POBLACIÓN DE PLANTAS TRANSGÉNICAS, MATERIAL DERIVADO DE LAS MISMAS, COLECCIÓN DE PLÁSMIDO CORRESPONDIENTE Y POBLACIÓN DE ORGANISMOS HUÉSPEDES TRANSFORMADOS, ASÍ COMO SU USO Y MÉTODOS PARA SU GENERACIÓN.
Población de plantas transgénicas que comprende un grupo de plantas transgénicas donde al genoma de cada planta transgénica del grupo se ha integrado un segmento codogénico del gel de un organismo donante pero ningún otro segmento codogénico del gen del organismo donante,
y la población puede obtenerse: a) suministrando un segmento codogénico del gen del organismo donante; b) integrando este segmento codogénico del gen en el genoma de una planta; y c) realizando los pasos a) y b) para al menos el 50 % de todos los segmentos codogénicos del gen del organismo donante en una cantidad correspondiente de plantas de tal modo que cada una de estas plantas tenga un segmento codogénico del gen pero no otro, y el organismo donante se selecciona de entre Acetobacter (subgen. Acetobacter) aceti; Acidithiobacillus ferrooxidans; Acinetobacter sp.; Actinobacillus sp; Aeromonas salmonicida; Agrobacterium tumefaciens; Aquifex aeolicus; Arcanobacterium pyogenes; Aster yellows phytoplasma; Bacillus sp.; Bifidobacterium sp.; Borrelia burgdorferi; Brevibacterium linens; Brucella melitensis; Buchnera sp.; Butyrivibrio fibrisolvens; Campylobacter jejuni; Caulobacter crescentus; Chlamydia sp.; Chlamydophila sp.; Chlorobium limicola, Citrobacter rodentium; Clostridium sp.; Comamonas testosteroni; Corynebacterium sp.; Coxiella burnetii; Deinococcus radiodurans; Dichelobacter nodosus; Edwardsiella ictaluri; Enterobacter sp.; Erysipelothrix rhusiopathiae; Escherichia coli; Flavobacterium sp.; Francisella tularensis; Frankia sp. Cpl1; Fusobacterium nucleatum; Geobacillus stearothermophilus; Gluconobacter oxydans; Haemophilus sp.; Helicobacter pylori; Klebsiella pneumoniae; Lactobacillus sp.; Lactococcus lactis; Listeria sp.; Mannheimia haemolytica; Mesorhizobium loti; Methylophaga thalassica; Microcystis aeruginosa; Microscilla sp. PRE1; Moraxella sp. TA144; Mycobacterium sp.; Mycoplasma sp.; Neisseria sp.; Nitrosomonas sp.; Nostoc sp. PCC 7120; Novosphingobium aromaticivorans; Oenococcus oeni; Pantoea citrea; Pasteurella multocida; Pediococcus pentosaceus; Phormidium foveolarum; Phytoplasma sp.; Plectonema boryanum; Prevotella ruminicola; Propionibacterium sp.; Proteus vulgaris; Pseudomonas sp.; Ralstonia sp.; Rhizobium sp.; Rhodococcus equi; Rhodothermus marinus; Rickettsia sp.; Riemerella anatipestifer; Ruminococcus flavefaciens; Saccharomyces cerevisiae; Salmonella sp.; Selenomonas ruminantium; Serratia entomophila; Shigella sp.; Sinorhizobium meliloti; Staphylococcus sp.; Streptococcus sp.; Streptomyces sp.; Synechococcus sp.; Synechocystis sp. PCC 6803; Thermotoga maritima; Treponema sp.; Ureaplasma urealyticum; Vibrio cholerae; Vibrio parahaemolyticus; Xylella fastidiosa; Yersinia sp.; Zymomonas mobilis
Tipo: Patente Internacional (Tratado de Cooperación de Patentes). Resumen de patente/invención. Número de Solicitud: PCT/EP2003/002815.
Solicitante: METANOMICS GMBH.
Nacionalidad solicitante: Alemania.
Dirección: Tegeler Weg 33 10589 Berlin-Charlottenburg ALEMANIA.
Inventor/es: BLAU,Astrid, KLEIN,Mathieu, WENDEL,Birgit.
Fecha de Publicación: .
Fecha Solicitud PCT: 18 de Marzo de 2003.
