COMPOSICIONES Y MÉTODOS PARA EL TRATAMIENTO DE LESIONES DEL CNS.

Composiciones y métodos para el tratamiento de lesiones del CNS. Antecedentes de la invención Campo de la invención La presente invención se refiere en general a métodos para promover la recuperación neurológica funcional después de una lesión o enfermedad del sistema nervioso central (CNS). En particular, la presente invención se dirige a un método para utilizar la condroitinasa para promover la recuperación neurológica funcional tras una lesión en o a la médula espinal. Las composiciones útiles en este método incluyen formulaciones aceptables de condroitinasa, más particularmente formulaciones de condroitinasa de liberación sostenida. La presente invención también se dirige a un método de promover la recuperación neurológica funcional después de una lesión a la médula espinal por contusión. Descripción de la técnica relacionada La médula espinal es el nervio más grande del cuerpo y está constituido por fibras nerviosas. Estas fibras nerviosas son responsables de los sistemas de comunicación del cuerpo, los cuales incluyen las funciones sensoriales, motoras y autonómicas. Las funciones sensoriales incluyen la capacidad para sentir sensaciones, como el dolor. La función motora incluye la capacidad para mover voluntariamente el cuerpo. Las funciones autonómicas incluyen las funciones corporales involuntarias, por ejemplo, la capacidad para sudar y respirar. El sistema nervioso central incluye el cerebro y la médula espinal. La médula espinal conecta el sistema nervioso periférico (PNS) con el cerebro. Los nervios sensoriales, que entran en la raíz dorsal de la médula espinal, transmiten información sensorial desde los receptores sensoriales del cuerpo al cerebro. Diferentes tipos de sensaciones se envían por rutas sensoriales diferentes. Por ejemplo, el tracto espinotalámico porta sensaciones de dolor y temperatura y el tracto de la columna dorsal porta sensaciones de posición y tacto. Los nervios motores, que salen de los nervios de las raíces ventrales de la médula espinal, transmiten información motora voluntaria desde el cerebro al cuerpo. El sistema nervioso autonómico (ANS) influye en las actividades de los músculos involuntarios, incluido el músculo del corazón, y de las glándulas que liberan hormonas. En particular, el ANS controla los sistemas cardiovascular, digestivo y respiratorio para mantener un ambiente estable dentro del cuerpo. El ANS incluye los nervios simpáticos, que provocan la constricción de los vasos sanguíneos y incrementan el ritmo cardiaco, y los nervios parasimpáticos, que actúan de manera opuesta a los nervios simpáticos dilatando los vasos sanguíneos y disminuyendo el ritmo cardiaco. El daño al sistema nervioso central, incluyendo la médula espinal, da lugar a una pérdida de funciones. Dependiendo del tipo de lesión al sistema nervioso central, la pérdida de funciones puede manifestarse en sí misma en una pérdida de la función sensorial, motora o autonómica o en una de sus combinaciones. Los tipos más comunes de lesiones de la médula espinal (SCI) incluyen contusiones (moretones de la médula espinal) y lesiones por compresión (provocadas por presión sobre la médula espinal). En las lesiones por contusiones, el tipo de lesión más común, con frecuencia se forma una cavidad o agujero en el centro de la médula espinal. Al contrario que las células de los nervios, o neuronas del PNS, las neuronas del CNS no se regeneran después de una lesión. La incapacidad de los axones para regenerarse puede conducir a la pérdida de sensación, función motora y función autonómica, así como a la parálisis permanente. Una razón por la que las neuronas no se regeneran puede ser su incapacidad para atravesar la cicatriz glial que se desarrolla tras una lesión en la médula espinal. El daño causado por la lesión desarrollará una cicatriz glial, la cual contiene moléculas de la matriz extracelular que incluyen proteoglicanos de sufato de condroitina (CSPGs). Los CSPGs inhiben el crecimiento del tejido nervioso in vitro y la regeneración del tejido nervioso en las regiones ricas en CSPGs in vivo. Varias moléculas, y regiones especificadas de las mismas, han sido implicadas en la capacidad para apoyar el brote de las neuritas en una célula neuronal, un proceso también denominado extensión de las neuritas. El término neurita se refiere tanto a las estructuras de los axones como de las dendritas. Este proceso de brote de las neuritas es esencial en el desarrollo y regeneración neural, especialmente después de que la lesión o la enfermedad hayan dañado a las células neuronales. Las neuritas se alargan profusamente durante el desarrollo tanto en el sistema nervioso central como en el periférico de todas las especies animales. Este fenómeno es propio tanto de los axones como de las dendritas. Se sabe que varios polipéptidos, especialmente las moléculas de adhesión celular (CAMs), promueven el crecimiento de las células neurales. Aunque los esfuerzos iniciales en esta área de investigación se concentraron en la proteína fibronectina (FN) que promueve la adhesión sobre la matriz extracelular, también se ha encontrado que otros polipéptidos promueven el crecimiento neural. Por ejemplo, la patente de EE.UU. nº 5.792.743 describe nuevos polipéptidos y métodos para promover el crecimiento neural en el sistema nervioso central de un mamífero administrando una CAM neural soluble, uno de sus fragmentos, o uno de sus productos de fusión Fc. La patente de 2   EE.UU. nº 6.313.265 describe polipéptidos sintéticos que contienen las regiones farmacológicamente activas de CAMs que pueden usarse para promover la regeneración y reparación de los nervios tanto en lesiones de los nervios periféricos como en lesiones en el sistema nervioso central. Aunque útiles, el uso único de proteínas regenerativas