MÉTODO PARA IDENTIFICAR O EVALUAR COMPUESTOS ÚTILES EN EL SECTOR DE LAS FRAGANCIAS Y LOS AROMAS.

Método para identificar o evaluar compuestos útiles en el sector de las fragancias y los aromas ANTECEDENTES La presente invención se refiere a métodos de identificación o evaluación de compuestos útiles en el sector de las fragancias y los aromas (las partes volátiles del sabor). Los métodos, según la presente invención, tienen en cuenta la aparición de metabolismo enzimático en el tracto respiratorio humano, incluyendo la cavidad oral, en particular la cavidad nasal. Los compuestos que alcanzan la cavidad nasal y ejercen un efecto particular, tal como la unión a receptores, que es un prerrequisito para percibir los estímulos olfativos, están cambiando constantemente su medio y las diferentes especificidades físico-químicas son ventajosas y desventajosas en cada fase de su vida útil. En primer lugar, el compuesto está en una base, por ejemplo, como parte de un aceite de fragancia, en la que se requiere una presión de vapor concreta para ser volátil. Dependiendo del tipo de liberación de olores (transferencia directa en el espacio de la cabeza, o dispersión, por ejemplo, aerosoles), son ventajosas diferentes propiedades para los constituyentes de la mezcla de perfume. Aunque a menudo es deseable una presión de vapor elevada, el compuesto debe ser capaz de disolverse fácilmente en el fluido de la mucosa nasal que cubre las células neuronales. Finalmente, el compuesto necesita unirse a proteínas receptoras y activar las mismas. Para la mayoría del recorrido desde la base al receptor, los compuestos odorantes parecen mantenerse sin cambios. Sin embargo, la situación parece ser más complicada. Se ha especulado que el metabolismo hace que los compuestos odorantes sean inactivos para hacerlos más solubles en agua y facilitar su eliminación del epitelio nasal. Además, se ha especulado que, para algunos ingredientes de las fragancias, el compuesto que es directamente responsable para la percepción del olor (el odorante) no es el propio ingrediente de la fragancia. En vez de ello, el ingrediente de la fragancia puede ser simplemente un precursor no odorante que forma, como metabolito, el odorante real que activa el receptor olfativo para dar lugar a la percepción olfativa. Dichos metabolitos odorantes se pueden formar enzimáticamente en el tracto respiratorio humano, en particular en el epitelio de la nariz humana. El metabolismo de dichos precursores, que son sustratos de enzimas, puede tener lugar antes de la unión al receptor en la mucosidad fluida o en células que recubren la cavidad o puede tener lugar después de la activación del receptor. Esto puede cambiar sus diversas capacidades que influyen en la percepción del odorante, incluyendo sus propiedades físico-químicas (por ejemplo, solubilidad en el fluido de la mucosidad) y la activación del receptor. El metabolito o metabolitos pueden tener propiedades químicas y/o físicas que son ventajosas para la interacción con los receptores, otras enzimas y/o proteínas de unión a odorantes. Los sustratos pueden ser compuestos odorantes o compuestos no odorantes. En el caso de éstos últimos, uno o más metabolitos del sustrato pueden ser un odorante, y/o pueden tener las propiedades mencionadas anteriormente. El metabolismo puede inactivar o activar ligandos de receptores. Los compuestos de interés pueden ser agonistas, antagonistas, sustratos de enzimas, inhibidores de enzimas, y reguladores alostéricos de receptores o enzimas. Los metabolitos pueden competir, por ejemplo, por la unión al receptor, interaccionar con receptores y enzimas adicionales, y/o modular la actividad y sensibilidad de receptores y enzimas. Los metabolitos generados a partir de sustratos de enzimas metabólicas pueden tener propiedades que les permiten interaccionar con receptores y enzimas y estos metabolitos pueden ser, de hecho, principalmente responsables de la cualidad percibida y los efectos de los ingredientes del sabor y fragancia y/o competir con sus sustratos para la interacción con receptores y, en particular, para la activación de receptores. Sin embargo, el metabolismo que implica a los compuestos odorantes en el tracto respiratorio humano, en particular en la mucosa olfativa, no se ha observado in vivo. La presente invención utiliza métodos analíticos conocidos para dar a conocer un método de identificación, análisis o evaluación de compuestos de prueba que es útil en el sector de las fragancias y los aromas. Los compuestos útiles en el sector de las fragancias y los aromas pueden ser compuestos que son fragancias y aromas como tales, pero también pueden ser moduladores de su percepción. Los moduladores son compuestos que influyen en la percepción olfativa de compuestos odorantes. Un modulador puede dar lugar a cambios de intensidad (agente potenciador o enmascarante general), calidad (cambio de nota olfativa, potenciador o enmascarante de notas particulares), duración/longevidad de la percepción, o combinaciones de éstos. Un modulador puede aumentar la percepción global de un odorante particular o mezcla de odorantes, o una calidad/nota olfativa particular. Un modulador puede alcanzar estos efectos mediante la modulación, influencia o regulación de reacciones metabólicas en el tracto respiratorio. Un modulador puede aumentar o suprimir el metabolismo, por ejemplo, afectando directamente a la enzima. En lugar de influir en las enzimas, un modulador puede afectar (activar o bloquear) uno o más receptores para alcanzar un efecto potenciador o bloqueante/enmascarante, o influir en la calidad o nota 2   olfativa de la percepción. Un modulador puede alargar la vida útil o duración del efecto de un odorante dificultando o suprimiendo su metabolismo habitual y aumentando de este modo su intensidad