Conjugados de fotosensibilizadores y fragmentos de anticuerpo.

Un proceso para preparar un compuesto que comprende un agente fotosensibilizador acoplado con una molécula vehículo,

en el que el compuesto comprende una relación de agente fotosensibilizador y molécula vehículo de almenos 3:1, que comprende las etapas de:

(i) proporcionar un agente fotosensibilizador; en el que el agente fotosensibilizador es al menos uno seleccionado del grupo que consiste en: hematoporfirinas, porfirinas de origen natural; clorinas de origen natural;

bacterioclorinas de origen natural; feoforbidas; pirofeoforbida a; fotocloro, clorinas; clorina e6; mono-L-aspartil clorina e6, di-L-aspartil clorina e6; clorina de estaño (IV) e6; bacterioclorofilas de paladio; bacteriofeoforbida de paladio; clorinas sintéticas; bacterioclorinas sintéticas; metatetrahidroxifenil clorina y bacterioclorina;

benzoporfirina; monobenzoporfirinas; verteporfina; ftalocianinas; ftalocianinas de aluminio sulfonadas (disulfonadas y tetrasulfonadas); naftalocianinas de aluminio sulfonadas; purpurinas; purpurina-18;

octaetilpurpurina de estaño y cinc; etiopurpurina de estaño; verdinas; porficenos; porfirinas sintéticas; clorinas sintéticas; bacterioclorinas sintéticas; mesotrietinilporfirinas sin metales; mesotrietinilporfirinas metalizadas; porfirinas de núcleo modificado; porfirinas expandidas (texafirinas); motexafina de lutecio; motexafina de gadolinio; fenotiazinio; azul de metileno; azul de toluidina; cianinas; merocianina 540; colorantes de acridina; colorantes de BODIPY; aza-BODIPY; hipericina; colorantes de escuarina halogenada; colorantes de xanteno halogenado; eosina; rosa Bengala;

(ii) proporcionar una molécula vehículo; en el que la molécula vehículo se selecciona de scFv, fragmentos Fab y/o anticuerpos de dominio;

(iii) conjugar el agente fotosensibilizador y la molécula vehículo en presencia de un primer y un segundo disolventes apróticos polares y un tampón acuoso, en el que el primer y el segundo disolventes apróticos se seleccionan del grupo que consiste en dimetil sulfóxido (DMSO); acetonitrilo; N,N-dimetilformamida (DMF); HMPA; dioxano; sulfolano; y N-metilpirrolidona; y en el que la relación del primer disolvente aprótico al segundo disolvente aprótico es de aproximadamente 1 a 49 %: 49 a 1 %.

Conjugados de fotosensibilizadores y fragmentos de anticuerpo La invención se refiere a terapia fotodinámica (PDT) para la destrucción selectiva de células malignas, enfermas o infectadas o agentes infecciosos sin provocar daño en células normales. Esto puede conducir a un tratamiento clínico más eficaz.

El tratamiento actual de enfermedad es, predominantemente, no dirigido. Se administran fármacos por vía sistémica o por vía oral que exponen muchos otros tejidos así como los tejidos que están enfermos. En terapia de cáncer, los fármacos quimioterapéuticos son específicos para células que están creciendo y se dividen rápidamente ya que actúan principalmente por un mecanismo que interfiere con la replicación del ADN [1] (Para detalles de todas las referencias, véase sección de referencias posterior) . Otras células pueden captar el fármaco y también intoxicarse, tales como células madre de médula ósea que se dividen rápidamente, dando como resultado inmunosupresión y enfermedad. En enfermedades infecciosas, el fármaco antibacteriano se introduce en la sangre (por vía oral o por inyección) e interfiere con una ruta metabólica bacteriana particular. La exposición de otros tejidos al fármaco puede dar como resultado efectos secundarios así como el principal problema de la resistencia farmacológica. Las células infectadas por virus son difíciles de tratar ya que su metabolismo es prácticamente idéntico a células humanas no infectadas.

