COMPUESTOS QUE ANULAN EL PUNTO DE CONTROL G2 DEL CICLO CELULAR INDUCIDO POR DAÑOS EN EL ADN Y/O QUE INCREMENTAN LA ACTIVIDAD ANTICANCEROSA DE LOS TRATAMIENTOS QUE DAÑAN EL ADN.

Compuestos que anulan el punto de control G2 del ciclo celular inducido por daños en el ADN y/o que incrementan la actividad anticancerosa de los tratamientos que dañan el ADN. Campo de la invención La presente invención se refiere a compuestos químicos que presentan una actividad de antiproliferación celular, y a la producción de los mismos, así como a las composiciones farmacéuticas que los contienen, y a métodos de tratamiento de trastornos proliferativos que utilizan dichos compuestos y composiciones. Por lo tanto, los compuestos de la invención resultan útiles para inhibir la proliferación celular y, de esta manera, para tratar los trastornos de proliferación celular, incluyendo el cáncer. En particular, la invención se refiere a compuestos que anulan el punto de control G2 del ciclo celular, incluyendo el punto de control G2 inducido por daños en el ADN, que resulta útil en el tratamiento de trastornos proliferativos tales como cáncer, incluyendo el tratamiento de tumores sólidos o líquidos metastásicos y no metastásicos. Antecedentes El ciclo celular comprende la etapa S (replicación del ADN), la etapa M (mitosis) y dos etapas de hueco (etapas G1 y G2) entre las etapas S y M. Los puntos de control del ciclo celular garantizan un avance preciso a través de los estadios del ciclo celular, e incluyen el seguimiento del estado de la integridad del ADN, de la replicación del ADN, del tamaño celular y del ambiente circundante (Maller, Curr. Opin. Cell Biol. 3:26, (1991)). Resulta especialmente importante para los organismos multicelulares mantener la integridad del genoma, y existen múltiples puntos de control que realizan un seguimiento del estado del genoma. Entre ellos se encuentran los puntos de control G1 y G2 antes de la replicación del ADN y la mitosis, respectivamente. Resulta crucial reparar o corregir los daños en el ADN antes de entrar en la etapa S, debido a que tras resultar dañado, el ADN se replica, dando lugar con frecuencia a mutaciones (Hartwell, Cell 71:543, (1992)). El avance a través de los puntos de control G1 y G2 sin reparación de daños de consideración en el ADN induce la catástrofe mitótica y/o la apoptosis. La mayoría de células de cáncer son portadoras de anormalidades en las proteínas relacionadas con el punto de control G1 tales como p53, Rb, MDM-2, p16 INK4 y p19 ARF (Levine, Cell 88:323, (1997)). Alternativamente, las mutaciones pueden provocar la sobreexpresión y/o sobreactivación de los productos oncogénicos, por ejemplo Ras, MDM-2 y ciclina D, que reducen la astringencia del punto de control G1. Además de dichas mutaciones, la señalización excesiva de factor de crecimiento puede estar causada por la sobreexpresión de factores de crecimiento y puede reducir la astringencia del punto de control G1. Conjuntamente con las mutaciones de pérdida de función y de ganancia de función, la activación continua de los receptores de factor de crecimiento o de moléculas transductoras de señal posteriores puede provocar la transformación celular al anular el punto de control G1. Un punto de control G1 interrumpido o anulado contribuye a tasas de mutación más altas y a las muchas mutaciones observadas en las células de cáncer. En consecuencia, la mayoría de las células de cáncer dependen del punto de control G2 para sobrevivir frente a daños excesivos en el ADN (O'Connor y Fan, Prog. Cell Cycle Res. 2:165, (1996)). El punto de control G2 del ciclo celular restringe el inicio de la mitosis hasta que la replicación y la reparación del ADN se han completado. El mal funcionamiento del punto de control G2 permitiría un inicio prematuro de la mitosis antes de completarse la replicación y reparación del ADN, produciendo células hija que carecen de una parte sustancial del ADN genómico o portadoras de mutaciones. Las funciones del punto de control G2 comprenden la detección de daños al ADN y la generación de una señal que