Clasificación Internacional de Patentes:
- C12N9/04 QUIMICA; METALURGIA. › C12 BIOQUIMICA; CERVEZA; BEBIDAS ALCOHOLICAS; VINO; VINAGRE; MICROBIOLOGIA; ENZIMOLOGIA; TECNICAS DE MUTACION O DE GENETICA. › C12N MICROORGANISMOS O ENZIMAS; COMPOSICIONES QUE LOS CONTIENEN; PROPAGACION, CULTIVO O CONSERVACION DE MICROORGANISMOS; TECNICAS DE MUTACION O DE INGENIERIA GENETICA; MEDIOS DE CULTIVO (medios para ensayos microbiológicos C12Q 1/00). › C12N 9/00 Enzimas, p. ej. ligasas (6.); Proenzimas; Composiciones que las contienen (preparaciones para la limpieza de los dientes que contienen enzimas A61K 8/66, A61Q 11/00; preparaciones de uso médico que contienen enzimas A61K 38/43; composiciones detergentes que contienen enzimas C11D ); Procesos para preparar, activar, inhibir, separar o purificar enzimas. › actúan sobre grupos CHOH como dadores, p. ej. glucosa oxidasa de glucosa, deshidrogenasa láctica (1.1).
- C12N9/12B1B
- C12P7/10 C12 […] › C12P PROCESOS DE FERMENTACION O PROCESOS QUE UTILIZAN ENZIMAS PARA LA SINTESIS DE UN COMPUESTO QUIMICO DADO O DE UNA COMPOSICION DADA, O PARA LA SEPARACION DE ISOMEROS OPTICOS A PARTIR DE UNA MEZCLA RACEMICA. › C12P 7/00 Preparación de compuestos orgánicos que contienen oxígeno. › de un sustrato constituido por materias celulósicas.
Clasificación PCT:
- A01H1/06 NECESIDADES CORRIENTES DE LA VIDA. › A01 AGRICULTURA; SILVICULTURA; CRIA; CAZA; CAPTURA; PESCA. › A01H NOVEDADES VEGETALES O PROCEDIMIENTOS PARA SU OBTENCION; REPRODUCCION DE PLANTAS POR TECNICAS DE CULTIVO DE TEJIDOS. › A01H 1/00 Procedimientos de modificación de los genotipos (A01H 4/00 tiene prioridad). › Procedimientos de mutación, p. ej. tratamientos por productos químicos o irradiaciones (mutaciones específicas preparadas por ingeniería genética sobre celulas o tejidos vegetales C12N 15/00).
Clasificación antigua:
- A01H1/06 A01H 1/00 […] › Procedimientos de mutación, p. ej. tratamientos por productos químicos o irradiaciones (mutaciones específicas preparadas por ingeniería genética sobre celulas o tejidos vegetales C12N 15/00).
Países PCT: Austria, Bélgica, Suiza, Alemania, Dinamarca, España, Francia, Reino Unido, Grecia, Italia, Liechtensein, Luxemburgo, Países Bajos, Suecia, Mónaco, Portugal, Irlanda, Eslovenia, Finlandia, Rumania, Chipre, Lituania, Letonia, Ex República Yugoslava de Macedonia, Albania.
PDF original: ES-2358643_T3.pdf
Fragmento de la descripción:
La presente invención se refiere a poblaciones de plantas transgénicas que comprenden una parte esencial de todos los segmentos codogénicos del gen de un organismo donante, así como al material biológico transgénico de las mismos, a colecciones de plásmidos y poblaciones de organismos huéspedes transformados, con los cuales pueden transformarse plantas de una manera correspondiente. También se describen métodos para la generación de las plantas y del material, así como al uso de las plantas y del material para investigaciones funcionales.
Debido al aumento de la población mundial y a las áreas de cultivo decrecientes existe una necesidad de producción sostenible. Aquí pueden aprovecharse informaciones genómicas para optimizar procesos de producción, en particular en la química, la producción de alimentos y en la agricultura. Ya ahora se encuentran disponibles enormes cantidades de información genómica. Aunque de manera preponderante se trata de información de secuencias sin asignación funcional o solo con indirecta asignación funcional.
Ya hubo ensayos para expresar genes individuales de organismos de tipos diferentes en plantas con propósitos diferentes. El objetivo de estos ensayos fue investigar la función de un gen determinado en la planta y su efecto en la fisiología vegetal.
