Análogos truncados de un polipéptido insulinotrópico dependiente de glucosa.

Un compuesto de fórmula (I),**Fórmula**

en la que:

A1 está delecionado;

A2 es Ala, 4Hppa, o está delecionado;

A3 es Glu, 4Hyp, Pro, o está delecionado;

A4 es Gly, o está delecionado;

A5 es Thr, o está delecionado;

A6 is Phe, o está delecionado;

A7 es A5c o A6c;

A8 es Ser o Chc-Ser;

A9 es Asp;

A10 es Tyr;

A11 es Ser, A6c o Aib;

A12 es Ile;

A13 es Ala o Aib;

A14 es Met, A6c, o Nle;

A15 es Asp;

A16 es Lys;

A17 es Ile;

A18 es His;

A19 es Gln;

A20 es Gln;

A21 es Asp;

A22 es Phe;

A23 es Val;

A24 es Asn;

A21 es Trp;

A26 es Leu;

A27 es Leu;

A28 es Ala;

A29 es Gln;

A30 es Lys;

A31 es Gly, Cys(Hsu), Cys(Psu), 2Nal, D-2Nal, Orn(N-C(O)-(CH2)4-CH3), Orn(N-C(O)-(CH2)8-CH3), Orn(N-C(O)- (CH2)12-CH3), o está delecionado;

A32 es Lys, Cys(Psu), o está delecionado;

A33 es Lys, Cys(Psu), o está delecionado;

A34 es Asn, Cys(Psu), Orn(N-C(O)-(CH2)8-CH3), o está delecionado;

A35 es Asp, Cys(Psu), o está delecionado;

A36 es Trp, Cys(Psu), o está delecionado;

A37 es Lys, Cys(Psu), o está delecionado;

A38 es His, Cys(Psu), o está delecionado;

A39 es Asn, Cys(Psu), o está delecionado;

A40 es Ile, Cys(Psu), o está delecionado;

A41 es Thr, o está delecionado;

A42 es Gln, o está delecionado;

A43 es Gln, o está delecionado;

R1 es OH o NH2;

cada uno de R2 y R3 se selecciona independientemente del grupo que consiste en H o acilo(C1-C30); con la condición de que cuando R2 es acilo(C1-C30), entonces R3 es H; y

con la condición de que cuando A2 es 4Hppa, entonces R2 y R3 están delecionados; y

con la condición de que al menos uno de A2, A3, A4, A5, A6, A8, A9, A11, A13, A14, A31, A32, A33, A34, A35, A36, A37, A38, A39 y A40 no es el resto aminoácido de la correspondiente posición del GIP nativo;

o su sal farmacéuticamente aceptable.

Análogos truncados de un polipéptido insulinotrópico dependiente de glucosa Campo de la invención

La presente Invención se refiere al área de los nuevos análagos de compuestos insulinotrópicos dependientes de glucosa, a composiciones farmacéuticas que contienen dichos compuestos, y al uso de dichos compuestos como agonistas o antagonistas del receptor de GIP para el tratamiento de trastornos mediados por el receptor de GIP, tales como la diabetes mellitus no insulinodependiente y la obesidad.

Antecedentes de la técnica

El polipéptido insulinotrópico dependiente de glucosa ("GIP", también conocido como "polipéptido inhibidor gástrico") es un péptido de 42 restos segregado por las células K enteroendocrinas del intestino delgado hacia la corriente sanguínea en respuesta a la ingestión oral de nutrientes. El GIP inhibe la secreción del ácido gástrico, y se ha demostrado que es un potente estimulante para la secreción de insulina desde las células beta pancreáticas después de la ingestión oral de glucosa (el "efecto incretina") (Creutzfeldt, W., et al., 1979, Diabetologia, 16:75-85).

