Método para aumentar el tiempo de conservación de una composición farmacéutica que comprende

(a) un péptido GLP-1,

(b) un tampón farmacéuticamente aceptable seleccionado de ortofosfato, TRIS, glicina, N-glicilglicina, citrato acetato sódico, carbonato de sodio, glicilglicina, histidina, lisina, arginina, fosfato sódico y citrato sódico o mezclas derivadas, y

(c) un conservante farmacéuticamente aceptable seleccionado de fenol, m-cresol, metil p-hidroxibenzoato, propil p-hidroxibenzoato, 2-fenoxietanol, butil p-hidroxibenzoato, 2-feniletanol, alcohol benzílico, clorobutanol y tiomerosal, o mezclas derivadas,

caracterizado por el hecho de que dicha composición farmacéutica se obtiene a partir de un producto polipeptídico a granel que ha sido sometido a tratamiento a un pH en el intervalo de 8.1 a 11.5, donde dicho producto polipeptídico a granel se prepara por liofilización de una solución o suspensión de dicho péptido GLP-1 a dicho pH, y donde el pH de dicha composición farmacéutica es inferior al pH en el que se trata la solución o suspensión del producto polipeptídico a granel.

Composiciones farmacéuticas de péptido GLP-1 estabilizadas Campo de la invención [0001] La presente invención se refiere al campo de las composiciones farmacéuticas. Más específicamente, la invención pertenece a métodos para preparar composiciones farmacéuticas estables que se obtienen a partir de un producto peptídico a granel que ha sido sometido a tratamiento a pH por encima de pH neutro.

Antecedentes de la invención [0002] Péptidos terapéuticos se usan mucho en la práctica médica. Composiciones farmacéuticas de tales péptidos terapéuticos se requieren por tener un tiempo de conservación de varios años para ser adecuadas para uso común. No obstante, composiciones peptídicas son intrínsecamente inestables debido a sensibilidad hacia degradación física y química. Degradación química implica cambio de enlaces covalentes, tal como oxidación, hidrólisis, racemización o reticulación. Degradación física implica cambios conformacionales en relación a la estructura nativa del péptido, es decir, estructura terciaria y secundaria, tal como agregación, precipitación o adsorción a superficies.

Glucagón se ha usado durante décadas en la práctica médica dentro de diabetes y diferentes péptidos de tipo glucagón se desarrollan para varias indicaciones terapéuticas. El gen de preproglucagón codifica glucagón al igual que péptido de tipo glucagón 1 (GLP-1) y péptido de tipo glucagón 2 (GLP-2) . Análogos de GLP-1 y derivados al igual que el péptido de lagarto homólogo, exendina-4, se desarrollan para el tratamiento de hiperglicemia dentro de diabetes tipo 2. GLP-2 son potencialmente útiles en el tratamiento de enfermedades gastrointestinales. No obstante, todos estos péptidos que abarcan 29-39 aminoácidos tienen un alto grado de homología y comparten varias propiedades, sobre todo su tendencia para agregación y formación de fibrillas insolubles. Esta propiedad parece abarcar una transición de una conformación de hélice alfa predominante a láminas beta (Blundell T.L. (1983) The conformation of glucagon. En: Lefébvre P.J. (Ed) Glucagon I. Springer Verlag, pp 37-55 , Senderoff R.I. et al., J. Pharm. Sci. 87 (1998) 183-189 , WO 01/55213) . Agregación de los péptidos de tipo glucagón se observa principalmente cuando las soluciones de los péptidos se agitan o se revuelven, en la interfaz entre solución y fase gaseosa (aire) , y al contacto con superficies hidrofóbicas como Teflón®.

Así, varios excipientes deben añadirse frecuentemente a composiciones farmacéuticas de los péptidos de tipo glucagón para mejorar su estabilidad. El tiempo de conservación de formulaciones parenterales líquidas de estos péptidos debe ser al menos un año, preferiblemente más tiempo. El periodo en uso donde el producto se puede transportar y agitar diariamente a temperatura ambiente preferiblemente debería ser varias semanas. Así, hay una necesidad de composiciones farmacéuticas de péptidos de tipo glucagón que tienen estabilidad mejorada.