Se ha postulado generalmente la hipótesis de que los avances de la medicina pueden estar en la adaptación de los fármacos a la enfermedad. Esto significa, entre otros, suministrar el producto terapéutico al tejido u organismo diana correcto, en lugar del enfoque de acierto y error no selectivo de la mayoría de los fármacos convencionales usados en la actualidad. Esto dará como resultado la administración de dosis menores, menores efectos secundarios y toxicidades, y mejores respuestas generales. Los avances en la genómica significarán algún día que los fármacos puedan adaptarse al individuo, ya que el cáncer de mama en un individuo puede diferir del cáncer de mama en otro individuo.

Existen muchos fármacos usados clínicamente en la actualidad que son muy buenos en la destrucción o tratamiento de las células enfermas, una vez que el fármaco se ha acumulado en el tejido correcto. Por lo tanto, el problema está en la dirección específica de fármacos en lugar de sus mecanismos de acción. Los ejemplos de esto incluyen radiación ionizante dirigida a diferencia de radioterapia de haz externo [2], fármacos quimioterapéuticos dirigidos (por ejemplo, metotrexato o doxorrubicina) a diferencia de fármacos libres [3] y toxinas [4]. La PDT es un ejemplo particularmente bueno ya que ya está bien establecida en muchos tratamientos, pero se está haciendo evidente que un mejor resultado terapéutico, y en consecuencia aplicaciones clínicas expandidas en gran medida, vendrían de la predirección del fármaco sensibilizador a los tejidos correctos además de dirección de la fuente de luz, que no es precisa al nivel celular [5, 6].

La dirección de fármacos u otros efectores a las células deseadas es un área bien establecida. Uno de los principales enfoques de la dirección es usar anticuerpos o ligandos específicos de células como el elemento de dirección de una molécula multifuncional [7, 8]. Un buen diseño para dicha molécula multifuncional sería uno que sea altamente específico para células enfermas, capaz de portar muchos fármacos con alta capacidad sin comprometer su función y capaz de depositar el fármaco en el compartimento subcelular que se vería afectado principalmente.

Los anticuerpos han evolucionado de forma natural para actuar como la primera línea de defensa en el sistema inmunitario de mamíferos. Son glucoproteínas complejas que tienen especificidad exquisita y enorme diversidad. Esta diversidad surge de combinación de genes programada y mutagénesis dirigida, dando como resultado probablemente un billón de secuencias de anticuerpo diferentes [9]. Esta diversidad significa que los anticuerpos pueden unirse prácticamente a cualquier molécula diana que es habitualmente de naturaleza proteica. Es posible en la actualidad imitar la selección y producción de anticuerpo in vitro, seleccionando anticuerpos humanos recombinantes contra prácticamente cualquier diana deseada [10].

Esta selectividad antigénica que se confiere por dominios variables y es independiente de los dominios constantes, se conoce de experimentos que implican la expresión bacteriana de fragmentos de anticuerpo, que contienen todos uno o más dominios variables. Estas moléculas incluyen moléculas de tipo Fab (Better et al. (1988) Science 240, 1041) ; moléculas Fv (Skerra et al. (1988) Science 240, 1038) ; moléculas Fv monocatenarias (ScFv) en las que los dominios compañeros VH yVL están unidos mediante un oligopéptido flexible (Bird et al. (1988) Science 242, 423; Huston et al. (1988) Proc. Natl. Acad Sci. USA 85, 5879) y anticuerpos de dominio sencillo (dAb) que comprenden dominios V aislados (Ward et al. (1989) Nature 341, 544) . Una revisión general de las técnicas implicadas en la síntesis de fragmentos de anticuerpo que conservan sus sitios de unión selectiva se encontrará en Holliger y Hudson, Nature Biotechnology (2005) 23, 1126-36.

