Modalidades de vacunación.

Una vacuna que contiene de tres a cinco cepas de vacuna de Eimeria seleccionadas de entre E.

maxima ARI-73/97 (NM 98/02796), E. acervulina ARI-77/97 (NM 98/02794), E. tenella ARI-11/98 (NM 98/02795), E. necatrix MCK01 (NM 98/02797) y/o E. necatrix ARI MEDNEC3+8 (NM 99/02118), junto con un excipiente o portador aceptable para su uso veterinario; en la que el número entre paréntesis representa el número de orden bajo el que se depositaron las cepas ante los Laboratorios Analíticos del Gobierno Australiano según el Convenio de Budapest.

La presente invención hace referencia a las cepas de vacunación de Eimeria y las vacunas que incluyen las mismas. [0002] La coccidiosis es una enfermedad de gran importancia económica para la industria avícola intensiva existente en todo el mundo. El agente causal es la Eimeria, un parásito protozoario. [0003] Se han identificado siete especies diferentes de Eimeria en pollos, concretamente E. maxima, E. acervulina, E. necatrix, E. tenella, E. mitis, E. praecox y

E. brunetti. Puede darse que no todas estas especies estén presentes en cualquier país o región. La E. máxima, E. acervulina, E. necatrix y E. tenella son especies frecuentes de Eimeria. [0004] La Eimeria tiene un ciclo de vida complicado. Sus detalles se describen bien, por ejemplo, en Poultr y Coccidiosis: Diagnostic and testing procedures, segunda edición, Pfizer Inc. En resumen, cuando se ingiere un oocisto de coccidia esporulado (infeccioso) , se liberan esporozoitos para iniciar ciclos sexuales y asexuales que conducen al desarrollo de miles de nuevos oocistos, que son expulsados en las heces. Poco después, estos oocistos esporulan y resultan infecciosos para otras aves. Un solo oocisto esporulado puede dar como descendencia incluso diez mil más. La Eimeria produce lesiones en el intestino al destruir las células epiteliales en las que se desarrolla y multiplica, y por traumatismo de la mucosa y submucosa intestinal. [0005] Las diversas especies de Eimeria (que también se pueden denominar coccidia) pueden identificarse mediante las características microscópicas de los oocistos (tamaño, forma, largo y ancho) , la localización preferida de la coccidia en el intestino, la naturaleza de las lesiones producidas, la prevalencia de periodo, el número de veces que se produce la esporulación y el índice reproductivo, pruebas de ADN y la falta de protección cruzada entre especies. Por lo tanto, se puede identificar la infección de una especie particular con precisión general basándose en una o más de estas características. [0006] Los signos clínicos de la coccidiosis incluyen la diarrea, que puede ser mucoide

o con sangre y la deshidratación. Estos síntomas se dan normalmente seguidos de plumaje encrespado, anemia, apatía, pérdida de peso, retracción de la cabeza y el cuello y somnolencia. La coccidiosis en gallinas ponedoras se observa normalmente por la caída en la producción de huevos. Las aves en crecimiento infectadas, pronto dejan de crecer de manera satisfactoria. Con cepas altamente virulentas, la mortalidad en los pollos es generalmente muy alta.