Se ha encontrado inesperadamente que productos de péptido a granel que han sido tratados a un pH por encima de 8, 0 aumentaron la estabilidad de las composiciones farmacéuticas obtenidas a partir de estos productos de péptido a granel.

Definiciones [0006] Lo siguiente es una definición detallada de los términos usados en la especificación. El término "cantidad efectiva" como se utiliza en este caso significa una dosificación que es suficiente para ser eficaz para el tratamiento del paciente comparado sin tratamiento. El término "reconstituido" como se utiliza en este caso en referencia a una composición farmacéutica significa una composición acuosa que ha sido formada por la adición de agua o una solución apropiada acuosa a un material sólido comprendiendo el ingrediente farmacéutico activo. Composiciones farmacéuticas para reconstitución se aplican donde no se puede producir una composición líquida con tiempo de conservación aceptable. Un ejemplo de una composición farmacéutica reconstituida es la solución que resulta cuando adición de agua o de una solución acuosa apropiada a una composición liofilizada. La solución es frecuentemente para administración parenteral y así agua para inyección o cualquier otro solvente apropiado se usa para reconstruir el material sólido. El término "tratamiento de una enfermedad" como se utiliza en este caso significa la gestión y cuidado de un paciente que ha desarrollado la enfermedad, condición o trastorno. El propósito del tratamiento es combatir la enfermedad, condición o trastorno. Tratamiento incluye la administración de los compuestos activos para eliminar o controlar la enfermedad, condición o trastorno, al igual que para aliviar los síntomas o complicaciones asociados a la enfermedad, condición o trastorno. El término "péptido tipo glucacón" como se utiliza en este caso se refiere a los péptidos homólogos derivados del gen de preproglucagón, exendinas y análogos y derivados de estos. Los péptidos derivados del gen de preproglucagón son glucagón, péptido de tipo glucagón 1 (GLP-1) , péptido de tipo glucagón 2 (GLP-2) y oxintomodulina (OXM) . Las exendinas que se encuentran en el monstruo de Gila son homólogos a GLP-1s y también ejercen un efecto insulinotrópico. Ejemplos de exendinas son exendina-4 y exendina-3.

Los péptidos de tipo glucagón tienen las siguientes secuencias:

El término "análogo" como se utiliza en este caso en referencia a un péptido significa un péptido modificado donde uno o más residuos de aminoácidos del péptido han sido sustituidos por otros residuos de aminoácidos y/o donde uno o más residuos de aminoácidos han sido eliminados del péptido y/o donde uno o más residuos de aminoácidos han sido eliminados del péptido y/o donde uno o más residuos de aminoácidos han sido añadidos al péptido. Tal adición o eliminación de residuos de aminoácidos puede tener lugar en el N-terminal del péptido y/o en el C-terminal del péptido. Dos sistemas simples y diferentes se usan frecuentemente para describir análogos: por ejemplo, Arg34-GLP-1 (7-37) o K34R-GLP-1 (7-37) designa un análogo de GLP-1 donde residuos de aminoácidos en la posición 1-6 han sido eliminados, y la lisina de origen natural en la posición 34 ha sido sustituida con arginina (abreviatura estándar de una sola letra para aminoácidos usados según nomenclatura IUPAC-IUB) . El término "derivado" como se utiliza en este caso en relación a un péptido progenitor significa una proteína progenitora químicamente modificada o un derivado análogo, donde al menos un sustituyente no está presente en la proteína progenitora o un derivado análogo, es decir, una proteína progenitora que ha sido modificada de manera covalente. Modificaciones típicas son amidas, carbohidratos, grupos alquilo, grupos acilo, ésteres, pegilaciones y similares. Unos ejemplos de un derivado de GLP-1 (7-37) es Arg34, Lys26 (Nε- (y-Glu (Nahexadecanoil) ) ) - GLP-1 (7-37) . El término "péptido GLP-1" como se utiliza en este caso significa GLP-1 (7-37) , un análogo de GLP-1, un derivado de GLP-1 o un derivado de un análogo de GLP-1.

