Nanopartículas que contienen un péptido, vectores que las contienen y utilizaciones farmacéuticas de dichas nanopartículas y vectores.

Nanopartícula que comprende una matriz constituida por lo menos por un polisacárido y por el péptido P140 desecuencia SEC ID nº 1,

o por uno de sus análogos, siendo dicho polisacárido preferentemente un polisacáridoportador de grupo(s) funcional(es) cargado(s) negativamente.

Nanopartículas que contienen un péptido, vectores que las contienen y utilizaciones farmacéuticas de dichas nanopartículas y vectores.

La presente invención tiene por objeto unas nanopartículas que contienen un péptido, así como unos vehículos, con

o sin dispersante, que contienen dichas nanopartículas. La presente invención tiene asimismo por objeto unas utilizaciones farmacéuticas y/o terapéuticas de dichos vectores, en particular para el tratamiento del lupus eritematoso diseminado.

El lupus eritematoso diseminado (LED) es una enfermedad autoinmune inflamatoria crónica muy incapacitante que afecta en la actualidad a varios millones de personas en el mundo. Esta enfermedad resulta de una disfunción del sistema inmunitario que reconoce los elementos de uno mismo como extraños y desarrolla entonces una respuesta inmune incluyendo una producción de anticuerpos contra los propios constituyentes del organismo.

Una vía terapéutica prometedora se basa en la utilización de secuencias peptídicas derivadas de auto-antígenos que pueden modular la respuesta autoinmune interfiriendo con la producción de los auto-anticuerpos. Para ello, la solicitud internacional WO 03/025014 describe la utilización de péptidos específicos en el ámbito del tratamiento del lupus eritematoso diseminado. Más particularmente, esta solicitud internacional describe la utilización del péptido P140, que es un análogo fosforilado sobre el residuo serina en posición 140 del péptido 131-151 de la proteína espliceosomal U1-70K (proteína específica de la partícula U1-snRNP) , en particular en el ámbito del tratamiento del lupus eritematoso diseminado.

En la actualidad, el péptido P140 se administra mediante inyección subcutánea, que no es un modo de administración cómodo para el paciente. Así, se han probado varios modos diferentes de administración. Así, se ha probado la administración intranasal en el ratón pero no es eficaz.

En el campo terapéutico, las vías de administración de los principios activos más habituales son las vías oral, intravenosa, intramuscular o subcutánea. Sin embargo, la vía oral, que es la más fisiológica y la más cómoda para el paciente, no se puede utilizar para numerosas sustancias activas como los péptidos o las proteínas. En efecto, estas macromoléculas de tipo péptido o proteico padecen numerosos ataques a lo largo del tracto gastrointestinal que alteran su estructura y su función biológica. Por otra parte, su paso a través de la pared intestinal está limitado por su tamaño y su carácter hidrófilo. Todo esto explica la poca biodisponibilidad de las proteínas administradas por vía oral (del orden del 1 al 2%) .

Así, uno de los objetivos de la presente invención consiste en mejorar la eficacia del péptido P140 mencionado anteriormente en el marco de una administración por vía oral.

Otro objetivo de la presente invención consiste en proporcionar el péptido P140 en forma encapsulada, administrable por vía oral, y que permita alcanzar el mismo tipo de células con la misma eficacia que cuando se administra el péptido por vía subcutánea.

La presente invención tiene por lo tanto por objetivo proporcionar un sistema de administración por vía oral del péptido P140 mencionado anteriormente, que posee unas características de disponibilidad de dicho péptido comparables a las características de inyección directa en la sangre de dicho péptido.

Otro objetivo de la invención consiste en proporcionar un sistema de administración que permita la liberación de dicho péptido que esté poco o nada desnaturalizado o degradado durante una administración por vía oral.

Otro objetivo de la invención consiste en proporcionar un sistema de administración que permita que dicho péptido alcance y/o atraviese la pared intestinal sin ser desnaturalizado o degradado sustancialmente.

Otro objetivo de la invención consiste en proporcionar un sistema de administración que permita que dicho péptido que ha atravesado la pared intestinal, esté disponible en la sangre, eventualmente después del paso al líquido intersticial.

Otro objetivo de la invención consiste en proporcionar un sistema de administración por vía oral del péptido P140 en el que dicho péptido no está, o está poco desnaturalizado o degradado durante el paso en el tracto gastrointestinal y durante el paso de la pared intestinal, y que permita una disponibilidad inmediata, retardada o prolongada en la sangre.

La presente invención se refiere a unas nanopartículas que comprenden una matriz constituida por lo menos por un polisacárido y un péptido P140 de secuencia SEC ID nº 1, o uno de sus análogos, siendo dicho polisacárido preferentemente un polisacárido portador de grupo (s) funcional (es) cargado (s) negativamente.

El péptido P140 es un péptido de 21 residuos de aminoácidos de una masa molar de 2636 Da que corresponde a la

secuencia siguiente: RIHMVYSKRSGKPRGYAFIEY, en la que la serina en posición 10 está fosforilada (SEC ID nº 1) .

La expresión "análogos del péptido P140" designa unos péptidos que comprenden la secuencia SEC ID nº 1 mencionada anteriormente, en la que uno por lo menos de los aminoácidos comprende una modificación de tipo post-traduccional, en particular mediante fosforilación o acetilación. Entre los análogos, se puede hacer referencia a los péptidos descritos en la solicitud internacional WO 03/025014.

La expresión "grupo (s) funcional (es) cargado (s) negativamente" designa unas funciones químicas tales como, por ejemplo, los grupos carboxílicos.

El polisacárido que constituye la matriz debe ser biocompatible, biodegradable y bioasimilable (metabolizable) .

