Procedimiento para el tratamiento cosmético del fotoenvejecimiento de la piel.

Un procedimiento no terapéutico para la prevención o el tratamiento del fotoenvejecimiento de la pielen un individuo,

que comprende la administración a dicho individuo de una cantidad cosméticamente activa de unproducto derivado de fibroblastos gingivales seleccionado entre el grupo compuesto por células completas defibroblastos gingivales, un cultivo de fibroblastos gingivales y un medio condicionado de fibroblastos gingivales.

Procedimiento para el tratamiento cosmético del fotoenvejecimiento de la piel

En el envejecimiento de la piel se produce un desequilibrio entre la síntesis de la matriz extracelular (MEC) y su degradación por las metaloproteinasas de la matriz (MMP) . Este desequilibrio lleva a una degradación excesiva de la matriz extracelular, una característica del envejecimiento de la piel (Cauchard y Homebeck (2004) Vivant 5) . El envejecimiento de la piel se asocia a un aumento en el número y en la profundidad de las arrugas, una consecuencia directa de la degradación de las macromoléculas de la dermis, como los colágenos y la elastina.

En la dermis, la sobreproducción de MMP que se produce en el envejecimiento cronológico y fotoinducido es estimulada por los radicales libres de oxígeno. Además, en las zonas de la piel expuestas al sol, como el cutis, se producen otros efectos perjudiciales de los rayos UV, en concreto, la síntesis incompleta de colágeno, la pigmentación de la piel y la elastosis solar (que se manifiesta como una degradación del entramado elástico cutáneo) . Además, en estudios in vitro se ha demostrado que los fibroblastos de la piel sometidos a tratamiento con rayos UV sobreproducen MMP (Brennan y col. (2003) Photochem. Photobiol. 78:43-48) .

Las colagenasas 1 y 3 (MMP-1 y MMP-3) y MT1-MMP (MMP-14) degradan los colágenos, mientras que las gelatinasas A y B (MMP-2 y MMP-9) degradan la elastina. Otras metaloproteinasas como la estromelisina 1 (MMP-3) están implicadas tanto en la degradación del colágeno como de la elastina.

Los fibroblastos dérmicos se han usado en el marco del tratamiento del envejecimiento de la piel (Weiss y col. (2007) Dermatol Surg. 33:263-8) . Podría observarse un aumento de la retícula de colágeno en 215 sujetos a los que se inyectaron fibroblastos dérmicos autólogos (20 millones/ml) en las arrugas profundas. La mejora de las arrugas seguía siendo claramente visible en el 80% de los sujetos un año después de la inyección.

Los fibroblastos gingivales son células mesenquimales capaces de migrar, adherirse y proliferan dentro de los tejidos conjuntivos blandos de las encías, manteniendo de este modo la integridad del tejido gingival que está expuesto a numerosas agresiones como estrés mecánico, infecciones bacterianas o variaciones de pH y temperatura. Los fibroblastos gingivales se describen en particular en Gogly y col., (1997) Clin. Oral Invest. 1:147152; Gogly y col. (1998) Biochem. Pharmacol. 56:1454 y Ejeil y col. (2003) J. Periodontol. 74:188-195.

Dependiendo de las condiciones ambientales, los fibroblastos gingivales son capaces de modular su fenotipo y responder mediante proliferación, migración, síntesis de los compuestos de la matriz o enzimas relacionadas con la matriz.

Los fibroblastos gingivales sintetizan colágenos (p. ej. tipos I, III, V, VI, VII, XII) , fibras elásticas (oxitalán, elaunina y elastina) , proteoglicanos y glucosaminoglucanos (p. ej., decorina, biglucano) y glucoproteínas (p. ej., fibronectina, tenascina) . Simultáneamente, los fibroblastos gingivales sintetizan enzimas que son capaces de degradar los compuestos macromoleculares (metaloproteínasas de la matriz; MMP) , aunque también enzimas que inhiben formas activas de MMP (inhibidores de metaloproteinasas; TIMP) . Los fibroblastos gingivales son, por tanto, actores importantes de la remodelación de la matriz extracelular.