puede conducir a la detención del ciclo celular al detectarse daños en el ADN. El mecanismo que induce la detención en G2 del ciclo celular tras producirse daños en el ADN se cree que se encuentra conservado en especies que comprenden las levaduras hasta el ser humano. En presencia de ADN dañado, la Cdc2/ciclina B quinasa se mantiene inactiva mediante la fosforilación de los residuos treonina-14 y treonina-15 en la Cdc2 quinasa; alternativamente, puede reducirse el nivel de proteína ciclina B. Al inicio de la mitosis, la Cdc25 fosfatasa elimina los fosfatos inhibidores de la Cdc2/ciclina B quinasa, activando de esta manera la Cdc2/ciclina B quinasa. La activación de la Cdc2/ciclina B quinasa resulta equivalente al inicio de la etapa M. En las levaduras de fisión, la proteína quinasa Chk1 resulta necesaria para la detención del ciclo celular en respuesta a daños en el ADN. La Chk1 quinasa actúa después de varios productos génicos rad y resulta modificada mediante fosforilación tras producirse daños en el ADN. Las quinasas Rad53 de las levaduras en gemación y las Cds1 de las levaduras de fisión es conocido que conducen señales procedentes del ADN no replicado. Aparentemente existe cierta redundancia entre Chk1 y Cds1 debido a que la eliminación de ambos, Chk1 y Cds1, culmina en la interrupción de la detención de G2 inducida por el ADN dañado. Resulta interesante que tanto Chk1 como Cds1 fosforilan Cdc25 y estimulan la unión de Rad24 a Cdc25, que secuestra Cdc25 hacia el citosol e impide la activación de Cdc2/ciclina B. Por lo tanto, aparentemente Cdc25 es una diana común de estas quinasas, lo que implica que esta molécula es un factor indispensable en el punto de control G2. 2   En el ser humano, tanto hChk1, un homólogo humano de la Chk1 de levadura de fisión, como Chk2/HuCds1, un homólogo humano de la Rad53 de levadura en gemación y la Cds1 de levadura de fisión, fosforilan Cd25C en la serina-216, un sitio de regulación crítico, en respuesta a daños en el ADN. Esta fosforilación crea un sitio de unión para las proteínas ácidas pequeñas 14-3-3s, homólogos humanos de Rad24 y Rad25 de las levaduras de fisión. El papel regulador de esta fosforilación queda claramente demostrado por el hecho de que la sustitución de la serina- 216 por alanina en Cdc25C interrumpía la detención en G2 del ciclo celular en células humanas. Sin embargo, todavía no se entiende por completo el mecanismo del punto de control G2. El documento WO 99/48495 describe unos métodos para inhibir la angiogénesis no deseada utilizando compuestos de fórmula general I. La patente US nº 4.394.389 se refiere a un método de inhibición de la ribonucleótido reductasa que comprende administrar un compuesto según la fórmula general I en un mamífero portador de un tumor que presenta un nivel de ribonucleótido reductasa relativamente alto. El documento WO 97/46228 da a conocer unos métodos de tratamiento del cáncer utilizando análogos de tiroxina que no presentan actividad hormonal significativa. La patente US nº 5.200.550 describe ésteres aromáticos de fórmula general (I). Sumario La invención se define en las reivindicaciones. Breve descripción de los dibujos La figura 1 representa los resultados del análisis de citometría de flujo del contenido de ADN de células Jurkat tras el tratamiento con bleomicina (40 µg/ml) o de bleomicina más CBDC402 a diversas concentraciones (0,2, 0,39, 0,78, 1,56, 3,125, 6,25, 12,5, 25 y 50 µg/ml) durante 24 horas. La figura 2 representa los resultados del análisis de citometría de flujo del contenido de ADN de las células Jurkat tras el tratamiento con colchicina (5 µg/ml) o con colchicina más CBDC402 a diversas concentraciones (0,2, 0,39, 0,78, 1,56, 3,125, 6,25, 12,5, 25 y 50 µg/ml) durante 24 horas. La figura 3a-b representa las actividades de diversos compuestos CBDC; la figura 3a representa una curva de dosisrespuesta para la anulación del punto de control G2 por parte de diversos compuestos CBDC, y la figura 3b ilustra las relaciones de estructura-actividad de los compuestos CBDC. La figura 4 representa las