Disolución de descontaminación, que contiene al menos una mezcla sinérgica de a) al menos una vitamina en cantidades de desde 10 mM hasta 100 mM,

b) al menos un ion metálico en cantidades de desde 1 mM hasta 100 mM y c) al menos un compuesto tensioactivo en cantidades de desde el 0,1% hasta el 10% en peso de la disolución total

La invención se refiere a una disolución de descontaminación para el tratamiento de superficies que están contaminadas con proteínas, moléculas de ácido nucleico o microorganismos no deseados. La invención se refiere además al uso de esta disolución de descontaminación y a un sistema tampón adecuado para ello.

Debido al frenético desarrollo de la biología molecular cada vez son más importantes técnicas de trabajo para la detección y amplificación de moléculas de ADN o proteínas [Sambrook, J. et al., eds (1989) Molecular Cloning: A Laboratory Manual, 2ª Ed., Cold Spring Harbor Laboratory Press, Cold Spring Harbor, NY.]. Ejemplos actuales se refieren por ejemplo a diagnóstico clínico, procedimientos de identificación forense e investigaciones biomédicas.

Con el descubrimiento de la reacción en cadena de la polimerasa (PCR) son posibles incluso detecciones de moléculas individuales. Un nuevo problema de este refinamiento extremo de los métodos de detección es la contaminación de superficies en laboratorios, en aparatos o materiales de trabajo con moléculas de ácido nucleico, proteínas o microorganismos no deseados.

Las contaminaciones microbianas originan además grandes problemas y pérdidas comerciales por ejemplo en el campo de la tecnología de los alimentos, en la producción, en hospitales, institutos de higiene y también en el hogar.

Estado de la técnica

Desde hace tiempo existen por tanto las más diversas disoluciones de descontaminación con sustancias químicas agresivas tales como por ejemplo formaldehído, alcoholes, fenoles, azida de sodio, hipocloruro de sodio contra microorganismos o agentes oxidantes fuertes, tales como por ejemplo hipocloruro, blanqueadores o ácidos minerales, que desnaturalizan proteínas y modifican ácidos nucleicos y hacen que sean no amplificables para métodos de amplificación tales como por ejemplo la reacción en cadena de la polimerasa (PCR), traslado de mellas con polimerasa Klenow, amplificación por desplazamiento de cadena, reacción en cadena de la ligasa, amplificación mediada por transcripción, amplificación por círculo rodante y muchas otros.

A este respecto los agentes oxidantes y productos químicos fuertemente agresivos usados para la descontaminación originan una modificación y desnaturalización permanente de las proteínas y la desestabilización de la doble cadena y modificaciones que bloquean una amplificación. En general resultan a este respecto modificaciones en grupos especialmente reactivos de las moléculas y daños oxidativos.

Por esto tales disoluciones químicas agresivas se usan en general para el lavado y fregado de aparatos, instrumentos y superficies de trabajo.

A este respecto, son desventajas de estas disoluciones y métodos en cada caso las eficacias sólo selectivas contra proteínas, ADN o microorganismos y la eliminación incompleta de todos los ácidos nucleicos, la conservación de las moléculas modificadas, la degradación sólo parcial y la agresividad de los productos químicos usados contra los aparatos, instrumentos, superficies y también la piel y las mucosas del usuario.

Una mejora gradual de la eficacia de este método se obtuvo con la combinación de las disoluciones con sustancias tensioactivas. Pero también con esto las sustancias químicas agresivas y la incompleta destrucción y eliminación de los ácidos nucleicos, proteínas y microorganismos siguen siendo problemáticas.

El interés comercial en tales disoluciones pone de relieve la ya amplia distribución comercial de disoluciones de descontaminación de ADN y proteínas correspondientes y agentes antimicrobianos con los más diversos nombres comerciales.

Por el documento DE-A-19 936 428 se conoce por ejemplo un bactericida, que contiene iones hierro (III) (Fe3+), ácido L-ascórbico y uno o varios miembros del grupo que consiste en ácido sórbico, ácido benzoico y éster del ácido para-hidroxibenzoico. El efecto bactericida de esta composición puede reforzarse por ejemplo mediante la adición de una pequeña cantidad de un agente tensioactivo.

Las desventajas de estas disoluciones de descontaminación y métodos conocidos son sus efectos sólo limitados contra distintas moléculas biológicas tales como o bien proteínas o bien ácidos nucleicos o un efecto sólo antimicrobiano y sus efectos químicos en parte muy agresivos con propiedades perjudiciales para la salud. Especialmente para la descontaminación de microorganismos existen hasta hoy sólo agentes que provocan la muerte, pero que no inactivan ni destruyen la información genética, el factor genético extracromosómico y proteínas.

Se sabe que en cantidades fisiológicas de concentraciones micromolares, antioxidantes en combinación con iones metálicos divalentes pueden conducir ocasionalmente a daños y roturas de cadenas parciales en moléculas de ácido nucleico (Padayatty S.J., Katz A., Wang Y., Eck P., Kwon O., Lee J.H., Chen S., Corpe C, Dutta A, Dutta SK y Levine M. (2003) Vitamin C as an antioxidant: evaluation of its role in disease prevention. J. Am. Coll. Nutr. 1, 18-35; Blokhina O., Virolainen E., Fagerstedt K.V. (2003) Antioxidants, Oxidative Damage and Oxigen Depriviation Stress: a Review. Annals Botany 91:179-194; Veal J. M., Merchant K. y Rill R. L. (1991) The influence of reducing agent and 1,10phenanthroline concentration on DNA cleavage by phenanthroline + copper. Nucl Acids Res Vol. 19, N.º 12, 3383-3388). Sin embargo éstos son sólo resultados aislados, ocasionales, que sólo puede aplicarse al caso individual respectivo.