Resumen de la invención 45 [0008] La presente invención surge del hallazgo inesperado de los inventores de que los fibroblastos gingivales son más adecuados que los fibroblastos dérmicos para inhibir la actividad de las MMP que se originan a partir de los fibroblastos dérmicos tratados con rayos UV.

Por tanto, la presente invención se refiere a un procedimiento no terapéutico para la prevención o tratamiento del fotoenvejecimiento de la piel en un individuo, que comprende la administración a dicho individuo de una cantidad cosméticamente activa de un producto derivado de fibroblastos gingivales.

Descripción de las figuras 55 [0010] La figura 1 representa la cantidad de MMP-9 (eje vertical, pg/100.000 células) en el medio de cultivo de: fibroblastos dérmicos humanos (hDF) no tratados; fibroblastos dérmicos humanos (hDFi1) tratados con UV-A a una dosis de 7, 5 julios/cm2; hDFi1 en presencia de medio condicionado de fibroblastos gingivales humanos (cmhGF) ; hDFi1 en presencia de medio condicionado de fibroblastos dérmicos humanos (cmhDF) ; fibroblastos dérmicos humanos (hDFi2) tratados con rayos UV-A a una dosis de 15 julios/cm2; hDFi2 en presencia de medio condicionado de fibroblastos gingivales humanos (cmhGF) y hDFi2 en presencia de medio condicionado de fibroblastos dérmicos humanos (cmhDF) .

La figura 2 representa la concentración de TIMP-1 (eje vertical, pg/ml/100.000 células) en medio 65 condicionado de fibroblastos dérmicos humanos (cmhDF) , en el medio de cultivo de fibroblastos dérmicos humanos tratados con luz UV-A a una dosis de 7, 5 julios/cm2 (hDFi1) o 15 julios/cm2 (hDFi2) o en medio condicionado de fibroblastos gingivales humanos (cmhGF) .

La figura 3 representa la concentración de complejos MMP-9/TIMP-1 (eje vertical, pg/ml/100.000 células) en el medio de cultivo de: fibroblastos dérmicos humanos (hDF) no tratados; fibroblastos dérmicos humanos (hDFi1) tratados con UV-A a una dosis de 7, 5 julios/cm2; hDFi1 en presencia de medio condicionado de fibroblastos gingivales humanos (cmhGF) ; hDFi1 en presencia de medio condicionado de fibroblastos dérmicos humanos (cmhDF) ; fibroblastos dérmicos humanos (hDFi2) tratados con UV-A a una dosis de 15 julios/cm2; hDFi2 en presencia de medio condicionado de fibroblastos gingivales humanos (cmhGF) y hDFi2 en presencia de medio condicionado de fibroblastos dérmicos humanos (cmhDF) .

Descripción detallada de la invención [0013] Como se pretende en este documento, «envejecimiento de la piel» se refiere a defectos de la piel que se producen como consecuencia de una degradación de los componentes de la piel debido a factores crónicos, 15 como estrés mecánico, oxidativo y/o lumínico.

En particular, el envejecimiento de la piel puede ser consecuencia del envejecimiento cronológico y/o del fotoenvejecimiento. El «envejecimiento cronológico» se refiere a defectos de la piel que se producen como consecuencia del envejecimiento. El «fotoenvejecimiento» se refiere a defectos de la piel que se producen como consecuencia de la exposición de la piel a la luz y, en particular, a los rayos UV; más en particular, a los rayos UV-A.

Los defectos de la piel pueden ser principalmente arrugas o pérdida de elasticidad de la piel. Los constituyentes degradados de la piel pueden ser elastina y/o colágenos, por lo que el procedimiento según la invención es útil para aumentar la síntesis de los mismos dentro de la dermis.

