VACUNA PARA LA PREVENCIÓN DEL PALUDISMO.

La presente solicitud se refiere a la prevención del paludismo mediante la administración de una vacuna. Más particularmente, la presente invención se refiere a una vacuna contra la infección por paludismo que comprende la administración de esporozoitos atenuados a un humano o animal. Introducción y descripción de la técnica anterior El paludismo es una enfermedad que afecta a entre 300 y 500 millones de personas, causa entre uno y tres millones de muertes al año y tiene un enorme impacto económico en los países en desarrollo, especialmente en el África subsahariana [1, 2]. El Plasmodium falciparum es el organismo responsable de la mayoría de muertes por paludismo que se producen en todo el mundo. La Organización Mundial del Turismo ha informado de que, de los casi 700 millones de desplazamientos turísticos internacionales registrados en todo el mundo durante el año 2000, aproximadamente 9 millones tuvieron como destinación África Occidental, África Central y África Oriental, 37 millones correspondieron al Sudeste Asiático, 6 millones al sur de Asia y 10 millones a Oceanía [3]. Se calcula que más de 10.000 viajeros procedentes de América del Norte, Europa y Japón contraen paludismo cada año. Durante más de cien años, en todas las campañas militares en las que se ha transmitido el paludismo, el ejército de los EE.UU. ha sufrido más bajas por causa de esta enfermedad que por el fuego enemigo. Se calcula que debido al paludismo se perdieron 12.000.000 de jornadas laborales durante la Segunda Guerra Mundial y 1,2 millones durante el conflicto de Vietnam [4]. La transmisión del parásito Plasmodium (el parásito protozoario que causa el paludismo) se produce a través de la picadura de una hembra de mosquito Anopheles infectada, cuyo periodo de actividad comprende el atardecer y el amanecer. Los esporozoitos migran a través del torrente sanguíneo desde el lugar de la picadura hasta el hígado, donde se multiplican dentro de los hepatocitos, produciendo, en el caso del P. falciparum, entre 10.000 y 40.000 descendientes por célula infectada. En esta fase hepática, los parásitos expresan un conjunto de antígenos que no se expresan en los esporozoitos. Esta nueva generación de parásitos vuelve a penetrar en el torrente sanguíneo en forma de merozoitos, que expresan un conjunto de antígenos diferentes de los expresados en las fases esporozoítica y hepática temprana, e invaden los eritrocitos, donde una multiplicación adicional incrementa el número de parásitos en un factor comprendido entre aproximadamente 10 y 20 cada 48 horas. A diferencia del desarrollo de entre cinco y diez días en el hígado, que no produce ningún síntoma ni señales de enfermedad, la infección en fase sanguínea sin tratar causa hemólisis, escalofríos, fiebre alta y postración. En el caso de la P. falciparum, la más peligrosa de las cuatro especies de Plasmodium que infectan a los seres humanos, la enfermedad presenta como complicaciones la alteración del flujo sanguíneo microcirculatorio y cambios metabólicos en órganos vitales tales como el cerebro, el riñón y el pulmón, que con frecuencia conducen a la muerte si no se tratan urgentemente. Encontrar una vacuna eficaz contra el paludismo causado por P. falciparum sigue siendo uno de los grandes retos de la medicina. A pesar de los más de cien años de esfuerzos y los cientos de millones de dólares invertidos en investigación, de la dedicación de toda una vida de muchos médicos y científicos esforzados y de las muchas y prometedores vacunas experimentales anunciadas, actualmente no se comercializa ninguna vacuna que puede aliviar una de las grandes plagas infecciosas de la humanidad. Hace una generación, las iniciativas de salud pública con utilización de cloroquina, DDT y programas de control de vectores parecían llamadas a reducir la amenaza mundial del paludismo por P. falciparum a la insignificancia. La falta de