PÉPTIDOS KDR Y VACUNAS QUE LOS CONTIENEN.

La presente invención está relacionada con péptidos para utilizar en el tratamiento o prevención de tumores que son extremadamente útiles como vacunas para el cáncer, y fármacos que contienen estos péptidos, para el tratamiento y prevención de tumores. Antecedentes Los genes de antígenos de rechazo tumoral se han identificado principalmente para melanomas malignos, y de acuerdo con esto, se han desarrollado inmunoterapias contra el cáncer que utilizan estos genes. Específicamente, con reconocimiento de la importancia de los linfocitos T CD8-positivos en las respuestas inmunes antitumorales, ha llamado la atención la terapia con vacunas contra el cáncer que induce linfocitos T CD8-positivos específicos de tumor in vivo, y se está aplicando en varias aplicaciones clínicas. Además, también se ha descrito el mecanismo por el que los péptidos que constan de aproximadamente diez residuos de aminoácidos activan a los linfocitos T a través de la ruta de Clase I, mediante la asistencia de varias moléculas coestimuladoras para inducir linfocitos T citotóxicos específicos de tumor (LTC).. Además, se han identificado activamente los péptidos restringidos a moléculas de HLA individuales. No obstante, el control completo de los tumores es actualmente imposible. Esto puede ser debido a la heterogeneidad de las células tumorales, a la reducción o desaparición de la expresión de MHC de Clase I en las células tumorales y a la ausencia de moléculas diana en las células tumorales. Además, los péptidos de antígeno tumoral identificados actualmente existen en algunos tipos de tumor, pero no en todos los tipos de tumor. Así, para resolver estos problemas, los presentes inventores no utilizan células tumorales como células diana, sino que se centran en las células endoteliales de los vasos tumorales. Más específicamente, las células endoteliales difícilmente presentan problemas relacionados con un descenso o desaparición de la expresión de MHC de Clase I, o heterogeneidad. Así, si se inducen los LTC dirigidos contra los vasos tumorales, pueden superarse los problemas de la terapia con vacunas convencionales contra el cáncer, como la desaparición de la Clase I y la ausencia de una molécula diana, independientemente del tipo de tumor, y pueden anticiparse excelentes efectos terapéuticos. Se han iniciado estudios en la angiogénesis tumoral a partir de hipótesis pioneras propuestas por Folkman et al. en los años 70 y han sido desarrolladas desde varias perspectivas. Se han llevado a cabo muchos estudios sobre los receptores (VEGFR) VEGF-VEGF para evaluar su significancia en la angiogénesis tumoral. Se han desarrollado exhaustivamente inhibidores de la angiogénesis como fármacos orientados a dianas, particularmente en la terapia contra el cáncer, y se han probado ya clínicamente. No obstante, las terapias que utilizan este concepto para los tatamientos de vacunas contra el cáncer no están todavía en uso. Una de las razones puede ser inmunotolerancia al VEGFR, que se expresa en células normales. No obstante, en la década de 1990, Plate, Millauer, y Risau et al confirmaron que el VEGFR se expresan fuertemente en las células endoteliales de los tejidos tumorales. Además, la respuesta inmune a los autoantígenos como CEA y HER/neu, que también se expresan en células normales, no es necesariamente de inmunotolerancia. Por lo tanto, los presentes inventores concluyeron que los VEGFR pueden utilizarse como dianas para la terapia con una vacuna para el cáncer. Recientemente, se describió que la inmunización activa frente a los VEGFR puede inhibir la angiogénesis