En WO 01/26459 y WO 01/35725 se describen investigaciones de la empresa Mendel Biotechnology, Inc. para introducir factores de transcripción en Arabidopsis. En Lazo G., et al., BioTechnology 9, 1991, 963-967, se describe un banco que se compone de 21.600 clones. Los clones son agrobacterias que se han transferido, clonados en un vector de cósmido, con fragmentos de ADN genómico del genoma de arabidopsis. En tal caso cada fragmento codogénico de gen se produce en promedio cuatro veces en el banco.
A manera de ejemplo, en WO 99/36516 y WO 01/07600 se describe un enfoque sobre expresión transitoria de varios genes de un organismo donante determinado en una planta modelo. Allí se inserta un banco de ADNc derivado del organismo donante en un vector adecuado de un virus vegetal, por lo cual puede lograrse una expresión rápida y fuerte del ADNc después de la infección de la planta huésped con el vector dicho. Aunque en tal caso solo se expresan en los vegetales aquellos ADNcs que están presentes en la biblioteca original. Sin embargo, si se expresan, las porciones significativas del gen de un genoma lo hacen solo muy débilmente o solo en condiciones muy específicas y, por lo tanto, no está comprendido en tal enfoque. La desventaja en este procedimiento también es que por la infección aparecen efectos. Estos pueden influenciar los resultados de investigaciones fisiológicas en las plantas infectadas. Una debilidad que también es inherente a la expresión transitoria es que la disponibilidad del material transfectado es solo temporal. Así, en las investigaciones analíticas sólo pueden considerarse lapsos de tiempo relativamente cortos. No se reconocen las influencias relevantes al desarrollo que actúen por tiempos largos. Además, al usar vectores virales el tamaño de las secuencias que pueden incorporarse se limita debido al empacamiento indispensable de las secuencias en la envoltura viral.
Por lo tanto era un objetivo de la presente invención suministrar plantas en las que pudieran llevarse a cabo investigaciones funcionales de manera sistemática mediante la función de genes ajenos por todo el ciclo de desarrollo de los vegetales y deseablemente incluso por varias generaciones.
Este problema se resuelve gracias al objeto de la presente invención, a saber, gracias a una población de plantas transgénicas que comprende un grupo de plantas transgénicas, donde al genoma de cada planta transgénica del grupo se integra un segmento de gen codogénico de un organismo donante, pero no otro segmento de gen codogénico del organismo donante; la población puede obtenerse:
a) suministrando un segmento de gen codogénico del organismo donante;
b) integrando este segmento de gen codogénico en el genoma de una planta; y
c) llevando a cabo los pasos a) y b) para al menos el 50% de todos los segmentos codogénicos de gen del organismo donante en un número correspondiente de plantas, de modo que cada uno de estas plantas tiene un segmento codogénico de gen, pero no otro, y el organismo donante se selecciona entre Acetobacter (subgen. Acetobacter) aceti; Acidithiobacillus ferrooxidans; Acinetobacter sp.; Actinobacillus sp; Aeromonas salmonicida; Agrobacterium tumefaciens; Aquifex aeolicus; Arcanobacterium pyogenes; Aster yellows phytoplasma; Bacillus sp.; Bifidobacterium sp.; Borrelia burgdorferi; Brevibacterium linens; Brucella melitensis; Buchnera sp.; Butyrivibrio fibrisolvens; Campylobacter jejuni; Caulobacter crescentus; Chlamydia sp.; Chlamydophila sp.; Chlorobium limicola; Citrobacter rodentium; Clostridium sp.; Comamonas testosteroni; Corynebacterium sp.; Coxiella burnetii; Deinococcus radiodurans; Dichelobacter nodosus; Edwardsiella ictaluri; Enterobacter sp.; Erysipelothrix rhusiopathiae; Escherichia coli; Flavobacterium sp.; Francisella tularensis; Frankia sp. Cpl1; Fusobacterium nucleatum; Geobacillus stearothermophilus; Gluconobacter oxydans; Haemophilus sp.; Helicobacter pylori; Klebsiella pneumoniae; Lactobacillus sp.; Lactococcus lactis; Listeria sp.; Mannheimia haemolytica; Mesorhizobium loti; Methylophaga thalassica; Microcystis aeruginosa; Microscilla sp. PRE1; Moraxella sp. TA144;
Mycobacterium sp.; Mycoplasma sp.; Neisseria sp.; Nitrosomonas sp.; Nostoc sp. PCC 7120; Novosphingobium aromaticivorans; Oenococcus oeni; Pantoea citrea; Pasteurella multocida; Pediococcus pentosaceus; Phormidium foveolarum; Phytoplasma sp.; Plectonema boryanum; Prevotella ruminicola; Propionibacterium sp.; Proteus vulgaris; Pseudomonas sp.; Ralstonia sp.; Rhizobium sp.; Rhodococcus equi; Rhodothermus marinus; Rickettsia sp.; Riemerella anatipestifer; Ruminococcus flavefaciens; Saccharomyces cerevisiae; Salmonella sp.; Selenomonas ruminantium; Serratia entomophila; Shigella sp.; Sinorhizobium meliloti; Staphylococcus sp.; Streptococcus sp.; Streptomyces sp.; Synechococcus sp.; Synechocystis sp. PCC 6803; Thermotoga maritima; Treponema sp.; Ureaplasma urealyticum; Vibrio cholerae; Vibrio parahaemolyticus; Xylella fastidiosa; Yersinia sp.; Zymomonas mobilis.