La liberación de insulina inducida por la ingestión de glucosa y otros nutrientes es debida a factores hormonales y neurales (Creutzfeldt, W., et al., 1985, Diabetologia, 28:565-573). Varios péptidos reguladores gastrointestinales han sido propuestos como incretinas, y entre estos candidatos, solo GIP y el péptido 1 similar al glucagón 1 ("GLP-1") parecen cumplir los requisitos de ser considerados estimulantes fisiológicos de la liberación de insulina postprandial (Nauck, et al., 1989, J. Clin. Endocrinol. Metab., 69:654-662). Se ha demostrado que los efectos combinados de GIP y GLP-1 son suficientes para explicar el efecto total de la incretina del eje enteroinsular (Fehmann, H. C., et al., 1989, FEBS Lett., 252:19-112).

Tal como saben los expertos en la técnica, los usos conocidos y potenciales del GIP son variados y múltiples. Así, la administración de los compuestos de esta invención para inducir un efecto agonista puede tener el mismo efecto y uso que el propio GIP. Estos usos variados del GIP pueden resumirse como sigue: tratar una enfermedad seleccionada del grupo que consiste en diabetes de tipo 1 , diabetes de tipo 2 (Visboll, T., 24, Dan. Med. Bull., 51:364-7), resistencia a la insulina (documento WO 25/82928), obesidad (Green, B. D., et al., 24, Current Pharmaceutical Design, 1:3651-3662), trastorno metabólico (Gault, V. A., et al., 23, Biochem. Biophys. Res. Commun., 38:27-213), enfermedad del sistema nervioso central , enfermedad neurodegenerativa, insuficiencia cardíaca congestiva, hipoglucemia, y trastornos en los que se desea la reducción de la ingesta de alimento y la pérdida de peso. En los islotes pancreáticos, el GIP no solo potencia intensamente la secreción de insulina, sino que también estimula la producción de insulina a través de la potenciación de la transcripción y la traducción de proinsulina (Wang, et al., 1996, Mol. Cell. Endocrinol., 116:81-87) y potencia el crecimiento y la supervivencia de las células beta pancreáticas (Trumper, et al., 23, Diabetes, 52:741-75). Además de los efectos sobre el páncreas para potenciar la secreción de insulina, el GIP también tiene efectos sobre los tejidos diana de la insulina directamente para disminuir la glucosa plasmática: la potenciación de la captación de glucosa en tejido adiposo (Eckel, et al., 1979, Diabetes, 28:1141-1142) y el músculo (O'Harte, et al., 1998, J. Endocrinol., 156:237-243), y la inhibición de la producción de glucosa hepática (Elahi, D., et al., 1986, Can. J. Physiol. Pharmacol., 65:A18).

Además, un antagonista del receptor de GIP según la presente invención inhibe, bloquea o reduce la absorción de glucosa desde el intestino de un animal. Según esta observación, pueden emplearse composiciones terapéuticas que contengan antagonistas de GIP en pacientes con diabetes mellitus no insulinodependientes para mejorar la tolerancia a la glucosa oral en mamíferos, tales como seres humanos, para prevenir, inhibir o reducir la obesidad inhibiendo, bloqueando o reduciendo la absorción de glucosa desde el intestino del mamífero.

Sin embargo, el uso de GIP no modificado como producto terapéutico es limitado debido a la corta semivida in vivo de aproximadamente 2 minutos (Said y Mutt, 197, Science, 169:1217-1218). En suero, ambas incretinas, GIP y GLP-1, son degradadas por la dipeptidil peptidasa IV ("DPPIV"). La mejora en la estabilidad de GIP frente a la proteolisis no solo mantiene la actividad de GIP en su receptor sino que, de modo más importante, evita la producción de fragmentos de GIP, algunos de los cuales actúan como antagonistas del receptor de GIP (Gault, et al., 22, J. Endocrinol., 175:525-533). Las modificaciones indicadas han incluido la protección del N-terminal de GIP frente a la proteolisis por DPPIV a través de la modificación de la tirosina N-terminal (O'Harte, et al., 22, Diabetologia, 45:1281-1291), la mutación de la alanina alanine en la posición 2 (Hinke, et al., 22, Diabetes, 51:656-661), la mutación del ácido glutámico en la posición 3 (Gault, et al., 23, Biochem. Biophys. Res. Commun., 38:27-213), y la mutación de la alanina en la posición 13 (Gault, et al., 23, Cell Biol. International, 27:41-46),

El documento WO 24/1339 A2 se refiere a composiciones de análogos peptídicos y polipeptídicos que son resistentes a la proteolisis.