una vacuna eficaz dificultó dichos esfuerzos, pero el control continuado de la enfermedad parecía inminente. Finalmente, las promesas de éxito próximo resultaron efímeras, debiéndose dicho fracaso a múltiples factores. Los parásitos resultaron cada vez más resistentes a los fármacos antipalúdicos asequibles y muy eficaces, las medidas de control de vectores prescribieron y las migraciones, las guerras y la penuria económica se hicieron cada vez más comunes en las zonas endémicas de los países en desarrollo. A consecuencia de todo ello, el paludismo por P. falciparum ha experimentado un rebrote: cada año pone en situación de riesgo a 2.500 millones de personas, provoca entre 300 y 900 millones de infecciones y causa la muerte de entre 1 y 3 millones de personas. Cada vez se contempla más el paludismo por P. falciparum a la vez como una causa y como una consecuencia cruel de los muchos problemas sociales, económicos, ambientales y políticos que azotan a los países en desarrollo, y se considera un serio impedimento para resolver todos estos complejos problemas. Quizá sea posible controlar el paludismo por P. falciparum en los países desarrollados sin una vacuna eficaz. En la práctica, dada la realidad social, política y económica, en el contexto de la presente invención se cree que una vacuna puede ser un componente esencial de un programa de control continuado y que la misma resultará necesaria para una campaña mundial de erradicación. En este contexto, el período moderno en el desarrollo de la vacuna contra el paludismo ha resultado especialmente frustrante. Desde principios de 1980, se han producido espectaculares avances tecnológicos en biología molecular y 2 E03789967 03-11-2011   medicina. Estos avances han acelerado la identificación de proteínas y epítopos de P. falciparum específicos de fase, así como los mecanismos y respuestas inmunitarias del huésped. Este conocimiento se ha traducido en una serie de nuevas vacunas experimentales [5, 6]. En cierto sentido, esta época moderna ha constituido la época dorada de la investigación de la vacuna contra el paludismo y los ensayos en humanos. Sin embargo, a pesar de los esfuerzos titánicos llevados a cabo por los investigadores del paludismo, la mayor parte de estas vacunas no han logrado proporcionar ningún tipo de inmunidad protectora en los seres humanos, y únicamente en una se ha demostrado una protección a corto plazo reproducible contra la infección en el 40%-70% de los receptores [7-9]. Con tiempo y recursos suficientes, estas estrategias de vacunación u otras aún por desarrollarse pueden conducir finalmente a una vacuna consistente. Sin embargo, en una reciente sesión de los Keystone Symposia titulada Malarias Challenge: From lnfants to Genomics to Vaccines [6] se preguntó a los participantes cuándo creían que se podría lanzar la vacuna contra el paludismo como producto comercial. Muchos de los presentes opinaron que la primera vacuna no saldría hasta entre 2016 y 2025. El responsable de las investigaciones de Glaxo Smith Kline (GSK) para desarrollar una vacuna de proteína de circunsporozoito de P. falciparum (PfCSP) recombinante fue quien expresó un mayor optimismo. Declaró que, si todo iba bien, esta vacuna de proteína única podría lanzarse al mercado al cabo de 7 u 8 años (entre 2009 y 2010). Teniendo en cuenta que tanto GSK como el ejército de los EE.UU. han estado trabajando en una vacuna de proteína recombinante PfCSP desde la clonación de la PfCSP en 1984 [10], y que muchos expertos en paludismo han expresado sus dudas en cuanto a la posibilidad de que una vacuna de proteína única resulte suficiente para controlar el paludismo de forma continuada, la expectativa mencionada de más de 25 años para el desarrollo de una vacuna de proteína única ofrece una perspectiva desalentadoramente realista sobre las posibilidades de desarrollar vacunas que reduzcan realmente los estragos de esta enfermedad. Inmunidad