puede no ser suficiente para efectuar la reparación de un sistema nervioso dañado. El documento WO/03/04080 describe el uso de enzimas que degradan a los glicosaminoglicanos para tratar el tracto corticoespinal dañado, pero no hace referencia a lesiones por contusiones. Durante aproximadamente las pasadas dos décadas, el conocimiento base de la adhesión y migración celular en matrices extracelulares (ECMs) a nivel molecular se ha expandido rápidamente. La acción de las enzimas y otros polipéptidos que degradan a los componentes de la matriz extracelular y las membranas basales puede facilitar los sucesos de reparación neural mediante una diversidad de mecanismos, que incluyen la liberación de citoquinas enlazantes, y mediante el aumento de la permeabilidad de la matriz, potenciando de este modo la movilidad de las moléculas mediadoras, los factores de crecimiento y los agentes quimiotácticos, así como las células implicadas en el proceso de curación. Por ejemplo, la patente de EE.UU. nº 5.997.863 describe el uso de glicoaminoglicanos para manipular la proliferación celular y promover la curación de las heridas. Las moléculas ECM incluyen los CSPGs inhibidores. Se han identificado componentes de CSPGs como glicoaminoglicanos, sulfato de condroitina (CS) y sulfato de dermatano (DS). La separación de estas moléculas inhibidoras permitiría regenerar y reinervar un área después de una enfermedad o lesión física, así como recuperar las funciones sensoriales, motora y autonómica. Estudios previos han encontrado que las condroitinasas pueden lisar y degradar a los CSPGs incluyendo a CS y a DS. Un estudio encontró que la condroitinasa ABC separó cadenas de glicoaminoglicanos (GAG) en y alrededor de áreas lesionadas de SNC de rata in vivo. La degradación de GAGs promovió la expresión de una proteína asociada al crecimiento, GAP-43, indicando una propensión regeneradora acrecentada en las células tratadas. Sin embargo, esta proteína asociada al crecimiento está asociada con la regeneración de lesiones en nervios periféricos, pero no centrales. Otro estudió encontró que el tratamiento con condroitinasa ABC de médula espinal de rata regeneró in vitro neuronas en un sustrato de una sección de tejido. Este estudio observó que la degradación de CSPGs puede promover los efectos neuroestimuladores de la laminita (Zuo et al., Degradation of chondroitin sulfate proteoglycan enhances the neurite-promoting potential of spinal cord tissue, Exp. Neurol. 154(2): 654-62 (1998)). En un estudio posterior del mismo investigador principal se informó que la inyección de condroitinasa ABC en el sitio del daño al nervio degradó CSPGs e incrementó el ingreso de brotes axonales en las láminas basales del segmento distal del nervio (Zuo et al., Regeneration of axons after nerve transaction repair is enhanced by degradation of chondroitin sulfate proteoglycan. Exp. Neurol. 176(1): 221-8 (2002)). El mismo grupo de investigadores también encontró que los tratamientos con condroitinasa ABC regeneraban axones... [Seguir leyendo]

1. Una enzima condroitinasa ABC para usar en mejorar la recuperación funcional tras una lesión por contusión del sistema nervioso central, enzima que se administra en una cantidad terapéuticamente efectiva. 2. La enzima según la reivindicación 1, en la que la cantidad terapéuticamente efectiva de la enzima condroitinasa ABC comprende una cantidad suficiente para degradar condroitina sulfato proteoglicanos. 3. La enzima según la reivindicación 2, en la que la degradación de los condroitina sulfato proteoglicanos se produce en el sitio de la lesión por contusión. 4. La enzima según la reivindicación 2, en la que la degradación de los condroitina sulfato proteoglicanos se produce fuera del sitio de la lesión por contusión. 5. La enzima según la reivindicación 1, en la que la cantidad terapéuticamente efectiva de la enzima condroitinasa ABC comprende una cantidad suficiente para mejorar la función motora, la función sensorial, la función autonómica o una de sus combinaciones. 6. La enzima según una cualquiera de las reivindicaciones 1 a 5, en la que la condroitinasa es condroitinasa ABCTipoI. 7. La enzima según una cualquiera de las reivindicaciones 1 a 5, en la que la condroitinasa es condroitinasa ABCTipoII. 8. La enzima según una cualquiera de las reivindicaciones 1 a 7, en la que la lesión por contusión comprende una lesión traumática del cerebro. 9. La enzima según una cualquiera de las reivindicaciones 1 a 7, en la que la lesión por contusión comprende una lesión de la médula espinal. 10. La enzima según una cualquiera de las reivindicaciones 1 a 7, en la que la lesión por contusión comprende una lesión de la médula espinal mediante un objeto contundente. 11. La enzima según una cualquiera de las reivindicaciones 9 y 7, en la que se mantiene la morfología gruesa de la médula espinal. 12. La enzima según la reivindicación 9, en la que la lesión de la médula espinal comprende una lesión que da lugar a una afección seleccionada del grupo que consiste de monoplejía, diplejía, paraplejía, hemiplejía y cuadriplejía. 13. La enzima según una cualquiera de las reivindicaciones 1 a 7, en la que la lesión por contusión comprende neuronas rotas o parcialmente cortadas. 14. La enzima según una cualquiera de las reivindicaciones 1 a 7, en la que la lesión por contusión comprende neuronas aplastadas. 15. La enzima según una cualquiera de las reivindicaciones 1 a 7, en la que la lesión por contusión comprende la compresión del sistema nervioso central. 16. La enzima según la reivindicación 15, en la que la compresión es causada por una fuerza traumática en la médula espinal. 17. La enzima según la reivindicación 15, en la que la compresión es causada por un tumor, hemorragia, infarto, proceso infeccioso, estenosis o isquemia. 31   32   33   34     36   37   38   39