Un número significativo de fármacos biotecnológicos que están en desarrollo se basan en dirigir anticuerpos [7, 11, 12]. La técnica de selección in vitro más popular es la presentación en fagos de anticuerpos, en la que los anticuerpos se presentan y manipulan en la superficie de virus [10].

La presentación de proteínas y polipéptidos en la superficie de bacteriófagos (fagos) , fusionados con una de las proteínas de cubierta del fago proporciona una herramienta poderosa para la selección de ligandos selectivos. Esta técnica de “presentación de fagos” se usó originalmente por Smith en 1985 (Science 228, 1315-7) para crear grandes bibliotecas de péptidos para el fin de seleccionar los que tuvieran una alta afinidad por un antígeno particular. Más recientemente, el método se ha empleado para presentar anticuerpos en la superficie de fagos para identificar ligandos que tengan propiedades deseadas (McCafferty et al., Nature, 1990, 552-554) .

El uso de presentación de fagos para aislar ligandos que se unan con moléculas biológicamente relevantes se ha revisado en Felici et al. (1995) Biotechnol. Annual Rev. 1, 149-183, Katz (1997) Annual Rev. Biophys. Bionaol. Struct. 26, 27-45 y Hoogenboom Nature Biotechnology (2005) 23, 1105-16.

Se están desarrollando muchos anticuerpos terapéuticos para una serie de enfermedades, principalmente cáncer, enfermedades autoinmunitarias y prevención de rechazo de aloinjertos. La Tabla 1 enumera algunos de estos anticuerpos importantes.

Tabla 1 Usos terapéuticos de anticuerpos (adaptada de [11, 12])

Anticuerpo Diana Aplicación

Herceptin (trastuzumab) Receptor ErbB2 (Her 2) Terapia de cáncer de mama

Rituxan (rituximab) CD20 Linfoma

Theragyn (pemtumomab) Muc-1 Cáncer ovárico

Remicade (infliximab) TNF-alfa Artritis reumatoide, enfermedad de Crohn

Zenapax (daclizumab) CD25 Rechazo de aloinjertos

Panorex (edrecolomab) Antígeno de superficie 171A Cáncer colorrectal

Vitaxin Integrina alfa Vbeta3 Sarcoma

Protovir Citomegalovirus (CMV) Infección por CMV

MFE-23 Antígeno carcinoembrionario Cáncer colorrectal

Amevive (alefacept) CD11a Psoriasis

Bexxar (I131-tositumomab) CD-20 Linfoma

Mylotarg (ozogamicina de gemtuzumab) CD-33 Leucemia

Los anticuerpos pueden unirse con un alto grado de especificidad con células diana que expresan el receptor apropiado. La afinidad de un anticuerpo es una medida de lo bien que un anticuerpo se une con la diana (antígeno) . Habitualmente se describe por una constante de disociación en equilibrio (Kd) . Para anticuerpos que es necesario internalizar, la velocidad de asociación es más importante ya que la velocidad de disociación no es aplicable si el anticuerpo se lleva dentro de la célula. Existen diversas tecnologías para seleccionar y manipular anticuerpos que tienen propiedades estructurales y de unión deseadas [13].

Como con todas las moléculas biológicas, el tamaño del anticuerpo afecta a su farmacocinética in vivo [14, 15]. Moléculas mayores persisten más tiempo en la circulación debido a eliminación lenta (se eliminan glucoproteínas grandes mediante captación específica por el hígado) . Para anticuerpos completos (peso molecular de 150 KDa) que reconocen un antígeno de células cancerosas en un sistema de modelo de ratón experimental, el 30-40 % puede captarse por el tumor, pero... [Seguir leyendo]

1. Un proceso para preparar un compuesto que comprende un agente fotosensibilizador acoplado con una molécula vehículo, en el que el compuesto comprende una relación de agente fotosensibilizador y molécula vehículo de al 5 menos 3:1, que comprende las etapas de:

(i) proporcionar un agente fotosensibilizador; en el que el agente fotosensibilizador es al menos uno seleccionado del grupo que consiste en: hematoporfirinas, porfirinas de origen natural; clorinas de origen natural; bacterioclorinas de origen natural; feoforbidas; pirofeoforbida a; fotocloro, clorinas; clorina e6; mono-L-aspartil 10 clorina e6, di-L-aspartil clorina e6; clorina de estaño (IV) e6; bacterioclorofilas de paladio; bacteriofeoforbida de paladio; clorinas sintéticas; bacterioclorinas sintéticas; metatetrahidroxifenil clorina y bacterioclorina; benzoporfirina; monobenzoporfirinas; verteporfina; ftalocianinas; ftalocianinas de aluminio sulfonadas (disulfonadas y tetrasulfonadas) ; naftalocianinas de aluminio sulfonadas; purpurinas; purpurina-18; octaetilpurpurina de estaño y cinc; etiopurpurina de estaño; verdinas; porficenos; porfirinas sintéticas; clorinas sintéticas; bacterioclorinas sintéticas; mesotrietinilporfirinas sin metales; mesotrietinilporfirinas metalizadas; porfirinas de núcleo modificado; porfirinas expandidas (texafirinas) ; motexafina de lutecio; motexafina de gadolinio; fenotiazinio; azul de metileno; azul de toluidina; cianinas; merocianina 540; colorantes de acridina; colorantes de BODIPY; aza-BODIPY; hipericina; colorantes de escuarina halogenada; colorantes de xanteno halogenado; eosina; rosa Bengala;

(ii) proporcionar una molécula vehículo; en el que la molécula vehículo se selecciona de scFv, fragmentos Fab y/o anticuerpos de dominio;

(iii) conjugar el agente fotosensibilizador y la molécula vehículo en presencia de un primer y un segundo disolventes apróticos polares y un tampón acuoso, en el que el primer y el segundo disolventes apróticos se seleccionan del grupo que consiste en dimetil sulfóxido (DMSO) ; acetonitrilo; N, N-dimetilformamida (DMF) ;

HMPA; dioxano; sulfolano; y N-metilpirrolidona; y en el que la relación del primer disolvente aprótico al segundo disolvente aprótico es de aproximadamente 1 a 49 %: 49 a 1 %.

2. El proceso de acuerdo con la reivindicación 1 en el que las propiedades físicas y funcionales del agente fotosensibilizador y de la molécula vehículo están sustancialmente inalteradas después del acoplamiento. 30

3. El proceso de acuerdo con la reivindicación 2 en el que el primer y el segundo disolventes apróticos se seleccionan del grupo que consiste en: DMSO; DMF; y acetonitrilo.

4. El proceso de acuerdo con la reivindicación 3 en el que el primer y el segundo disolventes apróticos son DMSO y 35 acetonitrilo.

5. El proceso de acuerdo con las reivindicaciones 1-4 en el que la relación es PBS 92 %: DMSO 2 %: acetonitrilo 6 %.

6. El proceso de acuerdo con una cualquiera de las reivindicaciones 1 a 5 en el que la etapa de conjugar el agente fotosensibilizador y la molécula vehículo se realiza a una temperatura de entre 0 ºC y 5 ºC.

7. El proceso de acuerdo con una cualquiera de las reivindicaciones 1 a 6 en el que la etapa de conjugar el agente fotosensibilizador y la molécula vehículo se realiza durante aproximadamente 30 minutos. 45

8. El proceso de acuerdo con las reivindicaciones 1-7 en el que la molécula vehículo es un scFv.

9. El proceso de acuerdo con una cualquiera de las reivindicaciones 1 a 8 en el que la molécula vehículo es

humanizada o humana. 50

10. El proceso de acuerdo con una cualquiera de las reivindicaciones 1 a 9 en el que el agente fotosensibilizador es un fotosensibilizador monofuncional.

