PROCEDIMIENTO DE PRODUCCION DE CEPAS DE STAPHYLOCOCUS AUREUS SUPERPRODUCTORAS.
Procedimiento de producción de una cepa superproductora de Staphylococcus aureus,
que comprende:
(a) el cultivo de una cepa de Staphylococcus aureus en un medio de cultivo M1 que, por litro de medio de cultivo, comprende:
5 a 100 g de peptona vegetal,
0,5 a 20 g de extracto de levadura,
1 a 30 g de azúcar,
1 a 200 mg de una sal de hierro seleccionada del grupo consistente en FeCl3 y FeSO4,
1 a 700 mg de una sal de magnesio seleccionada del grupo consistente en MgCl2 y MgSO4,
0,1 a 500 mg de CaCl2,
0 a 50 mg de ZnCl2,
10 a 250 g de NaCl, preferentemente 58,5 g/l, y
cuyo pH está comprendido en un intervalo de valores que va de 6,2 a 7,5, y
eventualmente la recuperación de las cepas así producidas a partir del medio de cultivo
Tipo: Patente Internacional (Tratado de Cooperación de Patentes). Resumen de patente/invención. Número de Solicitud: PCT/FR2006/000880.
Solicitante: SANOFI PASTEUR.
Nacionalidad solicitante: Francia.
Dirección: 2, AVENUE PONT PASTEUR,69367 LYON CEDEX 07.
Inventor/es: ROKBI,BACHRA, LAFONT,CELINE.
Fecha de Publicación: .
Fecha Concesión Europea: 21 de Abril de 2010.
Clasificación Internacional de Patentes:
- C12N1/20 QUIMICA; METALURGIA. › C12 BIOQUIMICA; CERVEZA; BEBIDAS ALCOHOLICAS; VINO; VINAGRE; MICROBIOLOGIA; ENZIMOLOGIA; TECNICAS DE MUTACION O DE GENETICA. › C12N MICROORGANISMOS O ENZIMAS; COMPOSICIONES QUE LOS CONTIENEN; PROPAGACION, CULTIVO O CONSERVACION DE MICROORGANISMOS; TECNICAS DE MUTACION O DE INGENIERIA GENETICA; MEDIOS DE CULTIVO (medios para ensayos microbiológicos C12Q 1/00). › C12N 1/00 Microorganismos, p.ej. protozoos; Composiciones que los contienen (preparaciones de uso médico que contienen material de protozoos, bacterias o virus A61K 35/66, de algas A61K 36/02, de hongos A61K 36/06; preparación de composiciones de uso médico que contienen antígenos o anticuerpos bacterianos, p. ej. vacunas bacterianas, A61K 39/00 ); Procesos de cultivo o conservación de microorganismos, o de composiciones que los contienen; Procesos de preparación o aislamiento de una composición que contiene un microorganismo; Sus medios de cultivo. › Bacterias; Sus medios de cultivo.
- C12N1/36 C12N 1/00 […] › Adaptación o atenuación de células.
- C12P19/04 C12 […] › C12P PROCESOS DE FERMENTACION O PROCESOS QUE UTILIZAN ENZIMAS PARA LA SINTESIS DE UN COMPUESTO QUIMICO DADO O DE UNA COMPOSICION DADA, O PARA LA SEPARACION DE ISOMEROS OPTICOS A PARTIR DE UNA MEZCLA RACEMICA. › C12P 19/00 Preparación de compuestos que contienen radicales sacárido (ácido cetoaldónico C12P 7/58). › Polisacáridos, es decir, compuestos que contienen más de cinco radicales sacárido unidos entre ellos por enlaces glucosídicos.
Clasificación PCT:
Fragmento de la descripción:
Procedimiento de producción de cepas de Staphylococcus aureus superproductoras.
La presente invención se refiere a un procedimiento de producción de cepas superproductoras de Staphylococcus aureus y a su utilización en un procedimiento de producción de polisacáridos capsulares.
Los polisacáridos capsulares de Staphylococcus aureus, en particular los polisacáridos de los serotipos 5 y 8, se describen en la bibliografía como componentes de interés para la fabricación de una vacuna destinada a proteger contra las infecciones debidas a Staphylococcus aureus.
Las cepas T5 y T8 están microcapsuladas y, por tanto, producen pequeñas cantidades de polisacáridos capsulares de interés. Las cantidades de polisacáridos capsulares que deben estar incluidos en una vacuna son importantes debido al hecho del deficiente sistema inmunitario de las poblaciones objetivo (véase, por ejemplo, Fattom, A. et al. (1995) Vaccine 13, 1288-1293).