El documento US 28/182795 A1 se refiere a un antagonista específico del polipéptido insulinotrópico dependiente de glucosa (GIP), que consiste fundamentalmente en un polipéptido de 24 aminoácidos que se corresponden con las posiciones 7-3 de la secuencia de GIP según se describe en el documento, así como los usos del antagonista.

El documento US 27/16737 A1 se refiere a análogos peptídicos que son antagonistas del péptido inhibidor gástrico (GIP), y sus usos.

Las siguientes solicitudes de patente que se han presentado se refieren a los efectos de análogos de GIP sobre la función de diversos órganos diana y su uso potencial como agentes terapéuticos:

La publicación PCT WO /5836 describe análogos de peptidilo de GIP que estimulan la liberación de insulina. En particular, esta solicitud describe análogos de peptidilo específicos que comprenden al menos 15 restos aminoácidos desde el extremo N-terminal de GIP(1-42), por ejemplo, un análogo de GIP que contiene exactamente una sustitución o una modificación de un aminoácido en las posiciones 1, 2 y 3, tal como [Pro3]GIP(1-42).

La publicación PCT WO 98/24464 describe un antagonista de GIP que consiste fundamentalmente en un polipéptido de 24 aminoácidos que se corresponden con las posiciones 7-3 de la secuencia de GIP, un método para tratar la diabetes mellitus no insulinodependiente, y un método para mejorar la tolerancia a la glucosa en un paciente con diabetes mellitus no insulinodependiente.

La publicación PCT WO 3/82898 escribe fragmentos truncados C-terminales y análogos modificados en el N- terminal de GIP, así como diversos análogos de GIP con un enlace peptídico reducido o alteraciones en los aminoácidos cercanos al sitio de ruptura específico de DPPIV. Esta solicitud también describe análogos con diferentes conectares entre los sitios del unión al receptor potenciales de GIP. Se afirma que los compuestos de esta solicitud son útiles para tratar trastornos mediados por el receptor de GIP, tales como la diabetes mellitus no insulinodependiente y la obesidad.

Existe una necesidad de mejores análogos de GIP, que sean estables en una formulación y tengan una semivida plasmática larga in vivo que surge de una menor susceptibilidad a la proteolisis y una menor eliminación, al mismo tiempo que mantienen la afinidad de unión con un receptor de GIP para provocar los respectivos efectos agonistas o antagonistas. Además, entre otros efectos terapéuticos de los compuestos de la presente invención, tal como se ilustran en la presente, un control más estricto de los niveles de glucosa plasmática puede evitar complicaciones diabéticas a largo plazo, proporcionando con ello una mejor calidad de vida a los pacientes.

Sumario de la invención

En un aspecto, la invención se refiere a variantes peptídicos de GIP con la siguiente fórmula (I):

(R2R3)-A1-A2-A3-A4-A5-A6-A7-A8-A9-A1-A11-A12-A13-A14-A15-A16-A17-A18-A19-A2-A21-A22-A23-A24-A25-

a26-a27-a28-a29-a3Í)-a31-a32-a33-a34-a35-a36-a37-a38-a39-a4-a41-a42-a43-r1,(I)

en la que:

A1 está delecionado;

A2 es Ala, 4Hppa, o está delecionado;

A3 es Glu, 4Hyp, Pro, o está delecionado;

A4 es Gly, o está delecionado;

A5 es Thr, o está delecionado;

A6 is Phe, o está delecionado;

A7 es A5c o A6c;

1.- Un compuesto de fórmula (I),

en la que:

A1 está delecionado;

A2 es Ala, 4Hppa, o está delecionado;

A3 es Glu, 4Hyp, Pro, o está delecionado; A4 es Gly, o está delecionado;

A5 es Thr, o está delecionado;

A6 is Phe, o está delecionado;