en tumores y la metástasis (The Journal of Experimental Medicine, 2002, 195: 12, 1575-1584). No obstante, esta bibliografía simplemente utilizó proteínas VEGFR solubles, y no realizó ninguna investigación sobre las secuencias de aminoácido de los péptidos efectivos. Descripción de la Invención Los presentes inventores se han centrado en las posibles terapias con vacunas para el cáncer que la diana VEGFR2 (KDR/flk-1; denominada de ahora en adelante KDR), en las que VEGFR2 se expresa fuertemente en células endoteliales de tejido tumoral, y se cree que está involucrado en la proliferación de células endoteliales a la señal de VEGF. Además, los presentes inventores realizaron un cribado en busca de los péptidos que puede utilizarse de forma efectiva como vacunas, examinando su especificidad y completando esta invención. La presente invención proporciona lo siguiente (de [1] a [6]): [1] Un nonapéptido o decapéptido seleccionado de péptidos que constan de la secuencia de aminoácidos de Id. de Sec. Nº: 30, 29, 33, 34 40, 46 o 54 para utilizar en el tratamiento o prevención de tumores. [3] Una composición farmacéutica para utilizar en el tratamiento y/o prevención de tumores, en el que la composición farmacéutica comprende uno o más péptidos definidos en la reivindicación 1 o 2. [4] Una vacuna para su uso en el tratamiento o prevención de tumores, en el que la vacuna comprende un péptido 2   definido en la reivindicación 1 o 2 como compuesto activo. [5] La vacuna de la reivindicación 4 para utilizar en el tratamiento o prevención de tumores, que se utiliza para su administración a un sujeto cuyo antígeno HLA es HLA-A02 o HLA-A24. [6] La vacuna de la reivindicación 4 o 5 para utilizar en el tratamiento o prevención de tumores, que se utiliza para suprimir el crecimiento y/o metástasis de tumores malignos. Breve descripción de las Figuras La Fig. 1 muestra la citotoxicidad de los clones de LTC frente a las células diana. La Fig. 2 muestra los resultados de los análisis de tetrámero de HLA en los clones de LTC establecidos: (a) clones de LTC inducidos por los péptidos de esta invención, y células de soporte; y (b) células de soporte (control). La Fig. 3 muestra el efecto de la vacunación utilizando los péptidos de esta invención sobre la supervivencia de ratones BALB/c inoculados con Colon 26. La Fig. 4 muestra el efecto de la vacunación utilizando los péptidos de esta invención sobre el crecimiento de tumores derivados de Colon 26. La Fig. 5 muestra el efecto de la vacunación utilizando los péptidos de esta invención sobre la tasa de supervivencia de ratones inoculados con B16. La Fig. 6 muestra el efecto de la vacunación utilizando los péptidos de esta invención sobre el crecimiento de tumores derivados de melanoma B16. Antes de la exposición mediante inyección subcutánea de células tumorales B16, los RTG A2/Kb se vacunaron dos veces, con un intervalo de una semana, con CD pulsadas con KDR773 (círculos negros), CD sólo (triángulos blancos), o HBSS (cuadrados blancos). La figura muestra el crecimiento tumoral medio (P < 0,01). La Fig. 7 muestra el efecto citotóxico del clon de LTC C29-169 en células positivas para HLA-A24 que presentan péptidos de esta descripción. La Fig. 8 muestra el efecto citotóxico del clon de LTC C29-169 en células positivas para HLA-A24 que presentan péptidos de esta descripción. La Fig. 9 muestra el efecto citotóxico del clon de LTC KDR C85-775 (KWC85-775) en células positivas para HLA- A0201 que presentan péptidos de esta descripción. La Fig. 10 muestra el efecto citotóxico del clon de LTC KDR C85-775 (KWC85-775) en células positivas para