Por tanto, en el marco de un desarrollo industrial de una vacuna de este tipo es importante poder producir grandes cantidades de polisacáridos capsulares T5 y T8.
Es bajo esta óptica que los inventores han dado a conocer un nuevo procedimiento que permite aumentar sustancialmente la capacidad de secreción de polisacárido capsular de las cepas de Staphylococcus aureus. Los inventores proporcionan, por tanto, un procedimiento de producción que permite obtener polisacárido capsular de Staphylococcus aureus en grandes cantidades.
Según un primer aspecto, la presente invención se refiere, por tanto, a un procedimiento de producción de cepas superproductoras de Staphylococcus aureus, que comprende:
cuyo pH está comprendido en un intervalo de valores que va de 6,2 a 7,5, y
Según otro modo de realización ventajoso el medio M1 contiene por litro:
Según un modo de realización particular, el procedimiento de producción de cepas superproductoras comprende una etapa de precultivo en un medio de precultivo M0 que comprende:
cuyo pH está comprendido en un intervalo de valores que va de 6,2 a 7,5.
Según un modo particular de realización del procedimiento de producción de cepas superproductoras, la etapa de precultivo utiliza un medio de precultivo M0 que, por litro, comprende 3,87 g de peptona de trigo.
Según otro modo de realización del procedimiento de producción de cepas superproductoras, la etapa de precultivo utiliza un medio de precultivo M0 que, por litro, comprende 30 g de peptona de trigo.
Según un modo de realización ventajoso del procedimiento de producción de cepas superproductoras, la etapa de precultivo utiliza un medio de precultivo M0 gelosado que contiene: 3,87 g de peptona de trigo, 5 g de extracto de levadura, 1 g de D-glucosa H2O, 120 mg de FeCl3.6H2O, 400 mg de MgCl2.6H2O, 10 mg de CaCl2.2H2O, 6 g de NaCl, 5 mg de ZnCl2, 6,8 g de (NH4)2SO4, 6 g de NH4Cl, 15 g/l de agar y pH=6,5.
Según otro modo de realización ventajoso del procedimiento de producción de cepas superproductoras, la etapa de precultivo utiliza un medio de precultivo M0 líquido que contiene: 30 g de peptona de trigo, 5 g de extracto de levadura, 1 g de D-glucosa H2O, 120 mg de FeCl3.6H2O, 400 mg de MgCl2.6H2O, 10 mg de CaCl2.2H2O, 6 g de NaCl, 5 mg de ZnCl2, 6,8 g de (NH4)2SO4, 6 g de NH4Cl, y pH=6,5.
Según otro aspecto, la presente invención proporciona por tanto un procedimiento de producción de polisacáridos capsulares que comprende:
Según un modo de realización del procedimiento de producción de polisacáridos capsulares, la etapa de cultivo utiliza un medio de cultivo M1 que comprende peptona de trigo.
Según un modo de realización, el procedimiento de producción de polisacáridos capsulares comprende una etapa de precultivo tal como fue definida anteriormente en relación con el procedimiento de producción de cepas superproductoras.
La presente invención tiene igualmente por objeto un medio de cultivo M1 adaptado a la superproducción de polisacárido capsular de Staphylococcus aureus que comprende:
Reivindicaciones:
1. Procedimiento de producción de una cepa superproductora de Staphylococcus aureus, que comprende:
cuyo pH está comprendido en un intervalo de valores que va de 6,2 a 7,5, y
eventualmente la recuperación de las cepas así producidas a partir del medio de cultivo.
2. Un procedimiento de producción de una cepa superproductora según la reivindicación 1, en la cual el medio de cultivo M1 de la etapa (a) comprende peptona de trigo.
3. Un procedimiento de producción de una cepa superproductora según la reivindicación 1 o 2, en la cual el medio de cultivo M1, por litro de medio de cultivo, comprende:
4. Un procedimiento de producción según la reivindicación 3, en el cual el medio M1 consiste por litro en: 30 g de peptona de trigo, 5 g de extracto de levadura, 1 g de D-glucosa H2O, 120 mg de FeCl3.6H2O, 400 mg de MgCl2.6H2O, 10 mg de CaCl2. 2H2O, 58,5 g de NaCl, 5 mg de ZnCl2, 6,8 g de (NH4)2SO4, 6 g de NH4Cl y pH=6,5.
5. Un procedimiento de producción de una cepa superproductora según una cualquiera de las reivindicaciones precedentes, que comprende una etapa de precultivo en un medio de cultivo M0 que comprende:
cuyo pH está comprendido en un intervalo de valores que va de 6,2 a 7,5.
6. Un procedimiento de producción según la reivindicación 5 en el cual el medio M0 de la etapa de precultivo comprende 3,87 g o 30 g de peptona de trigo.