El término "segmento de gen codogénico" se refiere a un ácido nucleico. Los ácidos nucleicos se forman de monómeros (nucleótidos) y contienen azúcares, fosfato y o bien una purina o una pirimidina o derivados de éstas. Estos incluyen secuencias de ADN y ARN que pueden ser mono- o bicatenarias y pueden tener opcionalmente bases de nucleótidos sintéticas, no naturales o modificadas, que pueden incorporarse al ADN o ARN.
En particular, la expresión "segmento de gen codogénico" se refiere a la secuencia codificante, es decir a la parte de un gen que codifica una proteína, polipéptido o una parte de éstos.
El término "gen" se refiere a una secuencia de ADN que comprende tanto el segmento de gen codogénico, es decir en particular la secuencia codificante, como también elementos regulatorios.
El gen estructural que comprende el segmento de gen codogénico puede tener una secuencia codificante continua (marco de lectura abierto, abreviado ORF) o puede contener uno o más intrones que están enlazados con los exones mediante enlaces de empalme adecuados.
Los segmentos codogénicos de gen de acuerdo con la invención pueden encontrarse normalmente en las células del organismo donante. Con respecto al organismo donante se trata, por lo tanto, de secuencias autólogas. En contraste, estos segmentos codogénicos de gen no pueden encontrarse en los vegetales en los que se basan las poblaciones de acuerdo con la invención (vegetales receptores). Con respecto al vegetal receptor se trata, por lo tanto, de secuencias heterólogas.
Para la presente invención es crítica la integración de segmentos codogénicos de gen en el genoma de los vegetales. En tal caso puede integrarse un determinado segmento codogénico de gen como secuencia codificante continua (ORF) o contener uno o más intrones. Si es este último el caso, como consecuencia de la expresión por el vegetal regularmente se empalman secuencias de este tipo, en cuyo caso el patrón de empalme puede, aunque no tiene que, corresponder al del organismo donante.
