Agente de contraste para los ganglios linfáticos.

Uso de un agente de contraste no radiomarcado que contiene partículas de dextrano fisiológicamentetolerables y farmacéuticamente inocuas que presentan un peso molecular de 1 a 5 millones y que en el 80% o más,

con respecto al número de partículas, presentan un tamaño de partícula en el intervalo de 30 a 300 nm y que tienen un colorque puede distinguirse a simple vista del color del tejido humano para la visualización del ganglio o los ganglioscentinela de un paciente de tumores.

Agente de contraste para los ganglios linfáticos La invención se refiere a un agente de contraste a base de colorantes para la visualización de ganglioslinfáticos, en particular para la visualización de ganglios linfáticos centinela. Tales agentes de contraste sirven de granayuda, por ejemplo, a un cirujano durante la operación de un tumor, para la identificación y posterior extirpación de un ganglio linfático. Además, la invención se refiere a procedimientos para la preparación de dichos agentes de contraste y a su uso para diagnóstico en la medicina.

ANTECEDENTES DE LA INVENCIÓN

Los tumores malignos más frecuentes en humanos diseminan sus tumores secundarios en primer lugar en la correspondiente zona de drenaje linfático. De esta manera se producen metástasis en los ganglios linfáticos. Por lotanto, en la extirpación quirúrgica de tumores, generalmente se extirpan las cadenas ganglionares cercanas al tumor de la manera más completa posible. Seguidamente, los ganglios linfáticos extirpados se analizan con respecto a lapresencia de metástasis en el laboratorio de patología. Del resultado depende el tratamiento posterior. Además de los requerimientos quirúrgicos y del gran número de pruebas histomorfológicas, este procedimiento puede suponer, fundamentalmente después de la operación, un perjuicio considerable para la salud de los pacientes, por ejemplo porimpedimento del drenaje linfático, la formación de cicatrices, daños en los nervios, etc.

Según el concepto que se denomina del ganglio linfático centinela, en la formación de tumores secundarios, enprimer lugar se ve afectado el ganglio que se encuentra situado el primero en la zona de drenaje del tumor (Büchels HK, Vogt H, Wagner T, Steinfeld D, Sagasser J, Sentinel-Lymphonodektomie beim Mammakarzinom, Der Nuklearmediziner1999, 22, 261-267) . Al limitarse a la extirpación de este ganglio (o de estos ganglios en caso de varias zonas de drenaje) y a la comprobación de la ausencia de metástasis en este ganglio mediante un, así denominado, corte rápido durante la operación, dicha operación puede finalizarse en este estadio. De este modo, los requerimientos quirúrgicos ehistomorfológicos y el perjuicio para los pacientes serían mucho menores. Este "principio del ganglio linfático centinela" está ampliamente establecido en la actualidad para la extirpación quirúrgica de melanomas y se encuentra en la fase deensayo clínico para muchos otros tipos de tumores (Vogt H, Wengenmair H, Kopp J, Dorn R, Gröber S, Heidenreich P, Der Sentinel-Lymphknoten (SLN) : prÃ- und intraoperative nuklearmedizinische Diagnostik, Der Nuklearmediziner 1999, 22, 233-242; Balch CM, Lange JR, Lymphatic Mapping and Sentinel Node Lymphadenectomy for Cancer: An Overview, Annals of Surgical Oncology 2001, 8 (9S) , 1-4; Zervos EE, Burak WE, Lymphatic Mapping in Solid Neoplasms: State of the Art, Cancer Control 2002, 8 (3) , 189-202) .

En la actualidad se emplean fundamentalmente dos principios metodológicos para la obtención de los ganglioscentinela:

En uno de ellos se marcan radiactivamente partículas coloidales que se hallan en disolución con tecnecio-99m y se inyectan antes de la operación en la proximidad inmediata del tumor. Las partículas se transportan entonces a través de las vías linfáticas y se almacenan en el ganglio o los ganglios linfáticos centinela. Su detección se realizanormalmente en dos etapas: a) el día anterior a la operación mediante detección de la radiactividad por medio degammagrafía de cuerpo entero y b) durante la operación con sondas gamma construidas especialmente para ello comodetectores de radiactividad. Sin embargo, las desventajas de este procedimiento son considerables (véase Heidenreich P, Vogt H, Bachter D, Büchels H, Steinfeld D, Wawroschek F, Wengenmair H, Wagner T, Das Konzept des WÃchterlymphknotens, Dt. Ãrzteblatt 2001, 98, A534-540) :

• Requiere la disponibilidad de un departamento de medicina nuclear.

