Composiciones que comprenden anticuerpos contra CD79b conjugados a un agente inhibidor del crecimiento o un agente citotóxico y procedimientos para el tratamiento de tumores de origen hematopoyético.

Anticuerpo que se une a un polipéptido que tiene la secuencia de aminoácidos de la figura 10,

con o sin su péptido señal asociado, para utilizar en un método de tratamiento del linfoma folicular, el linfoma de células de manto o el linfoma difuso de células grandes, en el que dicho anticuerpo está conjugado a un agente inhibidor del crecimiento o un agente citotóxico y está internalizado por una célula del linfoma folicular, una célula del linfoma de células de manto o una célula del linfoma difuso de células grandes que expresan dicho polipéptido e inhibe el crecimiento de las mismas.

Composiciones que comprenden anticuerpos contra CD79b conjugados a un agente inhibidor del crecimiento o un agente citotóxico y procedimientos para el tratamiento de tumores de origen hematopoyético CAMPO DE LA INVENCiÓN

La presente invención se refiere a composiciones de materia para su uso en el tratamiento de linfoma folicular, linfoma de células de manto o linfoma difuso de células 9randes.

ANTECEDENTES DE LA INVENCiÓN

Los tumores malignos (cáncer) son la segunda causa de muerte en los Estados Unidos, después de las enfermedades del corazón (Boring et al. , CA Cancer J Clin., 43:7 [ (1993]) . El cáncer se caracteriza por el incremento en el número de células anormales, o neoplásicas, derivadas de un tejido normal que proliferan para formar una masa tumoral, la invasión de tejidos adyacentes por estas células tumorales neoplásicas, y la generación de células malignas que finalmente se extienden a través de la sangre o el sistema linfático hasta nódulos linfáticos regionales y hasta puntos distantes a través de un proceso denominado metástasis. En un estado canceroso, una célula prolifera bajo condiciones en las que no crecerían células normales. El cáncer se manifiesta en una gran variedad de formas, caracterizadas por diferentes grados de invasión y agresividad.

Los cánceres que implican células generadas durante la hematopoyesis, un proceso mediante el cual se generan elementos celulares de la sangre, tales como linfocitos, leucocitos, plaquetas, eritrocitos y células asesinas (~killers") naturales, se refieren como cánceres hematopoyéticos. Los linfocitos que se pueden encontrar en la sangre y el tejido linfático y que son críticos para la respuesta inmune se clasifican en dos clases principales de linfocitos: linfocitos B (células Bl y linfocitos T (células T) , que median en la inmunidad humoral y medida por células, respectivamente.

[0004J Las células B maduran en la médula ósea y dejan que la médula exprese un anticuerpo de unión a antígeno en su superficie celular. Cuando una célula B intacta encuentra primero el antígeno para el que su anticuerpo unido a membrana es especifico, la célula empieza a dividirse rápidamente y su progenie a diferenciarse en células B de memoria y células efectoras denominadas ~células plasmáticas". Las células B de memoria tienen una esperanza de vida más larga y continúan expresando el anticuerpo unido a membrana con la misma especificidad que la célula parenteral original. Las células plasmáticas no producen el anticuerpo unido a membrana, pero en cambio producen el anticuerpo en una forma que se puede secretar. Los anticuerpos secretados son la molécula efectora principal de la inmunidad humoral.

Las células T maduran en el timo que proporciona un ambiente para la proliferación y diferenciación de células T inmaduras. Durante la maduración de células T, las células T realizan el reajuste de genes que producen el receptor de células T y la selección positiva y negativa que ayuda a determinar el fenotipo de la superficie celular de la célula T madura. Los marcadores característicos de la superficie celular de células T maduras son el complejo CD3:receptor de célula T y uno de sus correceptores, CD4 o CD8.