Fundamentalmente los segmentos codogénicos de gen pueden integrarse al genoma extranuclear, por ejemplo al genoma de plástido, a una planta. De acuerdo con la invención... [Seguir leyendo]
Reivindicaciones:
1. Población de plantas transgénicas que comprende un grupo de plantas transgénicas donde al genoma de cada planta transgénica del grupo se ha integrado un segmento codogénico del gel de un organismo donante pero ningún otro segmento codogénico del gen del organismo donante, y la población puede obtenerse:
a) suministrando un segmento codogénico del gen del organismo donante;
b) integrando este segmento codogénico del gen en el genoma de una planta; y
c) realizando los pasos a) y b) para al menos el 50 % de todos los segmentos codogénicos del gen del organismo donante en una cantidad correspondiente de plantas de tal modo que cada una de estas plantas tenga un segmento codogénico del gen pero no otro, y el organismo donante se selecciona de entre Acetobacter (subgen. Acetobacter) aceti; Acidithiobacillus ferrooxidans; Acinetobacter sp.; Actinobacillus sp; Aeromonas salmonicida; Agrobacterium tumefaciens; Aquifex aeolicus; Arcanobacterium pyogenes; Aster yellows phytoplasma; Bacillus sp.; Bifidobacterium sp.; Borrelia burgdorferi; Brevibacterium linens; Brucella melitensis; Buchnera sp.; Butyrivibrio fibrisolvens; Campylobacter jejuni; Caulobacter crescentus; Chlamydia sp.; Chlamydophila sp.; Chlorobium limicola, Citrobacter rodentium; Clostridium sp.; Comamonas testosteroni; Corynebacterium sp.; Coxiella burnetii; Deinococcus radiodurans; Dichelobacter nodosus; Edwardsiella ictaluri; Enterobacter sp.; Erysipelothrix rhusiopathiae; Escherichia coli; Flavobacterium sp.; Francisella tularensis; Frankia sp. Cpl1; Fusobacterium nucleatum; Geobacillus stearothermophilus; Gluconobacter oxydans; Haemophilus sp.; Helicobacter pylori; Klebsiella pneumoniae; Lactobacillus sp.; Lactococcus lactis; Listeria sp.; Mannheimia haemolytica; Mesorhizobium loti; Methylophaga thalassica; Microcystis aeruginosa; Microscilla sp. PRE1; Moraxella sp. TA144; Mycobacterium sp.; Mycoplasma sp.; Neisseria sp.; Nitrosomonas sp.; Nostoc sp. PCC 7120; Novosphingobium aromaticivorans; Oenococcus oeni; Pantoea citrea; Pasteurella multocida; Pediococcus pentosaceus; Phormidium foveolarum; Phytoplasma sp.; Plectonema boryanum; Prevotella ruminicola; Propionibacterium sp.; Proteus vulgaris; Pseudomonas sp.; Ralstonia sp.; Rhizobium sp.; Rhodococcus equi; Rhodothermus marinus; Rickettsia sp.; Riemerella anatipestifer; Ruminococcus flavefaciens; Saccharomyces cerevisiae; Salmonella sp.; Selenomonas ruminantium; Serratia entomophila; Shigella sp.; Sinorhizobium meliloti; Staphylococcus sp.; Streptococcus sp.; Streptomyces sp.; Synechococcus sp.; Synechocystis sp. PCC 6803; Thermotoga maritima; Treponema sp.; Ureaplasma urealyticum; Vibrio cholerae; Vibrio parahaemolyticus; Xylella fastidiosa; Yersinia sp.; Zymomonas mobilis.
2. Población según la reivindicación 1, caracterizada porque los segmentos codogénicos del gen se integran al genoma nuclear.
3. Población según la reivindicación 1 o 2, caracterizada porque se integran 1 a 5 copias por células de planta transgénica.
4. Población según una de las reivindicaciones 1 a 3, caracterizada porque los segmentos codogénicos del gen están flanqueados por secuencias de ADN-T, por uno o por ambos lados.
5. Población según una de las reivindicaciones precedentes, caracterizada porque los segmentos codogénicos del gen están conectados funcionalmente con secuencias regulatorias.
6. Población según la reivindicación 5, caracterizada porque las secuencias regulatorias contienen secuencias que codifican péptido de señal y/o de tránsito.
7. Población según una de las reivindicaciones precedentes, caracterizada porque la población comprende al menos otra planta en cuyo genoma se integra un segmento codogénico del gen en combinación con otro segmento codogénico del gen o varios otros segmentos codogénicos del gen del organismo donante.
8. Población según una de las reivindicaciones precedente, caracterizada porque las plantas transgénicas pertenecen al género Arabidopsis.
9. Población según una de las reivindicaciones 1 a 7, caracterizada porque las plantas transgénicas pertenecen al género Oryza.