11. El proceso de acuerdo con una cualquiera de las reivindicaciones 1 a 10 que comprende además la siguiente 55 etapa realizada después de la etapa (iii) :

(iv) acoplar un agente modulador con la molécula vehículo, en donde el agente modulador es capaz de modular la función del agente fotosensibilizador.

12. El proceso de acuerdo con la reivindicación 11 en el que el agente modulador se selecciona del grupo que consiste en: ácido benzoico; ácido benzoico que contiene un grupo azida; ácido 4-azidotetrafluorofenilbenzoico; ácido benzoico que contiene un grupo aromático que tiene un resto de azida; ácido benzoico que contiene un grupo heteroaromático que tiene un resto de azida; análogos de vitamina E; Trolox; butil hidroxil tolueno; propil galato; ácido desoxicólico; ácido ursadesoxicólico.

13. El proceso de acuerdo con la reivindicación 12 en el que el grupo aromático o el grupo heteroaromático se seleccionan del grupo que consiste en: polifluorobencenos, naftalinas, naftaquinonas, antracenos, antraquinonas, fenantrenos, tetracenos, naftacendionas, piridinas, quinolinas, isoquinolinas, indoles, isoindoles, pirroles, imidazoles, pirazoles, pirazinas, bencimidazoles, benzofuranos, dibenzofuranos, carbazoles, acridinas, acridonas y fenantridinas, xantinas, xantonas, flavonas, cumarinas y sulfenatos de los mismos.

14. El proceso de acuerdo con una cualquiera de las reivindicaciones 1 a 13 que comprende además la siguiente etapa realizada después de las etapas (iii) o (iv) :

(v) combinar el compuesto con un vehículo farmacéuticamente aceptable para formar una formulación farmacéutica.

15. El proceso de acuerdo con una cualquiera de las reivindicaciones 1 a 14 en el que la distancia entre los agentes fotosensibilizadores acoplados con la molécula vehículo es entre 3, 5 ángstrom y 25 ángstrom.

16. El proceso de acuerdo con la reivindicación 15 en el que la distancia entre los agentes fotosensibilizadores acoplados con la molécula vehículo es entre 20 y 25 ángstrom.

17. El proceso de acuerdo con una cualquiera de las reivindicaciones 1 a 16 que comprende además la siguiente etapa realizada antes de la etapa (v) de

(vi) acoplar un agente de visualización con la molécula vehículo, agente fotosensibilizador o conjugado de los mismos.

18. El proceso de acuerdo con la reivindicación 17 en el que el agente de visualización es un colorante fluorescente

o luminiscente.

19. Un compuesto que comprende un agente fotosensibilizador acoplado con una molécula vehículo en un resto de aminoácido de la molécula vehículo que puede obtenerse por el proceso de una cualquiera de las reivindicaciones 1 a 18, en el que la molécula vehículo se selecciona de scFv, fragmentos Fab y/o anticuerpos de dominio; y en el que se acoplan agentes fotosensibilizadores en restos de aminoácidos de la molécula vehículo que están preferentemente a dos aminoácidos de distancia (3, 5 a 7, 5 ángstrom) , más preferentemente a tres aminoácidos de distancia (9 a 12 ángstrom) , más preferentemente a cuatro aminoácidos de distancia (10-15 ángstrom) , aún más preferentemente a cinco aminoácidos de distancia (15-20 ángstrom) , todavía más preferentemente a seis aminoácidos de distancia (20-25 ángstrom) ; en el que el resto de aminoácido se selecciona del grupo que consiste en: lisina, cisteína; tirosina; serina; glutamato, aspartato y arginina.

