Procedimiento in vitro para la diagnosis y la diagnosis precoz de enfermedades neurodegenerativas.

Procedimiento in vitro para la detección y la detección precoz,

para la determinación del grado de severidad ypara la valoración evolutiva y la prognosis de la demencia de Alzheimer (AD), de la demencia con corpúsculosde Lewy (DLB), de la demencia frontotemporal (FTD) o de distintas formas de demencia vascular (VD), en el queen la sangre de un paciente que padece de trastornos cognitivos determinables subjetiva u objetivamente y conayuda de un procedimiento de determinación inmunodiagnóstica se detecta un segmento central del péptido proatrialnatriurético(MR-proANP), y en el que sobre la base de la concentración medida se sacan conclusiones conrespecto a la existencia de una enfermedad neurodegenerativa o de una forma precoz de la misma típica de éstao bien con respecto a la evolución de la enfermedad y/o al éxito de los esfuerzos realizados para aliviarla oprevenirla.

Procedimiento in vitro para la diagnosis y la diagnosis precoz de enfermedades neurodegenerativas [0001] La presente invención se refiere a un nuevo procedimiento in vitro para la diagnosis y en particular para la diagnosis precoz de enfermedades neurodegenerativas, y en particular de enfermedades de demencia tales como la enfermedad de Alzheimer y sus precursores.

Dentro del marco de la presente invención el concepto de “diagnóstico” (o “diagnosis”) se utiliza además como concepto general para determinaciones médicas que, según el estado clínico del paciente al que se le efectúe la determinación, pueden estar basadas en distintos planteamientos y sirven para la detección y en el caso presente en particular también para la detección precoz, para la determinación del grado de severidad y para la valoración evolutiva, y también para la valoración evolutiva como acompañamiento a la terapia y para la prognosis de la futura evolución de una enfermedad. En el presente contexto tiene además particular importancia el hecho de que un diagnóstico puede ser también un diagnóstico negativo, en el que sobre la base de la no detectabilidad de una determinada característica típica de enfermedad, tal como p. ej. la no determinabilidad de un biomarcador asociado a la enfermedad en cuestión en una muestra de sangre de un paciente, se pone de manifiesto que es improbable la existencia de una determinada enfermedad.

Para el diagnóstico negativo son también de gran valor biomarcadores que pueden encontrarse incrementados en varias distintas enfermedades y por consiguiente aún no permiten en solitario y por sí solos diagnóstico positivo alguno de una enfermedad específica, si bien por regla general y cuando se añaden adicionales parámetros clínicos o bioquímicos pueden también ser decisivos para el diagnóstico positivo.

Las enfermedades de cuya diagnosis se ocupa la presente invención son enfermedades neurodegenerativas crónicas de etiología no infecciosa que evolucionan más bien lentamente, y son en particular enfermedades de demencia presenil.

Se califican de enfermedades de demencia (dementia) en general las enfermedades para las que una característica común es la pérdida de capacidades intelectuales adquiridas, y ante todo de la memoria y del nivel de personalidad normal como consecuencia de lesiones cerebrales. Las enfermedades de demencia son enfermedades de carácter crónico que por regla general evolucionan con relativa lentitud. Si surgen fenómenos de demencia en la mediana edad y antes de la edad avanzada, se les califica de enfermedades de demencia presenil, y entre las mismas se distinguen sobre la base de los síntomas y de las modificaciones cerebrales patológicas que se dan típicamente para las mismas en particular las siguientes enfermedades, o mejor dicho los siguientes grupos de enfermedades:

La demencia de Alzheimer (AD) (enfermedad de Alzheimer; Morbus Alzheimer) es la enfermedad de demencia neurodegenerativa más frecuente, constituye los 2/3 de todos los casos de demencia y representa también el campo de aplicación más importante para la presente invención. La AD se distingue por tres importantes características patológicas, que por cierto no son detectables con seguridad más que post mortem: la formación de placas amiloides y de haces neurofibrilares, así como la pérdida de células nerviosas (para la sinopsis, véase (1) ; los datos de referencias de la literatura que se dan en la descripción en forma de números se refieren a la lista de referencias de la literatura que se da a continuación de la descripción) . Las placas amiloides constan de agregados extraneuronales de la proteína βamiloide, mientras que los haces de neurofibrillas contienen principalmente proteína tau y neurofilamentos. Se presume que la formación de placas y de neurofibrillas es la causa de la necrosis de células nerviosas.