Según cifras de 1997, se crían aproximadamente veinte mil millones de aves al año en todo el mundo. El control de la coccidiosis en una población de aves tan numerosa se ha realizado normalmente mediante fármacos anticoccidiales que han sido eficaces en general. Sin embargo, no sorprende que ahora la resistencia a los fármacos sea un problema puesto que un número creciente de cepas de Eimeria son resistentes a los fármacos quimioterapéuticos. El desarrollo de cepas de Eimeria altamente virulentas y resistentes a los fármacos podría devastar la industria avícola. [0008] El posible control de la coccidiosis mediante vacunación ha adquirido interés con el transcurso de los años, sin que haya habido ningún gran logro. Los intentos de desarrollar vacunas creadas genéticamente o vacunas de subunidades no ha tenido éxito hasta el momento (Shirley, 1992, Br. Vet. J., 148:479) . En Gran Bretaña se ha utilizado una vacuna viva (Paracox, Pitman-Moore) que contiene oocistos de cepas atenuadas de coccidia. [0009] La vacuna viva de Paracox a la que se hace referencia arriba se basa en líneas precoces de diversas especies de Eimeria. Las líneas precoces de Eimeria son poblaciones que completan su ciclo endógeno en el huésped más rápidamente que las cepas de tipo salvaje. El proceso de esta selección fue descrito por primera vez por Jeffers (1975, J. Parasitol. 61, 1083- 1090) . El pasaje seriado en los pollos del primer oocisto producido durante la infección produce parásitos caracterizados por un ciclo de vida abreviado, y posiblemente cierta atenuación de la virulencia. Los problemas asociados con las líneas precoces son el fracaso en la protección contra especies virulentas de Eimeria, una capacidad reproductiva pobre, de manera que no es viable producir una vacuna utilizando tales cepas, y cuestiones de estabilidad asociadas con la atenuación, y mantenimiento de la infectividad. Por ejemplo, Shirley y Bellatti (1988, Re. Vet. Sci., 44:25-28) describen una línea precoz de E. máxima que no protegía adecuadamente de la exposición a cepas heterólogas virulentas. [0010] Martin A.G. et al. (Int. J. Parasitol., vol. 27, nº5, 1997, páginas 527-533) describe la protección cruzada entre cinco cepas de Eimeria maxima, dos cepas de laboratorio y tres cepas de campo de Mar y land (MD) , Carolina del Norte (NC) y Florida (FL) . Mientras que dos cepas de laboratorio y la cepa de NC presentaban protección cruzada entre ellas, las cepas de MD y FL no lo hacían, incluyendo protección únicamente contra la cepa homóloga. Danforth H. D. et al. (Avian Diseases, vol. 41, nº 4, Oct. 1997, páginas 792-801) describe la inmunización de pollos con un solo aislado de campo de Eimeria maxima resistente a fármacos aislado en Mar y land. [0011] La EP 0 047 662 A2 revela E. necatrix atenuada en huevo adecuada para su uso en la producción de una vacuna viva para la prevención y el control de la coccidiosis en las aves de corral. La EP 0 256 878 A2 revela vacunas activas contra la

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coccidiosis en aves domésticas. Estas vacunas contienen cepas precoces atenuadas de especies de Eimeria. La WO 94/16725 A1 muestra que se puede lograr la inmunidad contra la coccidiosis mediante la administración de oocistos esporulados vivos a pollos de un día de edad, sin necesidad de proporcionar una terapia anticoccidial suplementaria. [0012] Los presentes inventores han producido, de forma sorprendente, cepas de vacuna de E. maxima, E. acervulina, E. tenella y E.necatrix, que son fuertemente protectoras frente a cepas virulentas de sus respectivas especies, crecen a un ritmo que permite la producción de vacunas, y son estables. [0013] El aislamiento geográfico de Australia de enfermedades coccidiales extranjeras asegura que las vacunas y las cepas de vacunas aquí descritas son únicas y, por lo tanto, se distinguen claramente de las cepas precoces de Eimeria descritas previamente. [0014] Según un primer aspecto de la presente invención, se proporciona una vacuna que incluye de tres a cinco cepas de E. maxima ARI-73/97, E.acervulina ARI-77/97, E.tenella ARI-11/98, E. necatrix MCK01 y/o E. necatrix ARI-MEDNEC3+8, o antígenos de dichas cepas, en combinación con un portador o excipiente aceptable en uso veterinario, en la que dichos antígenos son capaces de inducir una respuesta inmune protectora en un ave vacunada. [0015] La vacuna puede contener otras especies de Eimeria además de las cepas arriba mencionadas. Por ejemplo, tales especies adicionales pueden ser cepas de Eimeria de E. brunetti, E. mitis, y/o E. praecox y/o una o más cepas de vacuna de E. maxima, E. acervulina, E. necatrix y/o E. tenella. Tales cepas adicionales, pueden no ser tan útiles como las cepas de la presente invención, sin embargo, pueden seguir resultando componentes ventajosos de una composición de vacuna de amplio espectro. La vacuna también puede incluir al menos una cepa adicional no atenuada. Por ejemplo, un modo de realización de la vacuna puede contener E. maxima ARI73/97, E.acervulina ARI-77/97, E.tenella ARI-11/98 y/o E. necatrix MCK01 y/o E. necatrix ARI-MEDNEC3+8, y opcionalmente una o más cepas seleccionadas de entre