estructuras, nombres químicos y códigos CBDC para determinados compuestos CBDC. La figura 5 representa la estructura y actividades relativas de determinados compuestos CBDC. La figura 6 representa los valores de IC50 para la anulación del punto de control G2 por parte de determinados compuestos CBDC. La figura 7 representa los resultados del análisis de citometría de flujo del contenido de ADN de células HCT116 tras el tratamiento con adriamicina (ADR), bleomicina (Bleo), comptotecina (Campto) y cisplatino (CDDP) durante 24 horas, tratándose a continuación las células sin CBDC004, o con 2 µM, 10 µM ó 50 µM de CBDC004. La figura 8 representa los resultados del análisis de citometría de flujo de los resultados de citotoxicidad (% de población subG1) para células HCT116 tratadas con bleomicina (10 µg/ml), adriamicina (1 µg/ml), camptotecina... [Seguir leyendo]

R2 es bromo (Br), cloro (Cl), flúor (F), yodo (I), metilo (CH3), O-metilo (OCH3), hidroxi (OH), CH(CH3)2, CHO, CHOCH3, O(CH2)nCH3, OCO(C6H12)Cl, COOCH3 o hidrógeno; R3 es bromo (Br), cloro (Cl), flúor (F), yodo (I), metilo (CH3), O-metilo (OCH3), hidroxi (OH), CH(CH3)2, CHO, CHOCH3, O(CH2)nCH3, OCO(C6H12)Cl, COOCH3 o hidrógeno; R4 es bromo (Br), cloro (Cl), flúor (F), yodo (I), metilo (CH3), O-metilo (OCH3), hidroxi (OH), CH(CH3)2, CHO, CHOCH3, O(CH2)nCH3, OCO(C6H12)Cl, COOCH3 o hidrógeno; R5 es bromo (Br), cloro (Cl), flúor (F), yodo (I), metilo (CH3), O-metilo (OCH3), hidroxi (OH), CH(CH3)2, CHO, CHOCH3, O(CH2)nCH3, OCO(C6H12)Cl, COOCH3 o hidrógeno; R6 es bromo (Br), cloro (Cl), flúor (F), yodo (I), metilo (CH3), O-metilo (OCH3), hidroxi (OH), CH(CH3)2, CHO, CHOCH3, O(CH2)nCH3, OCO(C6H12)Cl, COOCH3 o hidrógeno; X1 es nitrógeno (NH), oxígeno (O) o azufre (S); y X2 es oxígeno (O) o azufre (S) para la utilización en el tratamiento de un trastorno de proliferación celular. 2. Compuesto para la utilización en el tratamiento de un trastorno de la proliferación celular según la reivindicación 1, en el que el compuesto es el 4-metoxi-fenil-éster del ácido 4-cloro-benzoico (CBDC004) que presenta la estructura: o en el que el compuesto es el p-tolil-éster del ácido 4-cloro-benzoico (CBDC401) que presenta la estructura: o en el que el compuesto es el p-tolil-éster del ácido 4-bromo-benzoico (CBDC402) que presenta la estructura: o en el que el compuesto es el p-tolil-éster del ácido 3,4,5-trifluoro-benzoico (CBDC403) que presenta la estructura: 19   o en el que el compuesto es el 4-bromo-fenil-éster del ácido 4-fluoro-benzoico (CBDC404) que presenta la estructura: o en el que el compuesto es el p-tolil-éster del ácido 3,4-dicloro-benzoico (CBDC405) que presenta la estructura: o en el que el compuesto es el p-tolil-éster del ácido 4-fluoro-benzoico (CBDC407) que presenta la estructura: o en el que el compuesto es el 3,4-dimetil-fenil-éster del ácido 4-cloro-benzoico (CBDC409) que presenta la estructura: o en el que el compuesto es el 4-hidroxi-fenil-éster del ácido 4-cloro-benzoico (CBDC410) que presenta la estructura: o en el que el compuesto es el 4-hidroxi-fenil-éster del ácido 4-fluoro-benzoico (CBDC411) que presenta la estructura: o en el que el compuesto es el 4-fluoro-fenil-éster del ácido 4-bromo-benzoico (CBDC412) que presenta la estructura:   o en el que el compuesto es el 4-trifluorometil-fenil-éster del ácido 4-bromo-benzoico (CBDC413) que presenta la estructura: o en el que el compuesto es el 4-hidroxi-fenil-éster del ácido 4-bromo-benzoico (CBDC414) que presenta la estructura: o en el que el compuesto es el 4-trifluorometoxi-fenil-éster del ácido 4-bromo-benzoico (CBDC415) que presenta la estructura: o en el que el compuesto es el O-p-tolil-éster del ácido 4-bromo-tiobenzoico (CBDC440) que presenta la estructura: o en el que el compuesto es el p-tolil-éster del ácido 4-bromo-ditiobenzoico (CBDC441) que presenta la estructura: 21   o en el que el compuesto es el S-p-tolil-éster del ácido 4-bromo-tiobenzoico (CBDC442) que presenta la estructura: 3. Método in vitro de anulación del punto de control G2 del ciclo celular en una célula, o para destruir o suprimir