Los síntomas más importantes de la AD son los crecientes trastornos de la capacidad de concentración y de la capacidad de razonamiento con irritabilidad relativamente persistente, yendo estos síntomas acompañados de otros trastornos menos específicos que dificultan la delimitación entre la AD y otras formas de demencia.

Observaciones realizadas en pacientes con AD y en pacientes que a lo largo de su observación clínica durante muchos años desarrollaron AD, condujeron a la formulación de criterios para grupos de pacientes delimitables entre sí que cubren toda la amplitud de selección que va desde

(a) personas sin trastornos cognitivos subjetivos y objetivos (que dentro del marco de la presente solicitud representan el grupo de control) , pasando por

(b) pacientes que se quejan de pérdidas de capacidad cognitiva percibidas subjetivamente, pero en los cuales no pueden constatarse déficits cognitivos (dentro del marco de la presente solicitud éste es el grupo de los pacientes con “SKS”, significando “SKS” “trastornos cognitivos subjetivos”) , y pasando asimismo por

(c) pacientes en los que son constatables ligeros trastornos cognitivos y en los que, cuando no existen otras enfermedades provocadoras de demencia, se establece el diagnóstico de “posiblemente AD” (“mgl AD”) (dentro del marco de la presente solicitud éste es el grupo “LKS mgl AD”, significando “LKS” “ligeros trastornos cognitivos”) , hasta

(d) el grupo de los pacientes con el típico cuadro de considerables trastornos cognitivos que comenzaron lentamente y progresan lentamente, para los que, cuando pueden excluirse otras causas de demencia, se establece el diagnóstico de

“probablemente AD” (dentro del marco de la presente solicitud éste es el grupo “ws AD”, significando la abreviatura “probablemente Alzheimer”) .

Con respecto a la asignación de los pacientes con trastornos cognitivos subjetivos y/u objetivos a los distintos grupos, se hace complementariamente referencia a (2) , (3) , (4) y (5) .

La demencia con corpúsculos de Lewy (dementia with lewy-bodies: DLB) es después de la demencia de Alzheimer la segunda causa más común de enfermedad demencial. Neuropatológicamente la DLB está caracterizada por la aparición de los llamados corpúsculos de Lewy en el tronco cerebral y en la corteza. Estos corpúsculos de Lewy constan predominantemente de agregados de la proteína presináptica (α-sinucleína) y ubiquitina. La patología de los corpúsculos de Lewy puede en distinta medida estar asociada a las modificaciones neuropatológicas típicas del Parkinson y del Alzheimer. Así, también en la DLB se produce la formación de beta-amiloide y de placas seniles, pero no se producen haces de neurofibrillas (para la sinopsis, véase (6) ) . También en el cerebro de pacientes con Morbus Parkinson hay corpúsculos de Lewy, si bien en una distinta distribución.

Son síntomas centrales de DLB un trastorno cognitivo progresivo, episodios de confusión mental con un fluctuante estado de atención y de conciencia, el parkinsonismo, y frecuentes caídas y síncopes (desmayos de corta duración del tipo de un ataque) . La sensibilidad y especificidad de los criterios diagnósticos presentan en todos los casos una alta especificidad, pero en parte una muy baja sensibilidad. Esto significa que en la cotidianeidad clínica a menudo no se diagnostica la DLB. La demencia frontotemporal (FTD) se denomina también enfermedad de Pick y supone aproximadamente el 20% de las enfermedades de demencia presenil. La FTD está en parte condicionada genéticamente y se cuenta entre las llamadas tauopatías, que se distinguen por una sobreexpresión o subexpresión de un subtipo de proteína tau o por la expresión de una proteína tau mutada. Neuropatológicamente se produce una atrofia local de la corteza frontal y/o temporal, así como de la substantia nigra y de los ganglios basales. Esto trae como consecuencia trastornos del habla diversamente pronunciados, una modificación del carácter y excentricidades del comportamiento. En total la FTD es subdiagnosticada con una sensibilidad de un 93% para una especificidad de tan sólo un 23%, representando la AD el diagnóstico erróneo más frecuente.

