Composición probiótica para uso en el tratamiento de la inflamación del intestino.

Composición que comprende una cantidad efectiva de Lactobacillus plantarum CECT 7484,

Lactobacillusplantarum CECT 7485, y Pediococcus acidilactici CECT 7483.

Composición probiótica para uso en el tratamiento de la inflamación del intestino Esta solicitud reivindica el beneficio de la solicitud provisional de Estados Unidos 61/299, 116 y de la solicitud de patente europea EP10151998, ambas presentadas el 28 de enero de 2010, las cuales se incorporan aquí como referencia.

La presente invención se refiere a los campos de la medicina, la microbiología y la nutrición y, particularmente, a una nueva composición probiótica. Particularmente, se han aislado nuevas cepas de Lactobacillus plantarum y de Pediococcus acidilactici y combinado en una formulación útil en el tratamiento de enfermedades gastrointestinales, tales como la inflamación del intestino (p.ej., la enfermedad inflamatoria intestinal) y el síndrome del intestino irritable.

ESTADO DE LA TÉCNICA

La colitis ulcerosa (CU) , la reservoritis (“Pouchitis”) , y la enfermedad de Crohn son ejemplos de enfermedades inflamatorias intestinales (EII, en inglés “inflammator y bowel disease”, IBD) que se caracterizan por la inflamación crónica en el intestino. Los síntomas clínicos son la diarrea, el dolor abdominal, el sangrado rectal ocasional, la pérdida de peso, el cansancio y algunas veces fiebre. Aunque ocurren a cualquier edad, la EII es más común en adolescentes y adultos jóvenes, que consecuentemente pueden sufrir retraso en el desarrollo y en el crecimiento. La frecuencia de la enfermedad es similar a la diabetes tipo 1 en Europa y los Estados Unidos. El curso clínico de la EII varía considerablemente. Los pacientes con síntomas leves o moderados pueden tratarse sin necesidad de hospitalización. Sin embargo, el 10-15% de los pacientes experimentan una evolución grave de la enfermedad, que en muchos casos requiere de cirugía.

La EII se trata médicamente mediante la reducción de la inflamación y por lo tanto controlando los síntomas gastrointestinales. Sin embargo, actualmente no existe cura médica para la EII. La coloectomomía puede eliminar la CU, pero reduce la calidad de vida y aumenta el riesgo de complicaciones. Los tratamientos médicos disponibles incluyen el uso del ácido 5-aminosalicílico (5-ASA) , corticosteroides y medicamentos inmunomoduladores. El tratamiento prolongado de los síntomas de leves a moderados de la EII normalmente se lleva a cabo utilizando 5-ASA, mientras que los corticosteroides y los medicamentos inmunomoduladores se utilizan para tratar los síntomas graves. Como efectos secundarios de la 5-ASA aparecen la diarrea o el dolor abdominal, mientras que el uso prolongado de corticosteroides con frecuencia muestra efectos secundarios graves, incluyendo la reducción de la masa ósea, infección, diabetes, pérdida de masa muscular y trastornos psiquiátricos. Los medicamentos inmunomoduladores suprimen el sistema inmune, que controla los síntomas de la EII. Sin embargo, el estado inmunodeficiente resultante deja al paciente susceptible a muchas enfermedades.

El síndrome del intestino irritable (SII, en inglés “irritable bowel disease”, IBS) es una enfermedad caracterizada por dolor abdominal y/o malestar que se asocia a la alteración del hábito intestinal o defecación, donde los síntomas no se explican por anormalidades estructurales o bioquímicas. Son también comunes en el SII, la urgencia, la hinchazón y la sensación de evacuaciones incompletas. Por lo tanto, se clasifica entre los trastornos gastrointestinales funcionales que incluyen enfermedades como la distensión abdominal funcional, el dolor torácico no cardíaco, la dispepsia no ulcerosa y el estreñimiento crónico o la diarrea (Longstreth G. H. et al., 2006) . Cabe mencionar que el SII tiene un impacto sustancial en la morbilidad y la calidad de vida más allá del dolor abdominal y el malestar, ya que los síntomas asociados afectan tanto a la sensación de bienestar del que lo sufre como a la capacidad de funcionar normalmente (Dean B. B. et al., 2005) .

Hay una gran actividad en el campo del desarrollo de fármacos para el tratamiento del SII. En este sentido, han ganado popularidad diferentes antidepresivos a pesar de que su eficacia en ensayos clínicos ha sido modesta y su utilidad clínica está limitada por los efectos secundarios adversos. Los agentes serotoninérgicos han demostrado su eficacia sobre los síntomas globales del SII. Sin embargo, la reciente preocupación sobre la seguridad ha limitado severamente su uso. Por lo tanto, el desarrollo de nuevas terapias para el SII es de gran interés.

Los probióticos se definen como "microorganismos vivos que cuando se ingieren en cantidades determinadas, ejercen beneficios para la salud más allá de la nutrición básica inherente" (Araya M. et al., 2002; Guarner F. et al., , 1998) . Varias bacterias ácido lácticas y especies del género Bifidobacterium son probióticas, lo que implica que se ha demostrado que promueven un efecto saludable específico. Las bacterias probióticas deben cumplir varios requisitos relativos a ausencia de toxicidad, viabilidad, adhesión y efectos beneficiosos. Estas características probióticas son dependientes de cepa, incluso entre las bacterias de la misma especie. Por lo tanto, es importante encontrar aquellas cepas que tienen un mejor comportamiento en todos los requisitos probióticos. Se han realizado estudios clínicos en humanos utilizando probióticos solos o en combinación con antibióticos para identificar cepas y/o formulaciones para el tratamiento de pacientes con EII o SII, o para mantener en remisión a pacientes de EII ya tratados. WO 96/29083 y EP 554418 describen dos cepas de Lactobacillus colonizadoras del intestino, que incluyen Lactobacillus plantarum 299v (DSM 6595) y Lactobacillus casei ssp. rhamnosus 271 (DSM 6594) . EP 415941 describe métodos para preparar una composición de nutrientes que comprende el tratamiento de papilla de avena con enzimas antes de mezclar con lactobacilos. La patente US 7195906 describe una cepa de Bifidobacterium

aislada de una resección lavada de tracto intestinal, para el tratamiento de enfermedades inflamatorias, especialmente la actividad inflamatoria gastrointestinal, tales como la EII, y SII.