Los nuevos conocimientos de la biología molecular moderna e ingeniería genética muestran que ya la información genética sola, genes individuales o incluso partes de los mismos, así como determinadas proteínas son suficientes para desencadenar enfermedades o para provocar cambios genéticos indeseados.

Por tanto, en la práctica existe la necesidad de procedimientos, agentes, métodos y disoluciones mejorados para una descontaminación eficaz y sobre todo completamente cuidadosa de superficies y aparatos de proteínas, ácidos nucleicos y microorganismos.

Resumen de la invención

Por tanto, el objetivo de la presente invención es vencer las desventajas del estado de la técnica y desarrollar nuevos procedimientos y disoluciones, que no trabajen con productos químicos agresivos o agentes fuertemente oxidantes y además descontaminen completamente los sustratos tratados.

Este objetivo se soluciona según la invención mediante una disolución de descontaminación, que contiene al menos una mezcla sinérgica de

a) al menos una vitamina en cantidades de desde 10 mM hasta 100 mM,

b) al menos un ion metálico en cantidades de desde 1 mM hasta 100 mM y

c) al menos un compuesto tensioactivo en cantidades de desde el 0,1% hasta el 10% en peso de la disolución total.

Con el uso de antioxidantes naturales en combinación con iones metálicos y sustancias tensioactivas se ha comprobado sorprendentemente que las más diversas vitaminas en combinación con iones metálicos y detergentes conducen a roturas de cadena y modificaciones masivas, extremadamente rápidas, en moléculas de ácido nucleico y proteínas. Este efecto sorprendente conduce a una muerte eficaz de los microorganismos mediante la inactivación y destrucción de su información genética y proteínas. Especialmente sorprendente y novedoso es el hallazgo de que con el sistema de tres componentes según la invención la inactivación y degradación transcurre esencialmente con la misma eficacia en todo el intervalo de pH de desde 2 hasta 8,5. Dado que puede trabajarse en un intervalo de pH suave en comparación, la disolución según la invención cuida las superficies que van a tratarse de manera ventajosa y además es compatible con la piel del usuario. Pulverizando, extendiendo o sumergiendo en la disolución los tres componentes, se desnaturalizan, solubilizan, inactivan, degradan y eliminan proteínas y ácidos nucleicos y con ello se destruyen entonces también microorganismos de manera muy eficaz.

En una configuración ventajosa de la invención se prevé que la mezcla presente un valor de pH en el intervalo de desde 3 hasta 7, preferiblemente desde 4 hasta 6. En estos intervalos de pH la disolución según la invención es estable durante periodos de tiempo mayores y posibilitan una degradación especialmente eficaz de los ácidos nucleicos. Además, en el intervalo de desde pH 4 hasta 6 la... [Seguir leyendo]

1. Disolución de descontaminación, que contiene al menos una mezcla sinérgica de

a) al menos una vitamina en cantidades de desde 10 mM hasta 100 mM,

b) al menos un ion metálico en cantidades de desde 1 mM hasta 100 mM y

c) al menos un compuesto tensioactivo en cantidades de desde el 0,1% hasta el 10% en peso de la disolución total.

2. Disolución de descontaminación según la reivindicación 1, caracterizada porque la mezcla presenta un valor de pH en el intervalo de desde 2 hasta 8,5.

3. Disolución de descontaminación según la reivindicación 1 ó 2, caracterizada porque la mezcla contiene adicionalmente un sistema tampón con carbonatos y derivados del ácido succínico.

4. Disolución de descontaminación según al menos una de las reivindicaciones 1 a 3, caracterizada porque como vitaminas, sus sales o derivados ácidos, está contenido al menos un compuesto, seleccionado del grupo de las vitaminas solubles en agua con las propiedades de los antioxidantes.

5. Disolución de descontaminación según al menos una de las reivindicaciones 1 a 4, caracterizada porque los iones metálicos proceden de los metales del 4º periodo y de los subgrupos I, II o VIII del sistema periódico de los elementos.

6. Disolución de descontaminación según la reivindicación 5, caracterizada porque los metales se encuentran en forma de sus sales con ácidos o bases.

7. Disolución de descontaminación según al menos una de las reivindicaciones 1 a 6, caracterizada porque como sustancia tensioactiva está contenido al menos un compuesto seleccionado del grupo de los tensioactivos aniónicos, no iónicos, anfóteros o catiónicos o mezclas adecuadas entre sí o unos con otros.

8. Disolución de descontaminación según al menos una de las reivindicaciones 1 a 7, caracterizada porque el ion metálico según b) está contenido en cantidades de desde 5 mM hasta 10 mM.

9. Disolución de descontaminación según al menos una de las reivindicaciones 1 a 8, caracterizada porque la sustancia tensioactiva según c) está contenida en cantidades de desde el 0,2% hasta el 0,5% en peso de la disolución total.

10. Uso no terapéutico de las disoluciones según al menos una de las reivindicaciones 1 a 9, para la desnaturalización, modificación, degradación, solubilización y eliminación de proteínas y moléculas de ácido nucleico de superficies.

11. Procedimiento para ajustar el valor de pH de una disolución de descontaminación según al menos una de las reivindicaciones 1 a 9, caracterizado porque la mezcla se ajusta por medio de un sistema tampón que comprende carbonatos y derivados del ácido succínico a un valor de pH en el intervalo de desde 2 hasta 8,5.