protectora tras inmunización con esporozoitos atenuados mediante radiación: En 1967, Nussenzweig documentó que la administración intravenosa de esporozoitos de P. berghei atenuados mediante radiación a ratones A/J los protegía de la provocación con esporozoitos infecciosos de P. berghei [11]. Estos estudios en roedores proporcionaron el impulso para llevar a cabo estudios en humanos y, a principios de 1970, dos grupos de trabajo establecieron que la inmunización de voluntarios humanos mediante picaduras de mosquitos irradiados portadores de esporozoitos de P. falciparum en sus glándulas salivales era capaz de protegerlos contra la provocación con esporozoitos de P. falciparum plenamente infecciosos [12-19]. Estos estudios demostraron que era posible conseguir una vacuna contra el paludismo que ofreciera inmunidad protectora estéril. Sin embargo, la única manera de producir esporozoitos en ese momento era infectar a un voluntario con P. falciparum, tratarlo con dosis de cloroquina para... [Seguir leyendo]

1. Vacuna que comprende una especie aislada, metabólicamente activa, atenuada, del parásito esporozoítico de Plasmodium, siendo dicha especie seleccionada de entre el grupo constituido por Plasmodium falciparum y Plasmodium vivax, y un vehículo, para su utilización en la estimulación de una respuesta inmunitaria y en el conferimiento de inmunidad protectora en huéspedes humanos mediante administración parenteral no intravenosa. 2. Vacuna según la reivindicación 1, en la que dichos parásitos esporozoíticos se obtienen a partir de glándulas salivales del mosquito Anopheles disecadas manualmente. 3. Vacuna según cualquiera de las reivindicaciones 1 a 2, que comprende esporozoitos de Plasmodium falciparum y por lo menos una especie adicional de esporozoitos de Plasmodium. 4. Vacuna según cualquiera de las reivindicaciones 1 a 3, en la que dichos parásitos esporozoíticos pueden invadir las células de dicho huésped. 5. Vacuna según la reivindicación 4, en la que dichas células comprenden células hepáticas, dichos parásitos esporozoíticos inducen la ruptura de las células hepáticas y dichos parásitos esporozoíticos no pueden experimentar un desarrollo posterior en el interior de los eritrocitos huésped. 6. Vacuna según cualquiera de las reivindicaciones 1 a 5, en la que la atenuación se alcanza a través de unos medios de alteración génica. 7. Vacuna según la reivindicación 6, en la que dichos medios se seleccionan de entre el grupo constituido por irradiación, manipulación genética y tratamiento de esporozoitos con productos químicos. 8. Vacuna según cualquiera de las reivindicaciones 1 a 7, que comprende esporozoitos de Plasmodium atenuados por radiación. 9. Vacuna según la reivindicación 8, en la que la dosis de radiación atenuante es de por lo menos 12.000 cGy y no mayor de 23.000 cGy. 10. Vacuna según la reivindicación 9, en la que la dosis de radiación atenuante es de aproximadamente 15.000 cGy. 11. Vacuna según cualquiera de las reivindicaciones 1 a 10, que comprende por lo menos 1.000 esporozoitos, pero no más de 10.000.000 esporozoitos. 12. Vacuna según cualquiera de las reivindicaciones 1 a 11, útil para su administración a huéspedes humanos con el fin de prevenir la enfermedad específica de paludismo en dichos huéspedes tras la introducción posterior en dichos huéspedes de esporozoitos infecciosos de Plasmodium. 13. Vacuna según la reivindicación 1, en la que dicha inmunidad protectora resulta suficiente para prevenir el paludismo en sustancialmente la totalidad de dichos huéspedes tras la provocación posterior con un parásito de Plasmodium. 14. Kit farmacéutico de vacunación para estimular una respuesta inmunitaria y conferir inmunidad protectora a huéspedes humanos frente a uno o más patógenos causantes del paludismo, comprendiendo dicho kit una vacuna de parásitos esporozoíticos de Plasmodium aislados, metabólicamente activos, atenuados, según las reivindicaciones 1 a 13, un vehículo y unos medios para su administración parenteral no intravenosa. 