10. Método para la generación de una población de plantas transgénicas en el cual
a) se suministra un segmento codogénico del gen de un organismo donante; b) se integra este segmento codogénico del gen en el genoma de una planta; y
c) se realizan los pasos a) y b) para al menos el 50 % de todos los sementos codogénicos del gen del organismo donante en una cantidad correspondiente de plantas, de tal modo que cada una de estas plantas tiene un segmento codogénico del gen, pero no otro, en cuyo caso el organismo donante se selecciona de entre Acetobacter (subgen. Acetobacter) aceti; Acidithiobacillus ferrooxidans; Acinetobacter sp.; Actinobacillus sp; Aeromonas salmonicida; Agrobacterium tumefaciens; Aquifex aeolicus; Arcanobacterium pyogenes; Aster yellows phytoplasma; Bacillus sp.; Bifidobacterium sp.; Borrelia burgdorferi; Brevibacterium linens; Brucella melitensis; Buchnera sp.; Butyrivibrio fibrisolvens; Campylobacter jejuni; Caulobacter crescentus; Chlamydia sp.; Chlamydophila sp.; Chlorobium limicola; Citrobacter rodentium; Clostridium sp.; Comamonas testosteroni; Corynebacterium sp.; Coxiella burnetii: Deinococcus radiodurans; Dichelobacter nodosus; Edwardsiella ictaluri; Enterobacter sp.; Erysipelothrix rhusiopathiae; Escherichia coli; Flavobacterium sp.; Francisella tularensis; Frankia sp. CpI1; Fusobacterium nucleatum; Geobacillus stearothermophilus; Gluconobacter oxydans; Haemophilus sp.; Helicobacter pylori; Klebsiella pneumoniae; Lactobacillus sp.; Lactococcus lactis; Listeria sp.; Mannheimia haemolytica; Mesorhizobium loti; Methylophaga thalassica; Microcystis aeruginosa; Microscilla sp. PRE1; Moraxella sp. TA144; Mycobacterium sp.; Mycoplasma sp.; Neisseria sp.; Nitrosomonas sp.; Nostoc sp. PCC 7120; Novosphingobium aromaticivorans; Oenococcus oeni; Pantoea citrea; Pasteurella multocida; Pediococcus pentosaceus; Phormidium foveolarum; Phytoplasma sp.; Plectonema boryanum; Prevotella ruminicola; Propionibacterium sp.; Proteus vulgaris; Pseudomonas sp.; Ralstonia sp.; Rhizobium sp.; Rhodococcus equi; Rhodothermus marinus; Rickettsia sp.; Riemerella anatipestifer, Ruminococcus flavefaciens; Saccharomyces cerevisiae; Salmonella sp.; Selenomonas ruminantium; Serratia entomophila; Shigella sp.; Sinorhizobium meliloti; Staphylococcus sp.; Streptococcus sp.; Streptomyces sp.; Synechococcus sp.; Synechocystis sp. PCC 6803; Thermotoga maritima; Treponema sp.; Ureaplasma urealyticum; Vibrio cholerae; Vibrio parahaemolyticus; Xylella fastidiosa; Yersinia sp.; Zymomonas mobilis.
11. Método según la reivindicación 10, caracterizado porque para suministrar el segmento codogénico del gen se transforman bacterias del género Agrobacterium con el segmento codogénico del gen.
12. Método según la reivindicación 11, caracterizado porque la bacteria Agrobacterium tumefaciens.
13. Método según la reivindicación 10, caracterizado porque el segmento codogénico del gen se integra al genoma de una planta
b1) dejando actuar agrobacterias que se transforman con el segmento codogénico del gen sobre las plantas o el material biológico adecuado de las mismas; y
b2) obteniendo las plantas transgénicas o material biológico adecuado de las mismas.
14. Método según la reivindicación 13, caracterizado porque se deja actuar las agrobacterias in planta.
15. Método según la reivindicación 13, caracterizado porque para la obtención de las plantas transgénicas o del material biológico adecuado de las mismas primero se obtienen las semillas de las plantas tratadas con agrobacterias, se siembran y se someten a condiciones selectivas y se obtienen las plantas transformadas o el material biológico adecuado de las mismas.
16. Material transgénico biológico que puede obtenerse de manera conocida de por sí a partir de una población de plantas transgénicas según una de las reivindicaciones 1 a 9 y comprende al menos el 50 % de todos los segmentos codogénicos del gen del organismo donante.