una célula que presenta un trastorno de la proliferación, que comprende la administración a la célula en una cantidad efectiva para inhibir el punto de control G2 de un compuesto que presenta la estructura siguiente: en la que: R1 es bromo (Br), cloro (Cl), flúor (F) o yodo (I) R2 es bromo (Br), cloro (Cl), flúor (F), yodo (I), metilo (CH3), O-metilo (OCH3), hidroxi (OH), CH(CH3)2, CHO, CHOCH3, O(CH2)nCH3, OCO(C6H12)Cl, COOCH3 o hidrógeno; R3 es bromo (Br), cloro (Cl), flúor (F), yodo (I), metilo (CH3), O-metilo (OCH3), hidroxi (OH), CH(CH3)2, CHO, CHOCH3, O(CH2)nCH3, OCO(C6H12)Cl, COOCH3 o hidrógeno; R4 es bromo (Br), cloro (Cl), flúor (F), yodo (I), metilo (CH3), O-metilo (OCH3), hidroxi (OH), CH(CH3)2, CHO, CHOCH3, O(CH2)nCH3, OCO(C6H12)Cl o COOCH3; R5 es bromo (Br), cloro (Cl), flúor (F), yodo (I), metilo (CH3), O-metilo (OCH3), hidroxi (OH), CH(CH3)2, CHO, CHOCH3, O(CH2)nCH3, OCO(C6H12)Cl, COOCH3 o hidrógeno; R6 es bromo (Br), cloro (Cl), flúor (F), yodo (I), metilo (CH3), O-metilo (OCH3), hidroxi (OH), CH(CH3)2, CHO, CHOCH3, O(CH2)nCH3, OCO(C6H12)Cl, COOCH3 o hidrógeno; X1 es nitrógeno (NH), oxígeno (O) o azufre (S); y X2 es oxígeno (O) o azufre (S), 4. Método según la reivindicación 3, en el que el compuesto es el 4-metoxi-fenil-éster del ácido 4-cloro-benzoico (CBDC004) que presenta la estructura: o en el que el compuesto es el p-tolil-éster del ácido 4-cloro-benzoico (CBDC401) que presenta la estructura: o en el que el compuesto es el p-tolil-éster del ácido 4-bromo-benzoico (CBDC402) que presenta la estructura: 22   o en el que el compuesto es el p-tolil-éster del ácido 3,4,5-trifluoro-benzoico (CBDC403) que presenta la estructura: o en el que el compuesto es el 4-bromo-fenil-éster del ácido 4-fluoro-benzoico (CBDC404) que presenta la estructura: o en el que el compuesto es el p-tolil-éster del ácido 3,4-dicloro-benzoico (CBDC405) que presenta la estructura: o en el que el compuesto es el p-tolil-éster del ácido 4-fluoro-benzoico (CBDC407) que presenta la estructura: o en el que el compuesto es el 3,4-dimetil-fenil-éster del ácido 4-cloro-benzoico (CBDC409) que presenta la estructura: o en el que el compuesto es el 4-hidroxi-fenil-éster del ácido 4-cloro-benzoico (CBDC410) que presenta la estructura: o en el que el compuesto es el 4-hidroxi-fenil-éster del ácido 4-fluoro-benzoico (CBDC411) que presenta la estructura: 23   o en el que el compuesto es el 4-fluoro-fenil-éster del ácido 4-bromo-benzoico (CBDC412) que presenta la estructura: o en el que el compuesto es el 4-trifluorometil-fenil-éster del ácido 4-bromo-benzoico (CBDC413) que presenta la estructura: o en el que el compuesto es el 4-hidroxi-fenil-éster del ácido 4-bromo-benzoico (CBDC414) que presenta la estructura: o en el que el compuesto es el 4-trifluorometoxi-fenil-éster del ácido 4-bromo-benzoico (CBDC415) que presenta la estructura: o en el que el compuesto es el O-p-tolil-éster del ácido 4-bromo-tiobenzoico (CBDC440) que presenta la estructura: o en el que el compuesto es el p-tolil-éster del ácido 4-bromo-ditiobenzoico (CBDC441) que presenta la estructura: 24   o en el que el compuesto es el S-p-tolil-éster del ácido 4-bromo-tiobenzoico (CBDC442) que presenta la estructura: 5. Compuesto 6-metil-piridín-3-il-éster del ácido 4-bromo-benzoico (CBDC418) que presenta la estructura: para la utilización en el tratamiento de un trastorno de proliferación celular. 6. Compuesto para la utilización en el tratamiento de un trastorno de proliferación celular según la reivindicación 1, 2 ó 5, en el que la anulación del punto de control G2 del ciclo celular anula el punto de control G2 inducido por daños en el ADN en una célula. 7. Compuesto para la utilización en el tratamiento de un trastorno de proliferación celular según la reivindicación 6, en el que la anulación del punto de control G2 del ciclo celular está destinada a suprimir o destruir selectivamente las células con el ADN dañado en una población de células que comprende células normales y células con el ADN dañado. 