PROCEDIMIENTO PARA REALIZAR EL SEGUIMIENTO POSTOPERATORIO DE PACIENTES CON CÁNCER COLORRECTAL MEDIANTE LA VALORACIÓN EN SUERO O PLASMA HUMANO DE LA GLICOPROTEÍNA SOLUBLE CD26.

La invención constituye un nuevo procedimiento para realizar el seguimiento postoperatorio de pacientes con cáncer colorrectal por medio de la valoración del sCD26 en muestras de sueros o plasma preoperatorio y postoperatorio.

Los valores de sCD26 son comparados con un punto de corte preestablecido y con los niveles obtenidos en los anteriores controles. El perfil de sCD26 durante el seguimiento permite determinar el estatus del tumor y detectar con antelación la presencia de una recidiva tumoral, una metástasis a distancia, o si el paciente se encuentra libre de enfermedad. Este procedimiento consiste en una técnica rápida y económica que con facilidad se puede incorporar a las revisiones oncológicas

Procedimiento para realizar el seguimiento postoperatorio de pacientes con cáncer colorrectal mediante la valoración en suero o plasma humano de la glicoproteína soluble CD26.

La presente invención se refiere al desarrollo de un procedimiento para realizar el seguimiento postoperatorio de pacientes diagnosticados de cáncer colorrectal. El método consiste en la valoración en suero o plasma humano de la concentración del CD26 soluble (sCD26) mediante una técnica sencilla, rápidayfiable.

La aplicación de este procedimiento en el ámbito clínico-sanitario supone una herramienta degran utilidad para el seguimiento postoperatorio de estos pacientes, con la finalidad de detectar precozmente aquellos individuos que presenten recidiva tumoral o metástasis después de la intervención quirúrgica con intención curativa. Asimismo, este método permite monitorizar la respuesta del paciente al tratamiento para orientar al clínico acerca de su efectividad.

Sector de la técnica El sector de la técnica al que se refiere la invención se incluye dentro del ámbito sanitario, específicamente al área de oncología clínica.

Antecedentes de la invención En el momento del diagnóstico del cáncer colorrectal, entre un 70-80% de los pacientes presentan el tumor confinadoenelórganooenganglios linfáticosregionales, siendo posiblela resección curativa. Pesea ello, aun20-50% de estos pacientes le será diagnosticada una recidiva tumoral o una metástasis a distancia, presentándose en el 90% de los casos durante los primeros5años (Manfredi et al., 2006; Zak et al., 2008) .

Las recidivas generalmentese presentanen pacientesque inicialmente mostrabanun tumoren estadioBdeDukes o en pacientes con metástasis en nódulos linfáticos (Dukes C) , debido a micrometástasis regionales o sistémicas no detectadas en el diagnóstico (Platell, 2007) . Como consecuencia del retraso en el diagnóstico de la recurrencia tumoral, apenas un 30% de los pacientes son aptos para posteriores cirugías.

Por lo tanto, para mejorar los índices de supervivencia sería necesario realizar un seguimiento del paciente durante el tratamiento para determinar la aparición de recidiva tumoral o de metástasis.

Actualmente, las pruebas de seguimiento para pacientes operados de cáncer colorrectal pueden dividirse en pruebas de laboratorioypruebas diagnósticasinvasivas, e incluyen visitas periódicasal especialista, pruebasde marcadores tumorales, enzimasdelhígado, pruebadesangre ocultaen heces, estudios diagnósticosde imagen (radiografíadel tórax, tomografía, resonancia magnética) , yprocedimientos endoscópicos (sigmoidoscopiaycolonoscopia) .Enloque respectaalos marcadores tumorales, estos sonvaloradosrutinariamente en clínicaycomúnmente son empleados como herramientade monitorización del cursodela enfermedady dela efectividad del tratamiento.

El marcador tumoral más usado para el seguimiento del cáncer colorrectal es el antígeno carcinoembrionario (CEA) , queha sido propuesto como coste-efectivo (Goldstein& Mitchell, 2005) a pesardeque apenas un tercio de los pacientes con recurrencia presentan niveles séricos elevados, con una tasa defalsos positivos entre 16-33%, aunque también es cierto que su sensibilidad aumenta en presencia de metástasis a distancia, especialmente en el hígado (McArdle&Hole, 2000) . Peseasubajasensibilidadyespecificidad, actualmenteelCEAesel único marcador tumoral recomendado por las principales sociedades oncológicas para el seguimiento postoperatorio de los pacientes con cáncer colorrectal.

Otros marcadores tumoralestambién utilizados en clínica, aunque no son recomendados, sonel antígeno carbohidrato19.9 (CA19.9) yelantígeno carbohidrato72.4 (CA72.4) .Elprimerodeellos resulta menosútilqueelCEAya que presenta una sensibilidad menor, aunque su especificidad es ligeramente mayor. En cuanto al CA 72.4, su utilidad también es cuestionabley siempre debe estar acompañada suvaloración conla delCEA.