En los intentos por descubrir dianas celulares eficaces para la terapia contra el cáncer, los investigadores han 45 buscado identificar polipéptidos transmembrana u otros polipéptidos asociados a membranas que se expresan especifica mente en la superficie de uno o más tipos particulares de células cancerosas en comparación con una o más células no cancerosas normales. A menudo, dichos polipéptidos asociados a membrana se expresan de manera más abundante en la superficie de las células cancerosas en comparación con la superficie de las células no cancerosas. La identificación de polipéptidos antígenos de la superficie celular asociados a tumores ha proporcionado la capacidad de reconocer especifica mente células cancerosas para la destrucción a través de terapias basadas en anticuerpos. En este aspecto, cabe indicar que la terapia basada en anticuerpos se ha demostrado muy eficaz en el tratamiento de ciertos tumores. Por ejemplo, HERCEPTIN® y RITUXAN® (ambas de Genentech Inc, South San Francisco, Califomia) son anticuerpos que se han utilizado satisfactoriamente para tratar el cáncer de mama y el linfoma de no Hodgkin, respectivamente. Más específicamente, HERCEPTIN® es un 55 anticuerpo monoclonal humanizado derivado de ADN recombinante que se une selectivamente al dominio extracelular del protooncogén del receptor 2 del factor de crecimiento epidérmico humano (HER2) . Se observa la sobreexpresión de la proteina HER2 en el 25-30% de cánceres de mama primarios. RITUXAN® es un anticuerpo monoclonal murinofhumano quimérico modificado genéticamente dirigido contra el antigeno CD20 hallado en la superficie de linfocitos B normales u malignos. Estos anticuerpos se producen recombinantemente en células CHO.

En otros intentos por descubrir dianas celulares eficaces para la terapia contra el cáncer, los investigadores han buscado identificar (1) polipéptidos no asociados a membrana que son producidos especificamente por uno o más tipos particulares de células cancerosas en comparación a por uno o más tipos particulares de células normales no cancerosas, (2) polipéptidos que son producidos por células cancerosas en un nivel de expresión que es 65 significativamente más elevado que el de una o más células normales no cancerosas, o (3) polipéptidos cuya expresión está limitada específicamente a sólo un tipo de tejido (o a un número muy limitado de diferentes tejidos)

tanto en estado canceroso como no canceroso (por ejemplo, tejido de próstata normal y de tumor de próstata) . Dichos polipéptidos pueden permanecer localizadas intracelularmente o se puede secretar por la célula cancerosa. Además, dichos polipéptidos pueden expresarse no por la propia célula cancerosa, sino por células que producen y/o secretan polipéptidos que tienen u n efecto potenciador o un efecto de aumento del crecimiento en células cancerosas. Dichos polipéptidos secretados son a menudo proteinas que proporcionan células cancerosas con una ventaja de crecimiento sobre las células normales e incluyen cosas, tales como factores angiogénicos, factores de adhesión celular, factores de crecimiento, y similares. Se esperaría que la identificación de antagonistas de dichos polipéptidos no asociados a membrana sirviera como agentes terapéuticos eficaces para el tratamiento de dichos cánceres. Además, la identificación del patrón de expresión de dichos polipéptidos seria útil para el diagnóstico de cánceres particulares en mamiferos.

A pesar de los avances identificados anteriormente en la terapia contra el cáncer en mamiferos, existe una gran necesidad de agentes terapéuticos adicionales capaces de detectar la presencia de tumores en un mamifero y para inhibir de manera eficaz el crecimiento de células neoplásicas, respectivamente. Por consiguiente, un objetivo de la presente solicitud es identificar polipéptidos, polipéptidos asociados a membrana, secretados o intracelulares, cuya expresión está limitada específicamente a un único tipo de tejido (o un número muy limitado de diferentes tipos de tejido) , tejidos hematopoyéticos, tanto en estado canceroso o no canceroso, y utilizar estos polipéptidos, y sus ácidos nucleicos codificantes, para producir composiciones de materia útiles en el tratamiento terapéutico para la detección de cáncer hematopoyético en mamiferos.

DESCRIPCiÓN RESUMIDA DE LA INVENCiÓN

A. Realizaciones [0009] En la presente memoria, los solicitantes describen por primera vez la identificación de varios polipéplidos celulares (y sus ácidos codificantes o fragmentos de los mismos) que son expresados específicamente tanto por células tumorales como normales de un tipo de célula especifico, por ejemplo, células generadas durante la hematopoyesis, es decir, linfocitos, leucocitos, eritrocitos y plaquetas. Todos los polipéptidos anteriores se refieren aqui como polipéptidos Antigenos tumorales de Origen Hematopoyético (polipéptidos ~TAHO") y se espera que sirvan como dianas eficaces para la terapia contra el cáncer en mamíferos.

Por consiguiente, la solicitud describe una molécula de ácido nucleico aislada que tiene una secuencia de nucleótidos que codifica un polipéptido antigeno tumoral de origen hematopoyético (un polipéptido "TAHO") o un fragmento del mismo.