8. Compuesto para la utilización en el tratamiento de un trastorno de proliferación celular según la reivindicación 6 ó 7, en el que la anulación del punto de control G2 del ciclo celular está destinada a la sensibilización de las células con el ADN dañado a un agente o tratamiento que daña el ADN. 9. Compuesto para la utilización en el tratamiento de un trastorno de proliferación celular según cualquiera de las reivindicaciones 6 a 8, en el que las células con el ADN dañado son células cancerosas. 10. Compuesto para la utilización en el tratamiento de un trastorno de proliferación celular según cualquiera de las reivindicaciones 6 a 9, en el que las células con el ADN dañado son células tumorales de xenoinjerto. 11. Compuesto para la utilización en el tratamiento de un trastorno de proliferación celular según la reivindicación 7 u 8, en el que el compuesto se utiliza en combinación con por lo menos un agente que daña el ADN. 12. Método in vitro de anulación del punto de control G2 del ciclo celular en una célula, o para la destrucción o supresión de una célula que presenta un trastorno de la proliferación, que comprende administrar a la célula en una cantidad efectiva para inhibir el punto de control G2 el compuesto 6-metil-piridín-3-il-éster del ácido 4-bromobenzoico (CBDC418) que presenta la estructura:   13. Método según la reivindicación 3, 4 ó 12, en el que la anulación del punto de control G2 del ciclo celular anula el punto de control G2 inducido por daños en el ADN en una célula. 14. Método según la reivindicación 13, en el que la anulación del punto de control G2 del ciclo celular está destinada a suprimir o destruir selectivamente las células con el ADN dañado en una población de células que comprende células normales y células con el ADN dañado. 15. Método según la reivindicación 13 ó 14, en el que la anulación del punto de control G2 del ciclo celular está destinada a sensibilizar las células con el ADN dañado frente a un agente o tratamiento que daña el ADN. 16. Método según cualquiera de las reivindicaciones 13 a 15, en el que las células con el ADN dañado son células cancerosas. 17. Método según cualquiera de las reivindicaciones 13 a 16, en el que las células con el ADN dañado son células tumorales de xenoinjerto. 18. Método según la reivindicación 14 ó 15, en el que el compuesto se utiliza en combinación con por lo menos un agente que daña el ADN. 19. Composición que comprende un compuesto seleccionado de entre: p-tolil-éster del ácido 3,4,5-trifluoro-benzoico (CBDC403), 4-trifluorometil-fenil-éster del ácido 4-bromo-benzoico (CBDC413); 4-hidroxi-fenil-éster del ácido 4-bromo-benzoico (CBDC414); 4-trifluorometoxi-fenil-éster del ácido 4-bromo-benzoico (CBDC415), 6-metil-piridín-3il-éster del ácido 4-bromo-benzoico (CBDC418); O-p-tolil-éster del ácido 4-bromo-tiobenzoico (CBDC440); y p-toliléster del ácido 4-bromo-ditiobenzoico (CBDC441). 20. Composición farmacéutica que comprende un portador farmacéuticamente aceptable y una composición según la reivindicación 19. 21. Composición farmacéutica según la reivindicación 20, que comprende además un agente que daña el ADN. 22. Composición que comprende un compuesto para la utilización en el tratamiento de un trastorno de proliferación celular, en la que el compuesto se selecciona de entre: p-tolil-éster del ácido 3,4,5-trifluorobenzoico (CBDC403); p-tolil-éster del ácido 3,4-dicloro-benzoico (CBDC405); p-tolil-éster del ácido 2,4-dicloro-benzoico (CBDC406); p-tolil- éster del ácido 4-fluorobenzoico (CBDC407); p-tolil-éster del ácido 2,3,4,5,6-pentafluoro-benzoico (CBDC408); 4-hidroxi-fenil-éster del ácido 4-fluoro-benzoico (CBDC411); 4-trifluorometil-fenil-éster del ácido 4-bromo-benzoico (CBDC413); 4-hidroxi-fenil-éster del ácido 4-bromo-benzoico (CBDC414); 4-trifluorometoxi-fenil-éster del ácido 4-bromo-benzoico (CBDC415); 6-metil-piridín-3-il-éster del ácido 4-bromo-benzoico (CBDC418); O-p-tolil-éster del ácido 4-bromo-tiobenzoico (CBDC440); p-tolil-éster del ácido 4-bromo-ditiobenzoico (CBDC441); y S-p-tolil-éster del ácido 4-bromo-tiobenzoico (CBDC442). 26   27   28   29     31   32   33   34     36   37   38