Método de determinación para aldehídos y cetonas en glicerina.

Procedimiento para la determinación cuantitativa de impurezas en forma de aldehídos y cetonas en glicerina quesirve para la fabricación de fármacos,

en el que la glicerina que contiene las impurezas se hace reaccionar en unadisolución de muestra con un reactivo de derivatización y se determina la cantidad de impurezas derivatizadas,caracterizado porque como reactivo de derivatización se utiliza PFBHA, clorhidrato de O-(2,3,4,5,6-pentafluorobencil)-hidroxilamina, la derivatización se realiza en presencia de un solubilizante en forma de undisolvente orgánico polar y se llevan a cabo una separación por cromatografía de líquidos así como una detecciónde las impurezas separadas.

Método de determinación para aldehídos y cetonas en glicerina La invención se refiere a un procedimiento para la determinación cuantitativa de impurezas en forma de aldehídos y cetonas en glicerina que sirve para la fabricación de fármacos, en el que la glicerina que contiene las impurezas se hace reaccionar en una disolución de muestra con un reactivo de derivatización y se determina la cantidad de impurezas derivatizadas.

Tal como es conocido, los fármacos deben cumplir unos estrictos requisitos de calidad, para poder dispensarse al consumidor o al paciente. Las sustancias contenidas en los fármacos y sus formas de administración deben corresponder a las reglas farmacéuticas reconocidas, que están definidas entre otros en las farmacopeas.

La glicerina pertenece a las sustancias de partida que se utilizan a menudo en la fabricación de fármacos. Para este producto químico, glicerina, existen monografías en diferentes farmacopeas, por ejemplo en la farmacopea europea (Ph. Eur.) , la farmacopea estadounidense (USP) y la farmacopea japonesa (JP) . La glicerina debe corresponder a las especificaciones expuestas en estas farmacopeas.

Sin embargo, la glicerina es sensible a la oxidación. Tanto durante la fabricación como durante el almacenamiento de glicerina pueden producirse aldehídos y cetonas. La aparición de tales impurezas en la glicerina puede conducir a problemas de calidad durante la utilización de glicerina para la fabricación de fármacos.

Sin embargo, los procedimientos descritos en las monografías mencionadas anteriormente para la determinación deimpurezas en forma de aldehídos y cetonas son insuficientes. Únicamente la farmacopea europea contiene una especificación explícita para aldehídos. Según esta especificación, el contenido en aldehído se determina mediante derivatización con cloruro de pararosanilina y mediante medición por UV/VIS posterior, sirviendo el formaldehído como referencia. Según esta especificación el contenido en aldehído sólo puede ascender como máximo a 10 ppm.

En la USP sólo se detectan los aldehídos mediante el estudio por cromatografía de gases en “Related Compounds”; el límite de especificación se encuentra a este respecto a como máximo el 0, 1%.

La glicerina puede contener aldehídos y cetonas en contenidos de hasta más de 60 ppm y aún así cumplir los requisitos de prueba según la farmacopea europea. Esto se debe a que el método de la farmacopea europea es impreciso y únicamente detecta formaldehído, sin embargo los otros aldehídos y cetonas sólo de manera insuficiente. Por tanto, el fabricante de fármacos corre el riesgo de que si bien la sustancia de partida adquirida por él, glicerina, pase la prueba según la farmacopea europea, sin embargo el contenido real en aldehídos y cetonas no ascienda únicamente a 10 ppm, sino que se encuentre considerablemente por encima. Por consiguiente, el fabricante de fármacos no llega a tener conocimiento de este alto contenido en aldehídos y cetonas. Sin embargo, debido a la reactividad de los aldehídos y las cetonas esto puede tener efectos negativos sobre la calidad del fármaco acabado.

Esta problemática se comenta también en el documento EP 1 242 121 B1. En éste se encuentra una exposición a modo de resumen de los diferentes planteamientos de problemas y también un procedimiento de prueba para determinar el contenido en aldehídos reactivos en muestras de glicerina.

En el caso de este procedimiento se trata de un ensayo colorimétrico, en el que se utiliza glicerinaldehído como patrón. En este procedimiento conocido se utiliza clorhidrato de 3-metil-2-benzotiazolinon-hidrazona (MBTH) . Tras haber tenido lugar la conversión se mide espectrofotométricamente la absorción de la disolución de reacción a 624 nm.