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[0016] El procedimiento de la invención es para la prevención o tratamiento del fotoenvejecimiento de la piel.

[0017] Preferiblemente, el individuo es un mamífero y, más preferiblemente, un ser humano.

[0018] Los procedimientos para obtener, cultivar y conservar fibroblastos gingivales son bien conocidos por el

experto en la materia y se describen especialmente en Naveau y col. (2006) J. Periodontol. 77:238-47 y en Gogly y col. (2007) Arterioscler. Thromb. Vasc. Biol. 27:1984-90.

De forma ventajosa, los fibroblastos gingivales se obtienen y cultivan fácilmente. Por otra parte, los 35 fibroblastos gingivales poseen una alta velocidad de expansión.

Preferiblemente, los fibroblastos gingivales utilizados en el procedimiento según la invención son autólogos, ya que se obtienen del individuo al cual se pretende administrar el producto derivado de fibroblastos gingivales.

De forma ventajosa, los fibroblastos gingivales proporcionan una fuente prácticamente ilimitada de fibroblastos autólogos. Además, en caso de envejecimiento de la piel, los fibroblastos gingivales autólogos competentes para el cultivo normalmente siguen disponibles, mientras que por el contrario, la fuente de fibroblastos dérmicos autólogos competentes para el cultivo es escasa.

Sin embargo, los fibroblastos gingivales también pueden ser alogénicos, es decir, que se obtienen de otro individuo de la misma especie, o heterólogos, que se obtienen de otro individuo de otra especie.

Como se pretende en este documento, «producto derivado de fibroblastos gingivales» se refiere a cualquier producto que puede obtenerse de fibroblastos gingivales en sí mismos o que contienen secreciones de fibroblastos gingivales. Por ejemplo, se prefiere que el producto derivado de fibroblastos gingivales se seleccione entre el grupo compuesto por células completas de fibroblastos... [Seguir leyendo]

1. Un procedimiento no terapéutico para la prevención o el tratamiento del fotoenvejecimiento de la piel en un individuo, que comprende la administración a dicho individuo de una cantidad cosméticamente activa de un producto derivado de fibroblastos gingivales seleccionado entre el grupo compuesto por células completas de fibroblastos gingivales, un cultivo de fibroblastos gingivales y un medio condicionado de fibroblastos gingivales.

2. El procedimiento de acuerdo con la reivindicación 1 para la prevención o el tratamiento cosmético de arrugas o pérdida de elasticidad de la piel.

3. El procedimiento de acuerdo con la reivindicación 1 o 2 para la prevención o el tratamiento del fotoenvejecimiento del cutis.

4. El procedimiento de acuerdo con cualquiera de las reivindicaciones 1 a 3 para aumentar la síntesis de 15 elastina y/o colágeno en la dermis.

5. El procedimiento de acuerdo con cualquiera de las reivindicaciones 1 a 4 en el que el producto derivado de fibroblastos gingivales se administra por vía tópica o mediante inyección intradérmica.

6. El procedimiento de acuerdo con cualquiera de las reivindicaciones 1 a 5 en el que el producto derivado de fibroblastos gingivales es un medio condicionado de fibroblastos gingivales.

7. El procedimiento de acuerdo con cualquiera de las reivindicaciones 1 a 6 en el que el producto derivado de fibroblastos gingivales se obtiene a partir de fibroblastos gingivales tomados del individuo.

8. El procedimiento de acuerdo con cualquiera de las reivindicaciones 1 a 7 que comprende:

- tomar fibroblastos gingivales del individuo;

- cultivar los fibroblastos gingivales;

- obtener un producto derivado de fibroblastos gingivales a partir de fibroblastos gingivales en cultivo, estando dicho producto derivado de fibroblastos gingivales seleccionado entre el grupo compuesto por células completas de fibroblastos gingivales, un cultivo de fibroblastos gingivales y un medio condicionado de fibroblastos gingivales; y

- administrar el producto derivado de fibroblastos gingivales al individuo.