A7 es A5c o A6c;

A8 es Ser o Chc-Ser;

A es Asp;

A1 es Tyr;

A11 es Ser, A6c o Aib;

A12 es Ile;

A13 es Ala o Aib;

A14 es Met, A6c, o Nle;

A15 es Asp; A16 es Lys;

A17 es Ile;

A18 es His;

A19 es Gln

A2 es Gln

A21 es Asp

A22 es Phe

A23 es Val;

A24 es Asn;

A21 es Trp;

A26 es Leu; A27 es Leu;

A28 es Ala;

A29 es Gln;

A3 es Lys;

A31 es Gly, Cys(Hsu), Cys(Psu), 2Nal, D-2Nal, rn(N-C()-(CH2)4-CH3), rn(N-C()-(CH2)8-CH3), m(N-C() (CH2)12-CH3), o está delecionado;

A32 es Lys, Cys(Psu), o está delecionado;

A33 es Lys, Cys(Psu), o está delecionado;

A34 es Asn, Cys(Psu), rn(N-C()-(CH2)8-CH3), o está delecionado;

A35 es Asp, Cys(Psu), o está delecionado;

A36 es Trp, Cys(Psu), o está delecionado;

A37 es Lys, Cys(Psu), o está delecionado;

A38 es His, Cys(Psu), o está delecionado;

A39 es Asn, Cys(Psu), o está delecionado;

A4 es lie, Cys(Psu), o está delecionado;

A41 es Thr, o está delecionado;

A42 es Gln, o está delecionado;

A43 es Gln, o está delecionado;

R1 es OH o NH2;

v con la condición

cada uno de R2 y R3 se selecciona independientemente del grupo que consiste en H o acilo(Ci-U3o;, de que cuando R2 es acilo(Ci-C3o), entonces R3 es H; y

con la condición de que cuando A2 es 4Hppa, entonces R2 y R3 están delecionados; y 38

, , , -j A2.3.4.5 a 6 A 8.9.11 «13.14.31.32.33 A34 A35, A ,A ,A ,

con la condición de que al menos uno de A,A,A,A,A,A,A,A ,A ,A ,A ,A ,A , ^ <

A39 y A4 no es el resto aminoácido de la correspondiente posición del GIP nativo;

o su sal farmacéuticamente aceptable.

2.- Un compuesto según la reivindicación 1, en el que dicho compuesto es:

(Ac-A6c7, Gln43)hGIP(7-43)-OH (SEQ ID NO:29);

(Ac-A6c7)hGIP(7-42)-OH (SEQ ID NO:4);

[Ac-A6c7, Cys(Psu)4]hGIP(7-42)-OH (SEQ ID NO:5);

[Ac-A6c7, Cys(Psu)39]hGIP(7-42)-OH (SEQ ID NO:6);

[Ac-A6c7, Cys(Psu)38]hGIP(7-42)-OH (SEQ ID NO:7);

[Ac-A6c7, Cys(Psu)36]hGIP(7-42)-OH (SEQ ID NO:8);

[Ac-A6c7, Cys(Psu)35]hGIP(7-42)-OH (SEQ ID NO:9);

[Ac-A6c7, Cys(Psu)34]hGIP(7-42)-OH (SEQ ID NO: 1);

[Ac-A6c7, Cys(Psu)33]hGIP(7-42)-OH (SEQ ID NO: 11);

[Ac-A6c7, Cys(Psu)32]hGIP(7-42)-OH (SEQ ID NO: 12);

[Ac-A6c7, Cys(Psu)31]hGIP(7-42)-OH (SEQ ID NO: 13);

[Ac-A6c7, Cys(Psu)37]hGIP(7-42)-OH (SEQ ID NO: 14);

[Ac-A6c7, rn31(N-C()-(CH2)i2-CH3)]hGIP(7-42)-H (SEQ ID NO:15);

[Ac-A6c7, rn31(N-C()-(CH2)8-CH3)]hGIP(7-42)-H (SEQ ID NO:16);