Según otro modo de realización, las nanopartículas según la invención se pueden preparar a partir de una matriz constituida por una mezcla de polisacáridos y por el péptido P140. Más particularmente, estas nanopartículas pueden comprender una matriz constituida por el péptido P140 y por una mezcla de ácido hialurónico y de quitosano.

Según un modo particularmente ventajoso, las nanopartículas según la invención se obtienen mediante coacervación compleja entre el péptido y el polisacárido.

Según un modo de realización ventajoso, las nanopartículas según la presente invención comprenden una matriz constituida por ácido hialurónico.

El ácido hialurónico es no tóxico, biocompatible y metabolizable ya que está presente en numerosos tejidos.

En este modo de realización, las nanopartículas se obtienen mediante coacervación compleja entre el péptido P140 y el ácido hialurónico.

Preferentemente, el tamaño de las nanopartículas según la invención está comprendido entre aproximadamente 1 nm y aproximadamente 10 !m.

Según un modo de realización particularmente ventajoso, en las nanopartículas según la presente invención, la relación másica entre el polisacárido y el péptido está comprendida entre aproximadamente 0, 1 y aproximadamente 10, y en particular está comprendida entre aproximadamente 0, 5 y aproximadamente 5, y preferentemente es igual a aproximadamente 1.

Esta relación másica influye sobre la relación entre las cargas positivas y negativas presentes en la disolución.

Se ha constatado que el valor de esta relación másica influye sobre el tamaño de las nanopartículas obtenidas.

Preferentemente, cuando el polisacárido es el ácido hialurónico, esta relación es igual a aproximadamente 1 (1, 5 carga negativa para 1 carga positiva) , lo cual permite entonces asegurar la estabilidad coloidal. Cuando esta relación es igual a 1, se obtienen entonces unas nanopartículas esféricas de un diámetro próximo a 200 nm, y de carga de superficie negativa (ξ = -30 mV) , que pueden ser fácilmente centrifugadas y que son estables durante varias semanas a 4ºC.

Las nanopartículas preferidas según la presente invención son unas nanopartículas tales como las definidas anteriormente, en las que la masa molar del polisacárido está comprendida entre aproximadamente 1000 Da y aproximadamente 1500000 Da, y preferentemente entre aproximadamente 15000 Da y aproximadamente 50000 Da, y en particular entre aproximadamente 20000 Da y aproximadamente 30000 Da.

Preferentemente,... [Seguir leyendo]

1. Nanopartícula que comprende una matriz constituida por lo menos por un polisacárido y por el péptido P140 de

secuencia SEC ID nº 1, o por uno de sus análogos, siendo dicho polisacárido preferentemente un polisacárido 5 portador de grupo (s) funcional (es) cargado (s) negativamente.

2. Nanopartícula según la reivindicación 1, caracterizada porque el polisacárido es el ácido hialurónico.

3. Nanopartícula según la reivindicación 1 ó 2, cuyo tamaño está comprendido entre aproximadamente 1 nm y 10 aproximadamente 10 !m.

4. Nanopartícula según cualquiera de las reivindicaciones 1 a 3, caracterizada porque la relación másica entre el polisacárido y el péptido está comprendida entre aproximadamente 0, 1 y aproximadamente 10, y en particular comprendida entre aproximadamente 0, 5 y aproximadamente 5, y preferentemente es igual a aproximadamente 1.

5. Nanopartícula según cualquiera de las reivindicaciones 1 a 4, caracterizada porque la masa molar del polisacárido está comprendida entre aproximadamente 1000 Da y aproximadamente 1500000 Da, y preferentemente entre aproximadamente 15000 Da y aproximadamente 50000 Da, y en particular entre aproximadamente 20000 Da y aproximadamente 30000 Da.

6. Vector complejo para administración por vía oral constituido por un vehículo que comprende por lo menos una nanopartícula según cualquiera de las reivindicaciones 1 a 5.

7. Vector complejo según la reivindicación 6, caracterizado porque comprende un vehículo destinado a una 25 protección gástrica.

8. Vector complejo según la reivindicación 7, caracterizado porque el vehículo está en forma de una matriz esférica

o de una cápsula esférica.

9. Vector complejo según la reivindicación 8, caracterizado porque el vehículo es a base de alginato, en particular en forma de una esfera o de una cápsula de alginato.

10. Vector complejo según la reivindicación 7, caracterizado porque el vehículo contiene un dispersante lipófilo, seleccionado en particular de entre el grupo constituido por los aceites orgánicos o minerales, vegetales o animales,

y sus mezclas, y es preferentemente una mezcla de ésteres de ácidos grasos, en particular seleccionados de entre el grupo constituido por los ácidos caproico, caprílico, cáprico, láurico, mirístico, linoleico y succínico.

11. Composición farmacéutica que comprende por lo menos una nanopartícula según cualquiera de las

reivindicaciones 1 a 5, o por lo menos un vector complejo según cualquiera de las reivindicaciones 6 a 10, en 40 asociación con un vehículo farmacéuticamente aceptable.

12. Medicamento que comprende por lo menos una nanopartícula según cualquiera de las reivindicaciones 1 a 5, o por lo menos un vector complejo según cualquiera de las reivindicaciones 6 a 10.

45 13. Nanopartícula según cualquiera de las reivindicaciones 1 a 5, para su utilización para el tratamiento de enfermedades auto-inmunes, y en particular del lupus eritematoso diseminado.

14. Vector complejo según cualquiera de las reivindicaciones 6 a 10, para su utilización para el tratamiento de las

enfermedades autoinmunes, y en particular del lupus eritematoso diseminado. 50