En este documento se compara también esta prueba de MBTH con otras pruebas conocidas. En estos procedimientos conocidos resulta desventajosa la circunstancia de que con ellos sólo puedan detectarse cuantitativamente sólo algunas de las impurezas de la glicerina.

Por tanto, el objetivo de la presente invención es proporcionar un procedimiento con el que puedan determinarse de manera cuantitativa mejor el mayor número de impurezas y en particular todas las impurezas en forma de aldehídos y cetonas en glicerina.

Este objetivo se soluciona mediante un procedimiento según la enseñanza de las reivindicaciones.

En el procedimiento según la invención para la determinación cuantitativa de aldehídos y cetonas se utiliza como reactivo de derivatización PFBHA. Se trata a este respecto de clorhidrato de O- (2, 3, 4, 5, 6-pentafluorobencil) hidroxilamina.

Por consiguiente, según la invención se mezcla una disolución de muestra, que contiene la glicerina que va a someterse a prueba, con dicho reactivo de derivatización, que preferiblemente se encuentra en una disolución de derivatización acuosa tamponada.

Además se añade un solubilizante en forma de un disolvente orgánico polar en particular soluble en agua. A este respecto puede tratarse por ejemplo de alcoholes con de 1 a 5 átomos de C, en particular de monoalcoholes con de 1 a 5 átomos de C, así como de acetonitrilo, prefiriéndose acetonitrilo.

En el procedimiento según la invención se hacen reaccionar la glicerina y las impurezas contenidas en la misma en una disolución de muestra con el reactivo de derivatización.

En esta conversión o reacción se transforman las impurezas mencionadas anteriormente en los correspondientes derivados. La disolución de muestra obtenida tras la conversión y por consiguiente las impurezas derivatizadas se separan entonces mediante cromatografía de líquidos.

La derivatización o conversión tiene lugar preferiblemente en un espacio termostatizado. En el caso de este espacio se trata preferiblemente de un muestreador automático. La derivatización puede realizarse por ejemplo a una temperatura de 0 - 76ºC, preferiblemente a 0 - 60ºC, más preferiblemente a 20-35ºC y de manera particularmente preferible a aproximadamente 25ºC.

Los intervalos de temperatura indicados 0-76ºC comprenden todos los valores de temperatura incluidos en los mismos, en particular enteros, por ejemplo 0, 1, 2, 3, 4, 5, 6, 7, 8, 9, 10, 11, 12, 13, 14, 15, 16, 17, 18, 19, 20, 21, 22, 23, 24, 25, 26, 27, 28, 29, 30, 31, 32, 33, 34, 35, 36, 37, 38, 39, 40, 41, 42, 43, 44, 45, 46, 47, 48, 49, 50, 51, 52, 53, 54, 55, 56, 57, 58, 59, 60, 61, 62, 63, 64, 65, 66, 67, 68, 69, 70, 71, 72, 73, 74 75 y 76. Lo mismo es válido de manera análoga para los intervalos de temperatura preferidos de 0 - 60 así como 20-35ºC.

La concentración del solubilizante en la disolución de muestra que va a estudiarse asciende preferiblemente al 1 80% en volumen y de manera particularmente preferible a aproximadamente el 20% en volumen.

También en el caso de estos datos de intervalos están comprendidos y se dan a conocer todos los valores incluidos en el intervalo y en particular los valores enteros. Así, el intervalo del 1 - 80% en volumen comprende y da a conocer al menos los siguientes valores individuales enteros: 1, 2, 3, 4, 5, 6, 7, 8, 9, 10, 11, 12, 13, 14, 15, 16, 17, 18, 19, 20, 21, 22, 23, 24, 25, 26, 27, 28, 29, 30, 31, 32, 33, 34, 35, 36, 37, 38, 39, 40, 41, 42, 43, 44, 45, 46, 47, 48, 49, 50, 51, 52, 53, 54, 55, 56, 57, 58, 59, 60, 61, 62, 63, 64, 65, 66, 67, 68, 69, 70, 71, 72, 73, 74, 75, 76, 77, 78, 79 y 80.