20. Un compuesto que comprende un agente fotosensibilizador acoplado con una molécula vehículo en un resto de aminoácido de la molécula vehículo con una relación de acoplamiento mínima de 3:1 en el que la molécula vehículo se une de forma selectiva con una célula diana, en el que la molécula vehículo se selecciona de scFv, fragmentos Fab y/o anticuerpos de dominio; y en el que se acoplan agentes fotosensibilizadores en la molécula vehículo en restos de aminoácidos que están preferentemente a dos aminoácidos de distancia (3, 5 a 7, 5 ángstrom) , más preferentemente a tres aminoácidos de distancia (9 a 12 ángstrom) , más preferentemente a cuatro aminoácidos de distancia (10-15 ángstrom) , aún más preferentemente a cinco aminoácidos de distancia (15-20 ángstrom) , todavía más preferentemente a seis aminoácidos de distancia (20-25 ángstrom) ; en el que el resto de aminoácido se selecciona del grupo que consiste en: lisina, cisteína; tirosina; serina; glutamato, aspartato y arginina.

21. El compuesto de acuerdo con las reivindicaciones 19 o 20 en el que las propiedades físicas y funcionales del agente fotosensibilizador y de la molécula vehículo están sustancialmente inalteradas en la forma acoplada en comparación con las propiedades cuando están en una forma desacoplada.

22. El compuesto de acuerdo con cualquiera de las reivindicaciones 19 a 21 en el que la molécula vehículo es un scFv.

23. El compuesto de acuerdo con una cualquiera de las reivindicaciones 19 a 22 en el que la molécula vehículo es humanizada o humana.

24. El compuesto de acuerdo con una cualquiera de las reivindicaciones 19 a 23 en el que el agente fotosensibilizador es un fotosensibilizador monofuncional.

25. El compuesto de acuerdo con la reivindicación 24 en el que el agente fotosensibilizador es al menos uno seleccionado del grupo que consiste en: hematoporfirinas, porfirinas de origen natural; clorinas de origen natural; bacterioclorinas de origen natural; feoforbidas; pirofeoforbida a; fotocloro, clorinas; clorina e6; mono-L-aspartil clorina e6, di-L-aspartil clorina e6; clorina de estaño (IV) e6; bacterioclorofilas de paladio; bacteriofeoforbida de paladio; clorinas sintéticas; bacterioclorinas sintéticas; metatetrahidroxifenil clorina y bacterioclorina; benzoporfirina; monobenzoporfirina; verteporfina; ftalocianinas; ftalocianinas de aluminio sulfonadas (disulfonadas y

tetrasulfonadas) ; naftalocianinas de aluminio sulfonadas; purpurinas; purpurina-18; octaetilpurpurina de estaño y cinc; etiopurpurina de estaño; verdinas; porficenos; porfirinas sintéticas; clorinas sintéticas; bacterioclorinas sintéticas; mesotrietinilporfirinas sin metales; mesotrietinilporfirinas metalizadas; porfirinas de núcleo modificado; porfirinas expandidas (texafirinas) ; motexafina de lutecio; motexafina de gadolinio; fenotiazinio; azul de metileno;

azul de toluidina; cianinas; merocianina 540; colorantes de acridina; colorantes de BODIPY; aza-BODIPY; hipericina; colorantes de escuarina halogenada; colorantes de xanteno halogenado; eosina; rosa Bengala.

26. El compuesto de acuerdo con las reivindicaciones 19 a 25 en el que la distancia entre agentes fotosensibilizadores acoplados con la molécula vehículo es de seis aminoácidos (20-25 ángstrom) . 10

27. El compuesto de acuerdo con una cualquiera de las reivindicaciones 19 a 26 que comprende además un agente modulador capaz de modular la función del agente fotosensibilizador para aumentar la producción de oxígeno singlete y especies de oxígeno reactivas.

28. El compuesto de acuerdo con la reivindicación 27 en el que el agente modulador se selecciona del grupo que consiste en: ácido benzoico; ácido benzoico que contiene un grupo azida; ácido 4-azidotetrafluorofenilbenzoico; ácido benzoico que contiene un grupo aromático que tiene un resto de azida; ácido benzoico que contiene un grupo heteroaromático que tiene un resto de azida; análogos de vitamina E; Trolox; butil hidroxil tolueno; propil galato; ácido desoxicólico; ácido ursadesoxicólico.