17. Colección de constructos de plásmidos que comprende un grupo de constructos de plásmidos donde en cada constructo del grupo se ha integrado un segmento codogénico del gen de un organismo donante, pero no otro segmento codogénico del gen del organismo donante; la colección puede obtenerse
a) suministrando un segmento codogénico del gen del organismo donante;
b) integrando este segmento codogénico del gen en un constructo de plásmido; y
c) realizando los pasos a) y b) para al menos el 50 % de todos los segmentos codogénicos del gen del organismo donante en un una cantidad correspondiente de constructos de plásmidos, de tal modo que cada uno de estos constructos tiene un segmento codogénico del gen, pero no otro, y el organismo donante se selecciona entre Acetobacter (subgen. Acetobacter) aceti; Acidithiobacillus ferrooxidans; Acinetobacter sp.; Actinobacillus sp;
Aeromonas salmonicida; Agrobacterium tumefaciens: Aquifex aeolicus; Arcanobacterium pyogenes; Aster yellows phytoplasma; Bacillus sp.; Bifidobacterium sp.; Borrelia burgdorferi; Brevibacterium linens; Brucella melitensis; Buchnera sp.; Butyrivibrio fibrisolvens; Campylobacter jejuni; Caulobacter crescentus; Chlamydia sp.; Chlamydophila sp.; Chlorobium limicola; Citrobacter rodentium; Clostridium sp.; Comamonas testosteroni; Corynebacterium sp.; 5 Coxiella burnetii; Deinococcus radiodurans; Dichelobacter nodosus; Edwardsiella ictaluri; Enterobacter sp.; Erysipelothrix rhusiopathiae: Escherichia coli; Flavobacterium sp.; Francisella tularensis; Frankia sp. Cpl1; Fusobacterium nucleatum; Geobacillus stearothermophilus; Gluconobacter oxydans; Haemophilus sp.; Helicobacter pylori; Klebsiella pneumoniae; Lactobacillus sp.; Lactococcus lactis; Listeria sp.; Mannheimia haemolytica; Mesorhizobium loti; Methylophaga thalassica; Microcystis aeruginosa; Microscilla sp. PRE1; Moraxella sp. TA144; 10 Mycobacterium sp.; Mycoplasma sp.; Neisseria sp.; Nitrosomonas sp.; Nostoc sp. PCC 7120; Novosphingobium aromaticivorans; Oenococcus oeni; Pantoea citrea; Pasteurella multocida; Pediococcus pentosaceus; Phormidium foveolarum; Phytoplasma sp.; Plectonema boryanum; Prevotella ruminicola; Propionibacterium sp.; Proteus vulgaris; Pseudomonas sp.; Ralstonia sp.; Rhizobium sp.; Rhodococcus equi; Rhodothermus marinus; Rickettsia sp.; Riemerella anatipestifer; Ruminococcus flavefaciens; Saccharomyces cerevisiae; Salmonella sp.; Selenomonas ruminantium; Serratia entomophila; Shigella sp.; Sinorhizobium meliloti; Staphylococcus sp.; Streptococcus sp.; Streptomyces sp.; Synechococcus sp.; Synechocystis sp. PCC 6803; Thermotoga maritima; Treponema sp.; Ureaplasma urealyticum; Vibrio cholerae; Vibrio parahaemolyticus; Xylella fastidiosa; Yersinia sp.; Zymomonas mobilis.
18. Colección según la reivindicación 17, caracterizada porque los segmentos codogénicos del gen están 20 conectados funcionalmente con secuencias regulatorias.
19. Colección según la reivindicación 18, caracterizada porque las secuencias regulatorias son vegetales.
20. Colección según una de las reivindicaciones 17 a 19, caracterizada porque los constructos se basan en vectores binarios.
21. Población de un organismo huésped que contiene la colección de constructos de plásmidos según una de las 25 reivindicaciones 17 a 20.
22. Método para la investigación funcional de una población según una de las reivindicaciones 1 a 9, en el cual
a) se suministra la población;
b) opcionalmente se someten las plantas a condiciones de estrés; y
c) se compara un rasgo fenotípico o el metabolismo de cada una de las plantas de la población con el fenotipo o el metabolismo de una planta de referencia, en cuyo caso en el genoma de la planta no se ha integrado ninguno de los segmentos codogénicos del gen del organismo donante, comprendidos por la población.
23. Método según la reivindicación 22, donde el rasgo fenotípico se selecciona entre crecimiento, color, morfología y comportamiento al florecer de las plantas.
24. Método según una de las reivindicaciones 22 o 23, donde el estrés es abiótico o biótico.
35 25. Método según una de las reivindicaciones 22 a 24, donde el estrés es estrés al frío o estrés a la sequía.
26. Uso de una población de plantas trnasgénicas según una de las reivindicaciones 1 a 9 o de un material biológico derivado de las mismas según la reivindicación 16, para la determinación de la función de los segmentos codogénicos del gen.
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