• Es extraordinariamente costoso desde el punto de vista técnico. Además de la gammagrafía de cuerpoentero son necesarias sondas gamma construidas especialmente, que deben ser distintas en función de la zona de laoperación.

• Conlleva la exposición a radiación del equipo quirúrgico, los pacientes y los patólogos y requiere tomarlas precauciones correspondientes.

• En ocasiones no es posible la localización inequívoca del ganglio linfático centinela durante la operación por limitaciones de espacio o cuando el ganglio linfático centinela se encuentra muy próximo al punto deinyección, en el que se retiene la mayor parte de la radiactividad que de este modo irradia en exceso el ganglio linfático.

A pesar de estas desventajas, en ausencia de alternativas mejores, este procedimiento se usa actualmente enmuchos hospitales.

En el otro procedimiento, para la visualización de los ganglios linfáticos se inyectan colorantes azules biocompatibles en el entorno inmediato del tumor poco antes de la operación. De este modo se tiñen las vías linfáticas ylos ganglios linfáticos. Pero este procedimiento también tiene sus desventajas (Bachter D, Starz H, Volkmar C, Vogt H, Büchels H, Balda BR, Die Sentinel-Lymphonodektomie beim malignen Melanom, Der Nuklearmediziner 1999, 22, 245252) :

• Aunque los colorantes que se emplean actualmente tiñen los nódulos centinela al principio, no sonretenidos completamente por estos, sino que los atraviesan. Por lo tanto, también tiñen después otros ganglios linfáticosmás alejados, de modo que el ganglio centinela no siempre puede determinarse inequívocamente. A consecuencia deello, el cirujano se ve obligado a extirpar numerosos ganglios linfáticos de manera innecesaria, lo que supone un posoperatorio más oneroso para el paciente.

• Los colorantes pasan a la sangre y se eliminan a través de la bilis y la orina. El paciente presenta una coloración azul que puede durar algunos días.

Las desventajas de los dos procedimientos pueden reducirse en parte por la combinación de ambas técnicas, de modo que, p. ej., una orientación aproximada por la sonda gamma puede mejorarse mediante la tinción de los ganglios linfáticos (Zervos EE, Burak WE, Lymphatic Mapping in Solid Neoplasms: State of the Art, Cancer Control2002, (8) 3, 189-202) . Con una combinación tal se han conseguido los mejores resultados hasta el momento (Allan R, Sentinel node localization: do or dye alone? Br J Radiol 2001, 74, 475-477) . Sin embargo, los requerimientos relativos a aparatos y preparaciones son entonces muy elevados.

El documento WO 00/35490 describe agentes de contraste a base de un conjugado de una macromolécula, como p. ej., dextrano, y un colorante, como p. ej., un colorante de triazina, para uso en el diagnóstico de ganglios linfáticos.

El documento US 6.205.352 describe una composición no radiactiva para la identificación de nódulos linfáticoscentinela a simple vista que se compone de partículas, como p. ej., microesferas o liposomas, que portan un colorante.

RESUMEN DE LA INVENCIÓN

Partiendo de este estado de la técnica, el objetivo en que se basa la invención es poner a disposición unacomposición para un procedimiento de visualización de ganglios linfáticos que no presente las desventajas de losprocedimientos conocidos anteriormente discutidos. En particular, deberá ponerse a disposición un procedimientoigualmente fiable y menos costoso que el procedimiento radiológico de diagnóstico de ganglios linfáticos centinela, quees el más empleado hasta ahora.

Además, según la invención deberá ponerse a disposición una composición que pueda emplearse para unprocedimiento tal.

Este objetivo se consigue según la invención mediante la puesta a disposición del uso de un agente de contraste no radiomarcado que contiene partículas de dextrano fisiológicamente tolerables y farmacéuticamente inocuas, que presentan un peso molecular de 1-5 millones y que en el 80% (respecto al número de partículas) o máspresentan un tamaño de partícula en el intervalo de 30 a 300 nm y que tienen un color que puede distinguirse a simplevista del color del tejido humano, para la visualización del ganglio o los ganglios linfáticos centinela de un paciente con tumores.