La concentración de glicerina en la disolución de muestra que va a estudiarse puede ascender a 1 - 90 m/V, preferiblemente a 5 - 50 m/V y más preferiblemente a aproximadamente 40 m/V. También en este caso los intervalos indicados comprenden todos los valores incluidos en los intervalos indicados y en particular los valores enteros. Así, el intervalo para la concentración de glicerina de 5 - 50 comprende y da a conocer al menos los siguientes valores enteros: 5, 6, 7, 8, 9, 1, 11, 12, 13, 14, 15, 16, 17, 18, 19, 20, 21, 22, 23, 24, 25, 26, 27, 28, 29, 30, 31, 32, 33, 34, 35, 36, 37, 38, 39, 40, 41, 42, 43, 44, 45, 46, 47, 48, 49 y 50.

La duración de reacción de la conversión o reacción de derivatización puede ascender a 10 minutos - 10 días y asciende preferiblemente a 10 - 20 horas, por ejemplo 10, 11, 12, 13, 14, 15, 16, 17, 18 y 20 horas, de manera particularmente preferible 15 horas.

La concentración del reactivo de derivatización, por ejemplo PFBHA, en la disolución de muestra asciende preferiblemente a de 0, 01 mg/ml a 100 mg/ml, de manera particularmente preferible a 0, 2 mg/ml. También en este caso están comprendidos y se dan a conocer todos los valores incluidos en los intervalos, por ejemplo 0, 1, 0, 2, 0, 3, 0, 4, 0, 5, 0, 6, 0, 7, 0, 8, 0, 9, 1, 2, 3 etc. hasta... [Seguir leyendo]

1. Procedimiento para la determinación cuantitativa de impurezas en forma de aldehídos y cetonas en glicerina que sirve para la fabricación de fármacos, en el que la glicerina que contiene las impurezas se hace reaccionar en una disolución de muestra con un reactivo de derivatización y se determina la cantidad de impurezas derivatizadas, caracterizado porque como reactivo de derivatización se utiliza PFBHA, clorhidrato de O- (2, 3, 4, 5, 6pentafluorobencil) -hidroxilamina, la derivatización se realiza en presencia de un solubilizante en forma de un disolvente orgánico polar y se llevan a cabo una separación por cromatografía de líquidos así como una detección de las impurezas separadas.

2. Procedimiento según la reivindicación 1, caracterizado porque en el caso de las impurezas se trata de glicerinaldehído, dihidroxiacetona, hidroxiacetona y formaldehído.

3. Procedimiento según la reivindicación 1 ó 2, caracterizado porque se utiliza acetonitrilo como solubilizante y/o tras la separación por cromatografía de líquidos se lleva a cabo una detección de UV.

4. Procedimiento según una de las reivindicaciones anteriores, caracterizado porque la detección por UV se lleva a cabo a una longitud de onda de desde 180 hasta 400 nm.

5. Procedimiento según la reivindicación 4, caracterizado porque la detección por UV se lleva a cabo a una longitud de onda de desde 190 hasta 250 nm, en particular a aproximadamente 200 nm.

6. Procedimiento según una de las reivindicaciones anteriores, caracterizado porque la derivatización se realiza en un espacio termostatizado.

7. Procedimiento según una de las reivindicaciones anteriores, caracterizado porque la derivatización se realiza a de 0 a 76ºC.

8. Procedimiento según la reivindicación 7, caracterizado porque la derivatización se lleva a cabo a aproximadamente 25ºC.

9. Procedimiento según una de las reivindicaciones anteriores, caracterizado porque la concentración del solubilizante en la disolución de muestra asciende a del 1 al 80% en volumen.

10. Procedimiento según la reivindicación 9, caracterizado porque la concentración del solubilizante en la disolución de muestra asciende a aproximadamente el 20% en volumen.

11. Procedimiento según una de las reivindicaciones anteriores, caracterizado porque la concentración de glicerina en la disolución de muestra asciende a del 5 al 50% (m/V) y en particular a aproximadamente el 40% (m/V) .

12. Procedimiento según una de las reivindicaciones anteriores, caracterizado porque la duración de reacción de la reacción de derivatización asciende a de 10 minutos a 20 horas.

13. Procedimiento según una de las reivindicaciones anteriores, caracterizado porque en la separación por cromatografía de líquidos se utilizan dos fases móviles A y B, como fase móvil A se utiliza agua o una disolución acuosa tamponada y como fase móvil B se utiliza un disolvente orgánico o una mezcla de disolventes orgánicos y, en particular acetonitrilo.

14. Procedimiento según una de las reivindicaciones anteriores, caracterizado porque los contenidos en impurezas pueden calcularse comparando con una disolución de calibración derivatizada que contiene estas impurezas.