El término "producto peptídico a granel" o "producto a granel" como se utiliza en este caso significa el producto peptídico purificado que va a usarse para la producción de una composición farmacéutica. Así, el producto a granel se obtiene normalmente como el producto del paso final de purificación, secado o preparación. El producto a granel puede ser de cristales, precipitado, solución o suspensión. El producto a granel es también conocido en la técnica como la sustancia medicinal. El término "punto isoeléctrico" como se utiliza en este caso significa el valor de pH donde la carga de red total de una macromolécula, tal como un péptido, es cero. En péptidos puede haber muchos grupos cargados y en el punto isoeléctrico la suma de todos estas cargas es cero, es decir, el número de cargas negativas equilibra el número de cargas positivas. A un pH por encima del punto isoeléctrico, la carga de red total del péptido será negativa, mientras que a valores de pH por debajo del punto isoeléctrico, la carga de red total del péptido será positiva. El punto isoeléctrico de un péptido se puede determinar por isoelectroenfoque o se puede estimar de la secuencia del péptido por algoritmos computacionales conocidos en la técnica.

Descripción... [Seguir leyendo]

1. Método para aumentar el tiempo de conservación de una composición farmacéutica que comprende

(a) un péptido GLP-1,

(b) un tampón farmacéuticamente aceptable seleccionado de ortofosfato, TRIS, glicina, N-glicilglicina, citrato acetato sódico, carbonato de sodio, glicilglicina, histidina, lisina, arginina, fosfato sódico y citrato sódico o mezclas derivadas, y

(c) un conservante farmacéuticamente aceptable seleccionado de fenol, m-cresol, metil p-hidroxibenzoato, propil p-hidroxibenzoato, 2-fenoxietanol, butil p-hidroxibenzoato, 2-feniletanol, alcohol benzílico, clorobutanol y tiomerosal, o mezclas derivadas,

caracterizado por el hecho de que dicha composición farmacéutica se obtiene a partir de un producto polipeptídico a granel que ha sido sometido a tratamiento a un pH en el intervalo de 8.1 a 11.5, donde dicho producto polipeptídico a granel se prepara por liofilización de una solución o suspensión de dicho péptido GLP-1 a dicho pH, y donde el pH de dicha composición farmacéutica es inferior al pH en el que se trata la solución o suspensión del producto polipeptídico a granel.

2. Método según la reivindicación 1, donde dicho pH está en el intervalo de 8.5 a 9.6.

3. Método según la reivindicación 1, donde dicho pH está en el intervalo de 9.0 a 9.6

4. Método según cualquiera de las reivindicaciones 1-3, donde dicho producto polipeptídico a granel ha sido sometido a tratamiento con un pH en el intervalo definido por un periodo de 10 minutos a 12 horas y a una temperatura de aproximadamente 5 º C a aproximadamente 25 º C.

5. Método según cualquiera de las reivindicaciones 1-3, donde dicho producto polipeptídico a granel ha sido sometido a tratamiento con un pH en el intervalo definido por un periodo de 1 minuto a 30 minutos y a una temperatura de aproximadamente 5 º C a aproximadamente 25 º C.

6. Método según cualquiera de las reivindicaciones 1-5, donde dicha composición farmacéutica es una solución.

7. Método según cualquiera de las reivindicaciones 1-5, donde dicha composición farmacéutica es una suspensión.

8. Método según cualquiera de las reivindicaciones 1-5, donde dicha composición farmacéutica es un sólido.

9. Método según la reivindicación 8, donde dicha composición farmacéutica debe ser reconstituida con agua para inyección u otro solvente adecuado.

10. Método según cualquiera de las reivindicaciones 1-9, donde el pH de dicha composición farmacéutica es al menos

0.8 unidades de pH inferior al pH en el que se trata la solución o suspensión del péptido a granel.