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E. brunetti, E. mitis, E. mivati y/o E. praecox para obtener una vacuna polivalente. [0016] Se pueden preparar cepas adicionales de esta invención teniendo competencia como vacuna inmunizando aves con una o más de las cepas de E. maxima ARI-73/97, E.acervulina ARI-77/97, E.tenella ARI-11/98 y/o E. necatrix MCK01, y exponiendo las aves inmunizadas a las cepas candidatas de aislados de campo. Aquellas cepas que producen un gran número de oocistos en las aves inmunizadas, debido a que la vacuna no presenta protección cruzada para ellas (un caso improbable) , son entonces sometidas a pasaje seriado por las aves para obtener una cepa de la invención que sea fuertemente protectora frente a cepas virulentas, teniendo una tasa de reproductividad que permite la producción de la vacuna, es estable, y sensible a los fármacos coccidiostáticos. [0017] Los organismos en las vacunas de la presente invención se encuentran en forma de oocistos o esporocistos enteros y/o fragmentados o esporulados, o antígenos de los... [Seguir leyendo]

1. Una vacuna que contiene de tres a cinco cepas de vacuna de Eimeria seleccionadas de entre E. maxima ARI-73/97 (NM 98/02796) , E. acervulina ARI-77/97 (NM 98/02794) , E. tenella ARI-11/98 (NM 98/02795) , E. necatrix MCK01 (NM 98/02797) y/o E. necatrix ARI MEDNEC3+8 (NM 99/02118) , junto con un excipiente o portador aceptable para su uso veterinario; en la que el número entre paréntesis representa el número de orden bajo el que se depositaron las cepas ante los Laboratorios Analíticos del Gobierno Australiano según el Convenio de Budapest.

2. La vacuna de la reivindicación 1, la cual incluye al menos una cepa adicional de Eimeria no atenuada.

3. La vacuna de la reivindicación 1, la cual incluye E. maxima ARI-73/97, E. acervulina ARI 77/97, E. tenella ARI-11/98, y una o ambas de E. necatrix MCK01 y E. necatrix ARI-MEDNEC3+8.

4. La vacuna de la reivindicación 1, la cual incluye una o más cepas de vacuna de E. brunetti, E. mitis, E. praecox, E. maxima, E. acervulina, E. necatrix y/o E. tenella.

5. La vacuna de la reivindicación 1, la cual incluye una vacuna contra otra enfermedad de las aves de corral.

6. La vacuna de la reivindicación 5, la cual incluye componentes de vacuna eficaces contra una o más enfermedades de la enfermedad de Marek o infecciones por micoplasma o salmonela.

7. La vacuna de la reivindicación 1, en la que dichas cepas se encuentran en forma de oocistos o esporocistos esporulados enteros y/o fragmentados.

8. La vacuna de la reivindicación 1, la cual comprende de 15 a 500 oocistos esporulados por dosis.

9. Una cepa de Eimeria seleccionada del grupo formado por E. maxima ARI-73/97 (NM 98/02796) , E. acervulina ARI-77/97 (NM 98/02794) , E. tenella ARI-11/98 (NM 98/02795) , E. necatrix MCK01 (NM 98/02797) y E. necatrix ARI MEDNEC3+8 (NM 99/02118) ; en la que el número entre paréntesis representa el número de orden bajo el que se depositaron las cepas ante los Laboratorios Analíticos del Gobierno Australiano según el Convenio de Budapest.

10. La cepa de Eimeria de la reivindicación 9 en forma de un oocisto o un oocisto esporulado.