15. Kit de vacunación según la reivindicación 14, en el que dichos medios son una aguja. 16. Kit de vacunación según la reivindicación 14, en el que dichos medios son una matriz de microagujas. 17. Kit de vacunación según la reivindicación 14, en el que dichos medios son un inyector balístico sin aguja. 18. Kit de vacunación según cualquiera de las reivindicaciones 14 a 17, en el que dicha vacuna resulta útil para su administración a huéspedes humanos con el fin de prevenir la enfermedad específica de paludismo en dichos huéspedes, tras la introducción posterior en dichos huéspedes de esporozoitos infecciosos de Plasmodium. 19. Kit de vacunación según la reivindicación 14, en el que dicha inmunidad protectora resulta suficiente para prevenir el paludismo en sustancialmente la totalidad de dichos huéspedes tras la provocación posterior con un parásito de Plasmodium. 20. Composición que comprende parásitos esporozoíticos de Plasmodium aislados, metabólicamente activos, atenuados, según las reivindicaciones 1 a 13, para su utilización en la obtención de una respuesta inmunitaria y el 17 E03789967 03-11-2011   conferimiento de inmunidad protectora en huéspedes humanos frente a uno o más patógenos causantes del paludismo mediante la administración parenteral no intravenosa por lo menos de una dosis de vacuna. 21. Composición según la reivindicación 20, formulada para la administración posterior a dichos huéspedes de una o más dosis de refuerzo de vacuna. 22. Composición según la reivindicación 20 ó 21, en la que la dosis de vacuna comprende un componente de subunidad específico de Plasmodium seleccionado de entre el grupo constituido por proteína nativa, proteína recombinante, virus recombinante, bacteria recombinante, parásito recombinante, ADN y ARN. 23. Composición según cualquiera de las reivindicaciones 20 a 22, en la que dicha respuesta inmunitaria es terapéutica para un huésped infectado con esporozoitos de la especie Plasmodium. 24. Composición según cualquiera de las reivindicaciones 20 a 23, en la que dicha composición se formula para atenuar la enfermedad específica de paludismo en dichos huéspedes, resultando dicha enfermedad de la introducción en dichos huéspedes de esporozoitos infecciosos de Plasmodium posterior a dicha administración de dicha dosis de vacuna. 25. Composición según cualquiera de las reivindicaciones 20 a 23, en la que dicha composición previene la enfermedad específica de paludismo en dichos huéspedes, tras la introducción en dichos huéspedes de esporozoitos infecciosos de Plasmodium con posterioridad a dicha administración de dicha dosis de vacuna. 26. Composición según cualquiera de las reivindicaciones 20 a 25, en la que dicha administración es una inoculación en tejido huésped seleccionada de entre un grupo constituido por administración subcutánea, dérmica, muscular, epidérmica, mucosa, submucosa y cutánea. 27. Composición según cualquiera de las reivindicaciones 20 a 26, en la que dichos parásitos esporozoíticos son aislados además de una sola especie seleccionada de entre el grupo constituido por Plasmodium falciparum, Plasmodium vivax, Plasmodium ovale, Plasmodium knowlesi y Plasmodium malariae. 28. Composición según cualquiera de las reivindicaciones 20 a 26, en la que dichos parásitos esporozoíticos son aislados además de por lo menos dos especies seleccionadas de entre el grupo constituido por Plasmodium falciparum, Plasmodium vivax, Plasmodium ovale, Plasmodium knowlesi y Plasmodium malariae. 29. Composición según la reivindicación 20, en la que dichos esporozoitos son irradiados mientras se encuentran dentro de los mosquitos. 30. Composición según la reivindicación 21, en la que dichas una o más dosis de refuerzo de vacuna comprenden por lo menos 1.000 esporozoitos, pero no más de 10.000.000 esperozoitos. 18 E03789967 03-11-2011