11. Método según cualquiera de las reivindicaciones 1-10, donde el pH de dicha composición farmacéutica es al menos

1.5 unidades de pH inferior al pH en el que se trata la solución o suspensión del péptido a granel.

12. Método según cualquiera de las reivindicaciones precedentes, donde la composición farmacéutica es adecuada para administración parenteral, por ejemplo, por inyección o infusión.

13. Método según cualquiera de las reivindicaciones precedentes, donde el pH de dicha composición farmacéutica o una solución reconstituida de dicha composición farmacéutica es de pH 7.0 a pH 8.0, preferiblemente de pH 7.2 a pH

7.8.

14. Método según todas las reivindicaciones precedentes, donde el punto isoeléctrico de dicho péptido GLP-1 es de 3.0 a 7.0, preferiblemente de 4.0 a 6.0.

15. Método según cualquiera de las reivindicaciones 1-14, donde dicho péptido GLP-1 es seleccionado del grupo que consiste en Gly8-GLP-1 (7-36) -amida, Gly8-GLP-1 (7-37) , Val8-GLP-1 (7-36) -amida, Val8-GLP-1 (7-37) , Val8Asp22-GLP1 (7-36) -amida, Val8Asp22-GLP-1 (7-37) , Val8Glu22-GLP-1 (7-36) -amida, Val8Glu22-GLP-1 (7-37) , Val8Lys22-GLP-1 (7-36) amida, Val8Lys22-GLP-1 (7-37) , Val8Arg22-GLP-1 (7-36) -amida, Val8Arg22-GLP-1 (7-37) , Val8His22-GLP-1 (7-36) -amida, Val8His22-GLP-1 (7-37) , Val8Trp19Glu22-GLP-1 (7-37) , Val8Glu22Val25-GLP-1 (7-37) , Val8Tyr16Glu22-GLP-1 (7-37) , Val8Trp16Glu22-GLP-1 (7-37) , Val8Leu16Glu22-GLP-1 (7-37) , Val8Tyr18Glu22-GLP-1 (7-37) , Val8GlU22HiS37-GLP-1 (7-37) , Val8Glu22Ile33-GLP-1 (7-37) , Val8Trp16Glu22Val25Ile33-GLP-1 (7-37) , Val8Trp16Glu22Ile33-GLP-1 (7-37) , Val8Glu22Val25Ile33-GLP-1 (7-37) , Val8Trp16Glu22Val25-GLP-1 (7-37) , y péptidos químicamente modificados de estos que han sido modificados de manera covalente con amidas, carbohidratos, grupos alquilo, grupos acilo, ésteres o pegilaciones.

16. Método según cualquiera de las reivindicaciones 1-14, donde dicho péptido GLP-1 es Arg34, Lys26 (Nε- (y-Glu (Nahexadecanoil) ) ) -GLP-1 (7-37) .

17. Método según cualquiera de las reivindicaciones 1-16, donde dicha solución o suspensión del producto polipeptídico 5 a granel se somete a tratamiento con un pH de 9.5, y el pH de dicha composición farmacéutica es 7.4.

18. Método según cualquiera de las reivindicaciones 1-17, donde la concentración de dicho péptido GLP-1 en la composición farmacéutica es de 0.1 mg/mL a 50mg/mL, de 0.1 mg/mL a 25mg/mL, de 1 mg/mL a 25mg/mL, de 1 mg/mL a 10mg/mL, o de 3mg/ml a 8mg/ml.

19. Método según cualquiera de las reivindicaciones precedentes, que comprende un agente de isotonicidad.

20. Método según la reivindicación 19, donde dicho agente de isotonicidad es cloruro sódico, xilitol, manitol, sorbitol,

glicerol, glucosa, maltosa, sacarosa, L-glicina, L-histidina, arginina, lisina, isoleucina, ácido aspártico, triptófano, 15 treonina, dimetil sulfona, polietilenoglicol, propilenoglicol o mezclas derivadas.

21. Método según cualquiera de las reivindicaciones precedentes, que comprende un tensioactivo.