HLA- A0201 que presentan péptidos KDR. La Fig. 11 muestra el efecto citotóxico del clon de LTC KDR C51-1328 (KWC51) en células positivas para HLA- A0201 que presentan péptidos de esta descripción. La Fig. 12 muestra el efecto citotóxico del clon de LTC KDR C51-1328 (KWC51) en células positivas para HLA- A0201 que presentan péptidos KDR. La Fig. 13 muestra el efecto citotóxico del clon de LTC KDR C44-773-2L (KWC44-773-2L) en células positivas para HLA-A0201 que presentan péptidos de esta descripción. La Fig. 14 muestra el efecto citotóxico del clon de LTC KDR C44-773-2L (KWC44-773-2L) en células positivas para HLA-A0201 que presentan péptidos de esta descripción. La Fig. 15 muestra el efecto citotóxico del clon de LTC KDR C44-773-2L (KWC44-773-2L) en células positivas para HLA-A0201 que presentan péptidos KDR. La Fig. 16 muestra el efecto inhibidor de cada tipo de anticuerpo en el efecto citotóxico de LTC. La Fig. 17 muestra la actividad inhibitoria de los péptidos de esta descripción en la respuesta angiogénica inducida por las células B16 en RTG A2/Kb. Los ratones se vacunaron dos veces con HBSS, CD no pulsadas o CD pulsadas con los péptidos epítopo de esta descripción (KDR190, KDR772, KDR773, KDR773-2L, KDR775 o KDR1084). Las flechas indican vasos sanguíneos formados de nuevo, que se extienden con un patrón característico en zig-zag. La Fig. 18 muestra el efecto supresor de los péptidos de esta descripción en el aumento de volumen de los tumores humanos en ratones transgénicos. 3   La Fig. 19 muestra el efecto citotóxico del clon de LTC KWC65-190 en células... [Seguir leyendo]

1. Un nonapéptido o decapéptido seleccionado de los péptidos que consisten en la secuencia de aminoácidos de Id. de Sec. Nº: 30, 29, 33, 34, 40, 46 o 54 para utilizar en el tratamiento o prevención de tumores. 2. Un nonapéptido seleccionado de los péptidos que consisten en la secuencia de aminoácidos de Id. de Sec. Nº: 2, 3, 5, 11 o 12 para utilizar en el tratamiento o prevención de tumores. 3. Una composición farmacéutica para utilizar en el tratamiento y/o prevención de tumores, en el que la composición farmacéutica comprende uno o más péptidos definidos en las reivindicaciones 1 o 2. 4. Una vacuna para su uso en el tratamiento o prevención de tumores, en el que la vacuna comprende un péptido definido en las reivindicaciones 1 a 2 como un ingrediente activo. 5. La vacuna de la reivindicación 4 o 5 para su uso en el tratamiento o prevención de tumores, que se utiliza para su administración a un sujeto cuyo antígeno HLA es HLA-A24. 6. La vacuna de la reivindicación 4 o 5 para su uso en el tratamiento o prevención de tumores, que se utiliza para suprimir el crecimiento y/o metástasis de tumores malignos. 33   34     36   37   38   39   SOLUBILIDAD ESPECÍFICA (%) PROPORCIÓN DE E:T   SOLUBILIDAD ESPECÍFICA (%) PROPORCIÓN DE E:T 41   42 SOLUBILIDAD ESPECÍFICA (%)   PROPORCIÓN DE E:T 43 SOLUBILIDAD ESPECÍFICA (%)   PROPORCIÓN DE E:T 44 PÉPTIDO(-)     46 SOLUBILIDAD ESPECÍFICA (%)   PROPORCIÓN DE E:T 47 PÉPTIDO(-)   48   49 TASA DE INHIBICIÓN (%)     51   SOLUBILIDAD ESPECÍFICA (%) PROPORCIÓN DE E:T 52   53 SOLUBILIDAD ESPECÍFICA (%)   PROPORCIÓN DE E:T 54   SOLUBILIDAD ESPECÍFICA (%) PROPORCIÓN DE E:T SOLUBILIDAD ESPECÍFICA (%)   PROPORCIÓN DE E:T 56 SOLUBILIDAD ESPECÍFICA (%)   PROPORCIÓN DE E:T 57 SOLUBILIDAD ESPECÍFICA (%)   PROPORCIÓN DE E:T 58   59 SOLUBILIDAD ESPECÍFICA (%)   PROPORCIÓN DE E:T   61 SOLUBILIDAD ESPECÍFICA (%)   PROPORCIÓN DE E:T 62   63   64   SOLUBILIDAD ESPECÍFICA (%) PROPORCIÓN DE E:T SOLUBILIDAD ESPECÍFICA (%) SOLUBILIDAD ESPECÍFICA (%) PROPORCIÓN DE E:T PROPORCIÓN DE E:T