A pesar de un potencial prometedor, es necesaria una mejora considerable del efecto de los probióticos para su uso en el tratamiento de enfermedades inflamatorias intestinales (como la EII) , así como de otras enfermedades gastrointestinales (tales como el SII) .

EXPLICACIÓN DE LA INVENCIÓN

Los inventores de la presente invención han encontrado que una composición que comprende cepas de Lactobacillus y Pediococcus es efectiva en el tratamiento de la inflamación del intestino. Particularmente se han aislado tres nuevas cepas probióticas que pertenecen al género Lactobacillus plantarum y Pediococcus acidilactici. Estas cepas permiten un tratamiento eficiente de la inflamación del intestino cuando se combinan como formulación única.

Así, en un primer aspecto la presente invención proporciona una composición que comprende una cantidad efectiva de Lactobacillus plantarum CECT 7484, Lactobacillus plantarum CECT 7485, y Pediococcus acidilactici CECT 7483,

o mutantes o variantes de los mismos.

Las cepas Lactobacillus plantarum CECT 7485 y CECT 7484, y la cepa Pediococcus acidilactici CECT 7483 fueron depositadas en la Colección Española de Cultivos Tipo (Valencia, España) el 04.02.2009. Las tres cepas depositadas son viables y mantienen todas sus características relativas a su depósito.

La expresión "cantidad efectiva", como se usa en la presente memoria, significa una cantidad de un agente activo lo bastante elevada para conseguir el beneficio deseado, pero lo bastante reducida para evitar efectos secundarios graves dentro del alcance del buen juicio médico.

Está claro que usando las cepas depositadas como material de partida, el experto en la materia puede obtener de forma rutinaria, por mutagénesis convencional o técnicas de reaislamiento, mutantes adicionales o derivados de los mismos que conserven o mejoren las características y ventajas relevantes de las cepas que forman la composición de la invención. El experto en la materia decidirá sobre el método adecuado a emplear para determinar la actividad antiinflamatoria, inmunomoduladora o anti-IBS o anti hinchazón abdominal de las cepas. Se muestran ejemplos de posibles métodos para medir esta actividad en los ejemplos a continuación.

En una realización, el mutante es un mutante modificado genéticamente.

En otra realización del primer aspecto de la invención, la variante es una variante natural.

Las cepas que forman parte de la composición del primer aspecto de la invención pueden estar en forma de células viables. Alternativamente, la cepa puede estar en forma de células... [Seguir leyendo]

1. Composición que comprende una cantidad efectiva de Lactobacillus plantarum CECT 7484, Lactobacillus plantarum CECT 7485, y Pediococcus acidilactici CECT 7483.

2. Composición como se define en la reivindicación 1, para su uso como probiótico.

3. Composición como se define en la reivindicación 1, para su uso como medicamento.

4. Composición como se define en la reivindicación 1, para su uso como agente inmunomodulador.

5. Composición como se define en la reivindicación 1, para su uso en la prevención y/o el tratamiento de la inflamación del intestino.

6. Uso de la composición como se define en la reivindicación 1, para la fabricación de un medicamento para la prevención y/o el tratamiento de la inflamación del intestino.

7. Composición según la reivindicación 5 o uso según la reivindicación 6, en la prevención y/o el tratamiento de la enfermedad inflamatoria intestinal.

8. Composición según la reivindicación 1, para su uso en la prevención y/o el tratamiento del síndrome del intestino irritable.

9. Composición según la reivindicación 1, para su uso en la prevención y/o el tratamiento de la distensión y la hinchazón abdominales.

10. Producto farmacéutico que comprende una cantidad efectiva de la composición como se define en la reivindicación 1, junto con cantidades apropiadas de excipientes farmacéuticamente aceptables.

11. Producto veterinario que comprende una cantidad efectiva de la composición como se define en la reivindicación 1, junto con cantidades apropiadas de excipientes veterinariamente aceptables.

12. Producto comestible que comprende una cantidad efectiva de la composición como se define en la reivindicación 1, junto con cantidades apropiadas de otros ingredientes comestibles.

13. Producto comestible según la reivindicación 12, que es un complemento alimenticio.

14. Cepa de Lactobacillus plantarum depositada en la Colección Española de Cultivos Tipo bajo el número de acceso CECT 7484.

15. Cepa de Lactobacillus plantarum depositada en la Colección Española de Cultivos Tipo bajo el número de acceso CECT 7485.

16. Cepa de Pediococcus acidilactici depositada en la Colección Española de Cultivos Tipo bajo el número de acceso CECT 7483.

17. Método para obtener un mutante de Lactobacillus plantarum CECT 7484, Lactobacillus plantarum CECT 7485, o Pediococcus acidilactici CECT 7483, que comprende utilizar la cepa depositada como material de partida y aplicar mutagénesis, donde el mutante obtenido retiene o mejora las actividades anti-inflamatoria, inmunomoduladora, anti-SII o anti-hinchazón abdominal de las cepa depositada original.

FIG. 1

1 4

FIG. 1 (Continuación)

35 6 2 356

FIG. 2

FIG. 3

FIG. 4

FIG. 5

FIG. 6

FIG. 7

FIG. 8