Anteriormente algunos de los inventores del procedimiento demostraron la utilidad del sCD26 como herramienta parala detección precoz del cáncer colorrectal en vista del 90%de sensibilidadyespecificidad para separar enfermos de sanos (Cordero et al., 2000;Patente P200102631) . Sin embargo, estudiosdeinvestigación posteriores han demostrado que el sCD26 también resulta una herramienta de utilidad para la vigilancia postoperatoria de los pacientes ya diagnosticados de cáncer colorrectal.

El sCD26 es una glicoproteínademembrana que también se presenta en forma soluble enel suero. Tiene actividad DPPIVy sus funciones están relacionadas conla regulaciónde respuestas inflamatorias e inmunológicas, la transducciónde señalesyla apoptosis.

Hemos demostradoquelosniveles séricosde sCD26, medidos duranteelseguimiento postoperatoriode pacientes diagnosticados y tratados de cáncer colorrectal, reflejan el cambio en el estatus del tumor. Las variaciones en los nivelesde sCD26 relacionadas conel estadodel tumorydetectadasporlosinventoresdel procedimiento, convierten a esta molécula como un potencial marcador de seguimiento de la evolución de la enfermedad.

El objeto de la presente invención es por lo tanto definir el procedimiento que permite realizar un seguimiento postoperatorioy determinarlaevoluciónde pacientes diagnosticadosde cáncercolorrectal mediantelavaloración sérica del sCD26.

Explicación de la invención La presente invención corresponde al desarrollo de un procedimiento para realizar el seguimiento postoperatorio de pacientesde cáncer colorrectalydeterminar suevolución, que ayudaráyorientaráal clínico acercadela respuesta al tratamiento, la presenciade recidivao enfermedad metastásica, yla presenciade nuevos tumores primarios.

El procedimientoconsisteenla determinacióndelosnivelesdela glicoproteínasCD26en suerooplasma humano antes de la resección quirúrgicaydurante el seguimiento postoperatorio. La determinación de los niveles séricos de sCD26 se lleva a cabo mediante un inmunoensayo específico para CD26 soluble humano. Por lo tanto, la realización de esta prueba tan solo implica la extracción de una muestra de sangre durante cada revisión.

Durante el seguimiento postoperatorio de los pacientes tratados de cáncer colorrectal los inventores del procedimiento objeto de esta patente hemos demostrado que los perfiles de sCD26 son distintos en pacientes libres de enfermedad, con recidiva o con metástasis a distancia. Los pacientes libres de enfermedad presentan a lo largo del seguimiento niveles de sCD26 superiores a los detectados antes de la intervención quirúrgica (por encima de 460 ng/mL) , mientras que en aquellos que sufren una recidiva los niveles de sCD26 aumentan hasta 750-950 ng/mL seguidosdeal menos un súbitoypronunciado descenso.En casodelaapariciónde metástasis pulmonaro hepática, los niveles de sCD26 aumentan con respecto al valor preoperatorio, alcanzando concentraciones cercanas o superiores a 1.000 ng/mL. Estos cambios en los niveles de sCD26 se detectan con anterioridad a cualquier síntoma que indique cambios enlaevolución delpaciente.

De acuerdo con lo anterior, la información obtenida con la valoración de los niveles de sCD26permite determinar el estadodecada pacienteyadelantarel diagnósticodeuna enfermedad recurrenteometástasis, loque conllevaríaa una mayor tasade curación tras unasegunda cirugíao tratamiento, aumentandoasíla supervivenciadel paciente.La mejoradelasupervivencia contribuiríaareducirlosgastos sanitarios, agilizandosurecuperación. Además, el reducido coste económico de este procedimiento junto con su fácil realización avalan su viabilidad.

Descripción de un modo de realización El procedimiento que proponemos comienza con la obtención del suero o del plasma de pacientes diagnosticados de cáncer colorrectal. Después de la resección curativa del tumorydurante el seguimiento postoperatorio se realizan controlesdelaevolución del paciente trimestralmente durante los primeros3años, ysemestralo anualmente durante los siguientes dos años, obteniéndose en cada visita al especialista una muestra de suero o plasma.

El suero o plasma debe conservarse a temperaturas inferiores a -20◦Chasta la valoración de la concentración del sCD26. Dicha concentración se determina mediante un inmunoensayo específico que consiste en la cuantificación espectrofotométricadelosnivelesde sCD26 mediantesu uniónaun anticuerpo monoclonalespecífico, yelacoplamiento a una reacción enzimática asociada empleando un anticuerpo secundario... [Seguir leyendo]

1. Procedimiento para realizar el seguimiento postoperatorio de pacientes con cáncer colorrectal mediante la valoracióndela glicoproteína sCD26 en sueroo plasma humano recogido antesydurantela vigilancia postoperatoria.El seguimiento a realizar comprende los siguientes aspectos:

a) Obtener muestrasde3mLde sueroo plasma del paciente enel momento antesdela intervención quirúrgica (suero preoperatorio) ycada3 meses durante los primeros3años después de la resección del tumorycada6 meses durante los siguientes2años (sueros postoperatorios) .

b) Determinar la concentración sérica de sCD26 mediante un inmunoensayo específico mediante la técnica Elisa tipo sándwich.

c) Comparar la concentración de sCD26 obtenida en cada revisión médica con las concentraciones obtenidas en los anteriores controles médicos.