29. El compuesto de acuerdo con la reivindicación 28 en el que el grupo aromático o el grupo heteroaromático se seleccionan del grupo que consiste en: polifluorobencenos, naftalinas, naftaquinonas, antracenos, antraquinonas, fenantrenos, tetracenos, naftacendionas, piridinas, quinolinas, isoquinolinas, indoles, isoindoles, pirroles, imidazoles, pirazoles, pirazinas, bencimidazoles, benzofuranos, dibenzofuranos, carbazoles, acridinas, acridonas y fenantridinas,

xantinas, xantonas, flavonas, cumarinas y sulfenatos de los mismos.

30. El compuesto de acuerdo con una cualquiera de las reivindicaciones 19 a 29 comprende además un agente de visualización.

31. El compuesto de acuerdo con la reivindicación 30 en el que el agente de visualización es un colorante fluorescente o luminiscente.

32. El compuesto de acuerdo con una cualquiera de las reivindicaciones 19 a 31 en el que la molécula vehículo es un scFv y el agente fotosensibilizador es pirofeoforbida a. 35

33. El compuesto de acuerdo con una cualquiera de las reivindicaciones 19 a 31 en el que la molécula vehículo es un scFv y el agente fotosensibilizador es un monoácido de benzoporfirina (verteporfina)

34. El compuesto de acuerdo con una cualquiera de las reivindicaciones 19 a 31 en el que la molécula vehículo es 40 un scFv y el agente fotosensibilizador es bacteriofeoforbida de paladio.

35. El compuesto de acuerdo con una cualquiera de las reivindicaciones 19 a 31 en el que la molécula vehículo es un scFv y el agente fotosensibilizador es un derivado de mono-L-aspartilo de clorina e6.

36. El compuesto de acuerdo con una cualquiera de las reivindicaciones 19 a 31 en el que la molécula vehículo es un scFv y el agente fotosensibilizador es meta tetrahidroxifenil clorina.

37. El compuesto de acuerdo con una cualquiera de las reivindicaciones 19 a 31 en el que la molécula vehículo es un scFv y el agente fotosensibilizador es etiopurpurina de estaño (rostaporfina) . 50

38. Uso del compuesto como se ha definido en una cualquiera de las reivindicaciones 19 a 37 en la fabricación de un medicamento para el diagnóstico de una enfermedad que requiere la destrucción de una célula diana.

Uso del compuesto como se ha definido en una cualquiera de las reivindicaciones 19 a 37 en la fabricación de un 55 medicamento para el tratamiento y/o la prevención de una enfermedad que requiere la destrucción de una célula diana.

40. El uso de acuerdo con las reivindicaciones 38 o 39 en el que la enfermedad para tratar se selecciona del grupo que consiste en: cáncer; degeneración macular relacionada con la edad; trastornos inmunitarios; enfermedad

cardiovascular; e infecciones microbianas incluyendo infecciones virales, bacterianas o fúngicas, enfermedades priónicas tales como BSE y enfermedades orales/dentales tales como gingivitis.

41. El uso de acuerdo con la reivindicación 40 en el la enfermedad para tratar es cáncer de colon, pulmón, mama,

cabeza y cuello, próstata, piel, estómago/gastrointestinal, vejiga y lesiones precancerosas tales como esófago de 65 Barrett.

42. El uso de acuerdo con una cualquiera de las reivindicaciones 38 a 41 en el que el diagnóstico de la enfermedad se realiza por visualización del agente fotosensibilizador o un agente de visualización opcional.

43. El uso de acuerdo con una cualquiera de las reivindicaciones 38 a 42 en el que el compuesto se administra a un paciente antes de la exposición a la luz.

44. Una composición farmacéutica que comprende el compuesto de una cualquiera de las reivindicaciones 19 a 37 y un vehículo, excipiente o diluyente farmacéuticamente aceptables.