En ciertos aspectos, la molécula de ácido nucleico aislada comprende una secuencia de nucleótidos que tiene por lo menos aproximadamente un 80% de identidad en la secuencia de ácidos nucleicos, altemativamente por lo menos... [Seguir leyendo]

1. Anticuerpo que se une a un polipéptido que tiene la secuencia de aminoácidos de la figura 10, con o sin su péptido señal asociado, para utilizar en un método de tratamiento del linfoma folicular, el linfoma de células de manto o el linfoma difuso de células grandes, en el que dicho anticuerpo está conjugado a un agente inhibidor del crecimiento o un agente citotóxico y está internalizado por una célula del linfoma folicular, una célula del linfoma de células de manto o una célula del linfoma difuso de células grandes que expresan dicho polipéptido e inhibe el crecimiento de las mismas.

2. Utilización de un anticuerpo que se une a un polipéptido que tiene la secuencia de aminoácidos de la figura 10, con o sin su péptido señal asociado, para la fabricación de un medicamento para el tratamiento dellinfoma folicular, ellinfoma de células de manto o el linfoma difuso de células grandes, en el que dicho anticuerpo está conjugado a un agente inhibidor del crecimiento o un agente citotóxico y está intemalizado por una célula del linfoma folicular, una célula del linfoma de células de manto o una célula del linfoma difuso de células grandes que expresan dicho polipéptido e inh ibe el crecimiento de las mismas.

3. Anticuerpo para utilizar, según la reivindicación 1, o la utilización, según la reivindicación 2, en los que el anticuerpo está conjugado al agente inhibidor del crecimiento o al agente citotóxico a través de un enlazador.

4. Utilización, o anticuerpo para utilizar, según la reivindicación 3, en los que el enlazador es un enlazador sensible a peptidasa.

5. Utilización, o anticuerpo para utilizar, según cualquiera de las reivindicaciones anteriores, en los que dicho anticuerpo es un anticuerpo monoclonal, o es un fragmento de anticuerpo, o es un anticuerpo quimérico o un anticuerpo humanizado.

6. Utilización, o anticuerpo para utilizar, según cualquiera de las reivind icaciones anteriores, en los que el anticuerpo está conjugado a un agente inhibidor del crecimiento.

7. Utilización, o anticuerpo para utilizar, segun cualquiera de las reivindicaciones anteriores, en los que el anticuerpo está conjugado a un agente citotóxico.

8. Utilización, o anticuerpo para utilizar, según la reivindicación 7, en los que el agente citotóxico se selecciona del grupo que consiste en toxinas, antibióticos, isótopos radioactivos y enzimas nuc!eolíticas.

9. Utilización, o anticuerpo para utilizar, según la reivindicación 8, en los que la toxina se selecciona del grupo que consiste en monometilauristatina (MMAE) , maitansinoide y caliqueamicina.

10. Utilización, o anticuerpo para utilizar, según cualquiera de las reivindicaciones 1 a 9, en los que el anticuerpo es producido en bacterias o es producido por células CHO.

11. Utilización, o anticuerpo para utilizar. según cualquiera de las reivindicaciones anteriores. en los que dicho tratamiento comprende además exponer dicha célula a tratamiento con radiación o a un agente quimioterapéutico.

12. Utilización, o anticuerpo para utilizar, según cualquiera de las reivindicaciones anteriores, en los que el tratamiento causa la muerte de la célula dellinfoma folicular, la célula del linfoma de células de manto o la célula del linfoma difuso de células grandes.

13. Utilización, o anticuerpo para utilizar, según cualquiera de las reivindicaciones anteriores, en los que la proteína tiene la secuencia de aminoácidos mostrada en la figura 10, con o sin su secuencia señal.

14. Utilización, o anticuerpo para utilizar, segun la reivindicación 3, en los que el anticuerpo está conjugado a un maitansinoide y en los que el enlazador se selecciona del grupo que consiste en sulfosuccinimidil maleimidometil ciclohexano carboxilato (SMCC) y N-succinimidil-4- (2-piridiltio) pentanoato (SPP) .

15. Utilización, o anticuerpo para utilizar, según la reivindicación 14, en los que el enlazador es SMCC.

16. Utilización, o anticuerpo para utilizar, según la reivindicación 14, en los que el enlazador es SPP.

17. Utilización, o anticuerpo para utilizar, según la reivindicación 4, en los que el anticuerpo está conjugado a un maitansinoide y en los que el enlazador sensible a peptidasa comprende un enlazador dipéptido valina-citrulina (ve) que tiene un componente maleimida y un componente autoinmolador para-aminobencilcarbamoilo (PAS) (MC-vcPAB) .

18. Utilización, o anticuerpo para utilizar, según la reivindicación 3, en los que el anticuerpo está conjugado a monometilauristatina (MMAE) a través de vc-PAB.