La invención pone también a disposición un kit que comprende un primer recipiente con el agente de contrasteno radiomarcado que comprende como componente fundamental partículas de dextrano fisiológicamente tolerables y farmacéuticamente inocuas, que presentan un peso molecular de 1-5 millones y que... [Seguir leyendo]

1. Uso de un agente de contraste no radiomarcado que contiene partículas de dextrano fisiológicamentetolerables y farmacéuticamente inocuas que presentan un peso molecular de 1 a 5 millones y que en el 80% o más, con respecto al número de partículas, presentan un tamaño de partícula en el intervalo de 30 a 300 nm y que tienen un colorque puede distinguirse a simple vista del color del tejido humano para la visualización del ganglio o los ganglioscentinela de un paciente de tumores.

2. Uso según la reivindicación 1, caracterizado porque las partículas están teñidas con un colorante farmacéuticamente aceptable.

3. Uso según la reivindicación 2, caracterizado porque el colorante tiene un máximo de absorción en el intervalo de 550 a 680 nm o un máximo de emisión en el intervalo de 380 a 780 nm después de una excitación en el intervaloUV/visible.

4. Uso según una de las reivindicaciones precedentes, caracterizado porque el 90% o más de las partículaspresentan un tamaño de partícula en el intervalo de 30 a 300 nm.

5. Uso según una de las reivindicaciones precedentes, caracterizado porque la tinción de las partículas por elcolorante tiene lugar mediante interacciones hidrófobas, iónicas o covalentes o mediante la formación de complejos, de tal modo que las partículas no liberan más del 5% en peso, como máximo, del colorante unido originalmente en eldisolvente previsto para la administración en 24 horas a 37º C.

6. Uso según una de las reivindicaciones precedentes, caracterizado porque el colorante se elige entre los colorantes azoicos, bisazoicos, trisazoicos, diarilmetánicos, triarilmetánicos, antraquinónicos, ftalocianinas colorantes carbonílicos aromáticos policíclicos, colorantes de trifenodioxazina, colorantes nitrosos, colorantes de índigo, colorantesde formazán (complejos de formazán y cobre) y azaanulenos.

7. Uso según la reivindicación 6, caracterizado porque el colorante se elige entre azul ácido 40, verde ácido 27, negro de amida, azul cielo de Chicago, azul Cibacron F3G-A, azul Cibacron F-R, azul Cibacron FN-R, azul Cibacron P3R, azul brillante Cibacron H-GR, azul de Evans, fluoresceína, carmín de índigo, tetrasulfonato de índigo, azul deisosulfano, azul de metileno, azul monastral, azul patente V, rodamina y azul de tripano.

8. Uso según una de las reivindicaciones precedentes, caracterizado porque el colorante es un colorante fluorescente, que al ser irradiado con UV o luz visible, emite una luz en el intervalo de longitudes de onda d.

38. 780 nm.

9. Uso según una de las reivindicaciones precedentes, caracterizado porque el agente de contraste se encuentraen forma estéril, apirógena y liofilizada.

10. Uso según una de las reivindicaciones 1 a 8, caracterizado porque el agente de contraste se encuentra como suspensión de partículas en un disolvente acuoso farmacéuticamente aceptable, estéril y apirógeno.

11. Uso según una de las reivindicaciones precedentes para la visualización del ganglio o los ganglios linfáticos centinela en un melanoma, un cáncer de mama, un cáncer cervical o un cáncer de próstata.

12. Kit que comprende un primer recipiente con el agente de contraste no radiomarcado que comprende, comocomponente fundamental, partículas de dextrano fisiológicamente tolerables y farmacéuticamente inocuas quepresentan un peso molecular de 1 a 5 millones y que en el 80% o más, con respecto al número de partículas, presentanun tamaño de partícula en el intervalo de 30 a 300 nm y que tienen un color que puede distinguirse a simple vista delcolor del tejido humano y un segundo recipiente que contiene una disolución de cloruro de estaño (II) .

13. Agente de contraste radiomarcado que puede obtenerse por mezcla de un agente de contraste no radiomarcado, que comprende como componente fundamental partículas de dextrano fisiológicamente tolerables yfarmacéuticamente inocuas que presentan un peso molecular de 1 a 5 millones y que en el 80% o más, con respecto alnúmero de partículas, presentan un tamaño de partícula en el intervalo de 30 a 300 nm y que tienen un color que puede distinguirse a simple vista del color del tejido humano, con una disolución de cloruro de estaño (II) , neutralización yreacción con 99mTc-pertecnetato.