloro-5,6,7,8-tetrah¡dro-acr¡d¡na-3-carboxílico Azepan-1-¡l-(9-cloro-5,6,7,8-tetrah¡dro-acrid¡n-3-¡l)-metanona

[3-(4-propil-piperazin-1-il)-propil]-amida del ácido 9-cloro-5,6,7,8-tetrahidro-acridina-3-carboxíl¡co [3-(bencil-met¡l-am¡no)-prop¡l]-am¡da del ácido 9-cloro-5,6,7,8-tetrahidro-acridina-3-carboxílico [3-(4-metil-piperazin-1 -il)-propil]-amida del ácido 9-cloro-5,6,7,8-tetrahidro-acridina-3-carboxíl¡co

[1 ^'Ibipiperidinil-l '-il-(9-cloro-5,6,7,8-tetrahidro-acridin-3-il)-metanona o un tautómero del mismo, y/o una sal farmacéuticamente aceptable del mismo.

5. Procedimiento para la preparación de un compuesto según cualquiera de las reivindicaciones anteriores, que comprende la reacción de un compuesto correspondiente de fórmula (Vil):

(Vil)

por acoplamiento peptídico

con un compuesto correspondiente de fórmula (VIII):

(VIII)

en la que I, j, k, Ri, Rj y Rk se definen como en las reivindicaciones 1 a 4, R es OH o un halógeno y X' e Y' son Idénticos a X e Y respectivamente, o un precursor de los mismos, o un grupo protector de amino, opcionalmente seguido de alquilación, alquilaciones o desprotección.

6. Compuesto de fórmula (VI):

(VI)

en la que i, j, Ri, Rj se definen como en cualquiera de las reivindicaciones 1 a 4, con la excepción de

7. Composición farmacéutica que comprende un compuesto de fórmula (I) como se define en cualquiera de las reivindicaciones 1 a 4 o un tautómero del mismo, y/o una sal farmacéuticamente aceptable del mismo, con un excipiente farmacéutico aceptable.

8. Compuesto de fórmula (I) como se define en cualquiera de las reivindicaciones 1 a 4 o un tautómero del mismo, y/o una sal farmacéuticamente aceptable del mismo para su utilización para inhibir una USP.

9. Compuesto para su utilización según la reivindicación 8 para inhibir la USP7.

1. Compuesto según cualquiera de las reivindicaciones 1 a 4 o un tautómero del mismo, y/o una sal farmacéuticamente aceptable del mismo para su utilización para tratar y/o prevenir el cáncer y la metástasis,

enfermedades neurodegenerativas, tal como la enfermedad de Alzheimer y la enfermedad de Parklnson, trastornos inmunltarlos, enfermedades óseas y de las articulaciones, osteoporosis, trastornos Inflamatorios de la artritis, enfermedades cardiovasculares, infecciones y enfermedades víricas, y/o ¡nfecclosldad y/o latencla víricas, infecciones y enfermedades bacterianas.

11. Compuesto para su utilización según la reivindicación 1, en el que dichas infecciones y enfermedades víricas se

seleccionan de entre las infecciones víricas por herpes simple-1 o -2, hepatitis A, hepatitis C, infección y enfermedad por coronavirus del SARS, virus de Epstein-Barr, infecciones y enfermedades rinovíricas, infecciones y enfermedades adenovíricas, poliomielitis.

12. Combinación que comprende un compuesto de fórmula (I) como se define en cualquiera de las reivindicaciones

1 a 4 o un tautómero del mismo, y/o una sal farmacéuticamente aceptable del mismo, con uno o más agentes activos seleccionados de entre agentes anticancerosos, agentes neurológicos, agentes trombolíticos, agentes antioxidantes, antiinfecciosos, agentes antihipertensores, agentes diuréticos, agentes trombolíticos, agentes ¡nmunosupresores, agentes cardiovasculares, agentes inmunomoduladores, agentes antiinflamatorios, agentes

antivíricos, agentes antibacterianos.