Se agrupan bajo el concepto de demencia vascular (vascular dementia; VAD) enfermedades en las que es provocada una demencia debido a trastornos de la perfusión en el cerebro. Hay distintos tipos de VAD, de los cuales la demencia con infartos múltiples (MID) y la VAD subcortical (también denominada enfermedad de Binswanger) representan las formas más frecuentes.

En el caso de la enfermedad de Binswanger se trata de una evolución demencial lentamente progresiva que patológicamente... [Seguir leyendo]

1. Procedimiento in vitro para la detección y la detección precoz, para la determinación del grado de severidad y para la valoración evolutiva y la prognosis de la demencia de Alzheimer (AD) , de la demencia con corpúsculos de Lewy (DLB) , de la demencia frontotemporal (FTD) o de distintas formas de demencia vascular (VD) , en el que en la sangre de un paciente que padece de trastornos cognitivos determinables subjetiva u objetivamente y con ayuda de un procedimiento de determinación inmunodiagnóstica se detecta un segmento central del péptido proatrialnatriurético (MR-proANP) , y en el que sobre la base de la concentración medida se sacan conclusiones con respecto a la existencia de una enfermedad neurodegenerativa o de una forma precoz de la misma típica de ésta o bien con respecto a la evolución de la enfermedad y/o al éxito de los esfuerzos realizados para aliviarla o prevenirla.

2. Procedimiento según la reivindicación 1, caracterizado por el hecho de que además del MR-proANP se determina adicionalmente el BNP y/o el CNP o bien un correspondiente copéptido de BNP o CNP formado a partir de un correspondiente propéptido.

3. Procedimiento según una de las reivindicaciones 1 o 2, caracterizado por el hecho de que el procedimiento de determinación inmunodiagnóstica es un inmunoensayo tipo sándwich.

4. Procedimiento según la reivindicación 1, caracterizado por el hecho de que el mismo es realizado dentro del marco de la diagnosis del Alzheimer para la detección de formas precoces de la demencia de Alzheimer (AD) .

5. Procedimiento según una de las reivindicaciones 1 a 4, caracterizado por el hecho de que el mismo es realizado dentro del marco de una determinación multiparamétrica en la que se determina al mismo tiempo al menos un adicional parámetro bioquímico o fisiológico con valor diagnóstico para el respectivo cuadro de enfermedad, y en la que se obtiene un resultado de medición en forma de un juego de al menos dos magnitudes de medición que se evalúa para el diagnóstico de precisión de la enfermedad neurodegenerativa.

6. Procedimiento según la reivindicación 5, caracterizado por el hecho de que dentro del marco de la determinación multiparamétrica además de la determinación de MR-proANP se determina al menos otro parámetro bioquímico seleccionado de entre los miembros del grupo que consta de mediadores inflamatorios, componentes del complemento, citoquinas, quimioquinas, coagulantes sanguíneos y factores fibrinolíticos, proteínas de fase aguda y compuestos radicales.

7. Procedimiento según la reivindicación 5 o 6, caracterizado por el hecho de que la determinación multiparamétrica se realiza como determinación simultánea mediante un dispositivo de medición basado en la tecnología de chips o un dispositivo de medición inmunocromatográfica.

8. Procedimiento según una de las reivindicaciones 5 a 7, caracterizado por el hecho de que la evaluación del complejo resultado de medición de la determinación multiparamétrica se realiza con ayuda de un programa informático.