[A6c7, Orn31(N-C()-(CH2)8-CH3)]hGIP(7-42)-OH (SEQ ID NO:17); [CH3-(CH2)8-C()-A6c7, Orn31(N-C(OHCH2)8-CH3)]hGIP(7-42)-OH (SEQ ID NO:18);

[Ac-A6c7, Orn31(N-C(O)-(CH2)4-CHa)]hGIP(7-42)-OH (SEQ ID NO:19);

[A6c7, Orn31(N-C(O)-(CH2)4-CH3)]hGIP(7-42)-OH (SEQ ID NO:2); [CH3-(CH2)4-C(O)-A6c7, Orn31(N-C(O)-(CH2)4-CH3)]hGIP(7-42)-OH (SEQ ID NO:21); [Ac-A6c7, Orn34(N-C(O)-(CH2)a-CH3)]hGIP(7-42)-OH (SEQ ID NO:22);

[A6c7, Orn34(N-C(O)-(CH2)a-CH3)]hGIP(7-42)-OH (SEQ ID NO:23); [CH3-(CH2)8-C(O)-A6c7, Orn34(N-C(O)-(CH2)8-CH3)]hGIP(7-42)-OH (SEQ ID NO:24); [Ac-A6c7, Cys(Hsu)31]hGIP(7-42)-OH (SEQ ID NO:25);

[A6c7, Cys(Hsu)31]hGIP(7-42)-OH (SEQ ID NO:26);

(Ac-A6c7, 2Nal31)hGIP(7-42)-OH (SEQ ID NO:27);

(Ac-A6c7, D-2Nal31)hGIP(7-42)-OH;

(Ac-4Hyp3, A6c7)hGIP(3-42)-OH (SEQ ID NO:28);

[Ac-A6c7, Cys(Psu)31]hGIP(7-34)-NH2 (SEQ ID NO:3);

[Ac-A6c7, Cys(Psu)31]hGIP(7-31)-NH2 (SEQ ID NO:31);

[Ac-Phe6, A6c7, Cys(Psu)31]hGIP(6-42)-OH (SEQ ID NO:32);

[A6c7, Cys(Psu)31]hGIP(6-42)-OH (SEQ ID NO:33);

(Ac-Phe6, A6c7)hGIP(6-3)-NH2 (SEQ ID NO:34);

[Ac-Phe6, A6c7, Cys(Psu)31]hGIP(6-31)-NH2 (SEQ ID NO:35);

[A6c7, Cys(Psu)31]hGIP(6-31)-NH2 (SEQ ID NO:36);

(A5c7, Nle14)hGEP(6-3)-NH2 (SEQ ID NO:37);

(A6c7, Nle14)hGIP(6-3)-NH2 (SEQ ID NO:38); o (4Hppa2, 4Hyp3, A6c7)hGIP(2-42)-OH (SEQ ID NO:44); o su sal farmacéuticamente aceptable.

3.- Un compuesto según la reivindicación 1, en el que:

A2 está delecionado;

A3 está delecionado;

A4 está delecionado;

A5 está delecionado;

A6 está delecionado;

A7 es A5c o A6c;

A8 es Ser;

A9 es Asp;

A1 es Tyr;

A11 es Ser;

A12 es Ile;

A13 es Ala;

A14 es Met;

A31 es Gly, Cys(Hsu), Cys(Psu), 2Nal, D-2Nal, rn(N-C()-(CH2)4-CH3), rn(N-C()-(CH2)8-CH3), u rn(N-C()- (CH2)i2-CH3);

A32 es Lys o Cys(Psu);

A33 es Lys o Cys(Psu);

A34 es Asn, Cys(Psu), u rn(N-C()-(CH2)8-CH3);

A35 es Asp o Cys(Psu);

A36 es Trp o Cys(Psu);

A37 es Lys o Cys(Psu);

A38 es His o Cys(Psu);

A39 es Asn o Cys(Psu);

A4 es lie o Cys(Psu);

A41 es Thr;

A42 es Gln; y

A43 está delecionado;

o su sal farmacéuticamente aceptable.