o longevidad. Un compuesto que influye positivamente en la tasa de actividad enzimática causará un efecto potenciador similar, siempre que el sustrato que se metaboliza para formar su metabolito no sea odorante (o menos odorante) que su metabolito odorante. Los moduladores pueden suprimir el metabolismo que tiene lugar en el tracto respiratorio humano y/o cambiar la calidad olfativa de odorantes individuales. CARACTERÍSTICAS DE LA INVENCIÓN En un primer aspecto, la invención se refiere a un método de identificar o evaluar compuestos, en el que el compuesto o, como mínimo, uno de sus metabolitos es un odorante, o un precursor de un odorante, o un modulador de la percepción de un odorante, que comprende a) Disponer un espacio para la cabeza saturado con un compuesto de prueba b) Inhalación de dicho espacio para la cabeza saturado por un individuo humano de prueba c) Emisión del aliento exhalado por el individuo humano de prueba d) Análisis del aliento exhalado a tiempo real por un método de detección seleccionado entre Metabo-GM, Metabospace y Espectrometría de Masas por Reacción de Transferencia de Protones (PTR-MS). El espacio para la cabeza se puede disponer tal como se describe en los ejemplos descritos a continuación. DESCRIPCIÓN DETALLADA En una realización particular, el compuesto se inhala y se exhala a través de la nariz. En otra realización, el compuesto se inhala a través de la boca. En otra realización particular, el compuesto se inhala a través de la boca y se exhala a través de la nariz. En otra realización, el compuesto se inhala y se exhala a través de la boca. En otra realización particular, se utiliza Metabospace o PTR-MS. De manera sorprendente, el solicitante descubrió que los metabolitos de compuestos volátiles se detectan de manera instantánea utilizando estos métodos. Esto no pudo haberse predicho. En algunos casos, es incluso posible determinar localización de la enzima de biotransformación en el tracto respiratorio humano realizando los protocolos de inhalación/exhalación descritos anteriormente y analizando los resultados, tal como se muestra en los ejemplos descritos a continuación. En otra realización particular, además del análisis mediante Metabo-GM, Metabospace y la Espectrometría de Masas por Reacción de Transferencia de Protones (PTR-MS), se puede realizar un análisis con un olfatómetro. Mediante los métodos, según la presente invención, se pueden identificar los metabolitos que resultan de compuestos (sustratos) que son metabolizados por una enzima. Estos metabolitos pueden ser ellos mismos compuestos odorantes. Asimismo, los sustratos pueden ser ingredientes de fragancias que pueden ser odorantes por sí mismos, o pueden no ser odorantes o ser precursores débilmente odorantes que proporcionan una percepción de olor sólo después del metabolismo debido a su metabolito. Los precursores y metabolitos pueden tener una nota olfativa diferente. La nota olfativa real correspondiente a cierta estructura química es importante para la búsqueda de moléculas de partida. Los métodos que no tienen en cuenta el metabolismo pueden dar lugar a relaciones de estructura-función/nota... [Seguir leyendo]

1. Método de identificación o evaluación de compuestos de prueba, en el que el compuesto o, como mínimo, uno de sus metabolitos, es un odorante, o un precursor de un odorante, o un modulador de la percepción de un odorante, que comprende a) Disponer un espacio para la cabeza de un compuesto de prueba, saturado, opcionalmente diluido, b) Inhalación de dicho espacio para la cabeza por un individuo humano de prueba c) Emisión del aliento exhalado por el individuo humano de prueba d) Análisis del aliento exhalado mediante un método de detección seleccionado entre un método de atrapado de compuestos volátiles exhalados en una resina, desorción del material unido de la resina y análisis del material desorbido mediante cromatografía de gas unido a espectrometría de masas (Metabo-GM), un método en el que los metabolitos volátiles exhalados generados in vivo se exhalan en un interfaz para un dispositivo de análisis que registra los espectros de masas mediante un espectrómetro de masas con cuadrupolo equipado con una fuente de iones para la ionización química a presión atmosférica capaz de medir los intervalos dinámicos de los compuestos volátiles (Metabospace) y la Espectrometría de Masas por Reacción de Transferencia de Protones (PTR-MS), o una combinación de los mismos. 2. Método, según la reivindicación 1, en el que el compuesto de prueba se inhala y exhala a través de la nariz. 3. Método, según la reivindicación 1, en el que el compuesto de prueba se inhala a través de la nariz y se exhala a través de la boca. 4. Método, según la reivindicación 1, en el que el compuesto de prueba se inhala a través de la boca y se exhala a través de la nariz. 5. Método, según la reivindicación 1, en el que el compuesto de prueba se inhala y exhala a través de la boca. 6. Método, según cualquiera de las reivindicaciones anteriores, en el que se realiza un análisis con olfatómetro además del análisis mediante un método de atrapado de compuestos volátiles exhalados en una resina, desorción del material unido de la resina y análisis del material desorbido mediante cromatografía de gas unido a espectrometría de masas (Metabo-GM), un método en el que los metabolitos volátiles exhalados generados in vivo se exhalan en un interfaz para un dispositivo de análisis que registra los espectros de masas mediante un espectrómetro de masas con cuadrupolo equipado con una fuente de iones para la ionización química a presión atmosférica capaz de medir los intervalos dinámicos de los compuestos volátiles (Metabospace) o la Espectrometría de Masas por Reacción de Transferencia de Protones (PTR-MS), o una combinación de los mismos.