4.- Un compuesto según la reivindicación 1, en el que A43 está delecionado; A2 es 4Hppa; y al menos uno de A3, A11, A13 y A14 no es el resto aminoácido de la correspondiente posición del GIP nativo; o su sal farmacéuticamente aceptable.

5.- Un compuesto según la reivindicación 1, en el que de A2 a A5 y de A31 a A43 están deleclonados; y al menos uno de A6, A11 y A14 no es el resto aminoácido de la correspondiente posición del GIP nativo; o su sal farmacéuticamente aceptable.

6.- Un compuesto según la reivindicación 1, en el que de A2 a A6 y A43 están delecionados; y al menos uno de A8 y A31 no es el resto aminoácido de la correspondiente posición del GIP nativo; o su sal farmacéuticamente aceptable.

7.- Un compuesto según la reivindicación 1, en el que de A2 a A5 y A43 están delecionados; y al menos uno de A6 y A31 no es el resto aminoácido de la correspondiente posición del GIP nativo; o su sal farmacéuticamente aceptable.

8.- Un compuesto según la reivindicación 1, en el que de A2 a A5 y de A32 a A43 están delecionados; y al menos uno de A6 y A3 no es el resto aminoácido de la correspondiente posición del GIP nativo; o su sal farmacéuticamente aceptable.

9.- Un compuesto según la reivindicación 1, en el que dicho compuesto es: (Ac-A6c7, Gln43)hGIP(7-43)-OH (SEQ ID NO:29); o su sal farmacéuticamente aceptable.

1.- Un compuesto según una cualquiera de las reivindicaciones 1-9, que comprende también un resto PEG unido covalentemente, o su sal farmacéuticamente aceptable, en el que dicho resto PEG se selecciona del grupo que consiste en 5K PEG, 1K PEG, 2K PEG, 3K PEG, 4K PEG, 5K PEG, y 6K PEG, para formar Cys(succinimida- N-5K PEG), Cys(succinimida-N-1K PEG), Cys(succinimida-N-2K PEG), Cys(succinimida-N-3K PEG), Cys(succinimida-N-4K PEG), Cys(succinimida-N-5K PEG), Cys(succinimida-N-6K PEG), o su sal farmacéuticamente aceptable.

11.- Una composición farmacéutica que comprende una cantidad eficaz de un compuesto de una cualquiera de las reivindicaciones 1-1. 12 * * * * * * *

12.- Un compuesto de una cualquiera de las reivindicaciones 1-1, o una composición farmacéutica de la

reivindicación 11, para su uso en el tratamiento de trastornos o enfermedades mediadas por la unión de GIP-

receptor en un sujeto, en el que dicho tratamiento comprende administrar dicho compuesto o composición al sujeto

en una cantidad terapéuticamente eficaz, y en el que dicho trastorno o enfermedad se selecciona del grupo que

consiste en diabetes de tipo 1, diabetes de tipo 2, obesidad, resistencia a la insulina, intolerancia a la glucosa,

hígado graso, glucagonomas, trastornos secretores de las vías respiratorias, trastornos metabólicos, artritis,

osteoporosis, enfermedad del sistema nervioso central, reestenosis, enfermedad neurodegenerativa, insuficiencia

renal, insuficiencia cardíaca congestiva, síndrome nefrótico, cirrosis, edema pulmonar e hipertensión.

13.- Un compuesto o una composición para su uso según la reivindicación 12, en el que dicho trastorno o enfermedad es la diabetes de tipo 2.

14.- Un compuesto según una cualquiera de las reivindicaciones 1-1, o una composición farmacéutica de la reivindicación 11, para su uso en el tratamiento de trastornos relacionados con la diabetes en un sujeto, en el que

dicho tratamiento comprende administrar dicho compuesto o composición al sujeto en una cantidad terapéuticamente eficaz, y en el que dicho trastorno relacionado con la diabetes se selecciona del grupo que consiste en hiperglucemia, hiperinsulinemia, tolerancia alterada a la glucosa, glucosa en ayunas alterada, dislipidemia, hipertrigliceridemia, y resistencia a la insulina.