7. Un procedimiento de producción según una cualquiera de las reivindicaciones 5 o 6, en el cual el medio M0 de la etapa de precultivo comprende:
8. Un procedimiento de producción de polisacárido capsular que comprende:
9. Un procedimiento de producción de polisacárido capsular según la reivindicación 8, en el cual el medio M1 de la etapa de cultivo comprende peptona de trigo.
10. Un procedimiento de producción de polisacárido capsular según una cualquiera de las reivindicaciones 8 o 9, en el cual el medio M1 de la etapa de cultivo comprende por litro de medio de cultivo: 30 g de peptona de trigo, 5 g de extracto de levadura, 1 g de D-glucosa H2O,120 mg de FeCl3.6H2O, 400 mg de MgCl2.6H2O, 10 mg de CaCl2.2H2O, 58,5 g de NaCl, 5 mg de ZnCl2, 6,8 g de (NH4)2SO4, 6 g de NH4Cl y pH=6,5.
11. Un procedimiento de producción de polisacárido capsular según la reivindicación 10, en el cual el medio M1, por litro de medio de cultivo, consiste en: 30 g de peptona de trigo, 5 g de extracto de levadura, 1 g de D-glucosa H2O, 120 mg de FeCl3.6H2O, 400 mg de MgCl2.6H2O, 10 mg de CaCl2.2H2O, 58,5 g de NaCl, 5 mg de ZnCl2, 6,8 g de (NH4)2SO4, 6 g de NH4Cl y pH=6,5.
12. Un procedimiento de producción de polisacárido capsular según una cualquiera de las reivindicaciones 8 a 11 que comprende una etapa de precultivo tal como se define en una cualquiera de las reivindicaciones 5 a 7.
13. Medio de cultivo M1 adaptado a la superproducción de polisacárido capsular que comprende:
cuyo pH está comprendido en un intervalo de valores que va de 6,2 a 7,5.
14. Un medio de cultivo M1 según la reivindicación 13 que comprende:
Patentes similares o relacionadas:
Diversificación de los oligosacáridos de la leche humana (HMO) o sus precursores, del 8 de Julio de 2020, de Glycom A/S: Un metodo de preparacion de una mezcla diversificada que comprende dos o mas oligosacaridos de la leche humana (HMO), el metodo comprende las etapas de […]
Método de producción de compuestos de inclusión de flavonoide, del 3 de Junio de 2020, de TAIYO KAGAKU CO., LTD.: Un método de producción de un compuesto de inclusión de flavonoide, que comprende una etapa de escisión que comprende tratar un flavonoide escasamente […]
Métodos para la degradación o la conversión de polisacáridos de la pared celular vegetal, del 6 de Mayo de 2020, de NOVOZYMES, INC.: Metodo para degradar o convertir los polisacaridos de la pared celular vegetal en uno o mas azucares, que comprende: tratar los polisacaridos de la pared celular vegetal con […]
Construcción de nuevas variantes de dextransacarasa DSR-S por ingeniería genética, del 6 de Mayo de 2020, de CENTRE NATIONAL DE LA RECHERCHE SCIENTIFIQUE: 1. Una dextransacarasa que consiste en una secuencia que tiene el 90 %, el 95 % o el 98 % de similitud de secuencia con una secuencia de aminoácidos seleccionada del fragmento […]
Procedimiento para la purificación de hidrolizado de biomasa, del 29 de Abril de 2020, de CLARIANT INTERNATIONAL LTD.: Un procedimiento para la purificación de hidrolizado de biomasa que comprende las etapas a) Proporcionar un hidrolizado de biomasa, en el que el hidrolizado […]
Construcción de nuevas variantes de dextransacarasa DSR-S por ingeniería genética, del 22 de Abril de 2020, de CENTRE NATIONAL DE LA RECHERCHE SCIENTIFIQUE: Una secuencia de nucleótidos que consiste en una secuencia de nucleótidos como se define en SEQ ID NO: 1 o la secuencia complementaria a la secuencia como […]
Transsialidasas de photobacterium mutadas, del 15 de Abril de 2020, de Glycom A/S: Una α2,6-transsialidasa que tiene una secuencia de aminoácidos que es por lo menos un 90% idéntica a la secuencia de aminoácidos de la SEQ ID […]
Exopolisacárido para el tratamiento y/o cuidado de la piel, mucosas, cabello y/o uñas, del 11 de Marzo de 2020, de LUBRIZOL ADVANCED MATERIALS, INC.: Uso del exopolisacárido de la cepa de las especies de Vibrio sp. con número de depósito CNCM I-4277, para mejorar la hidratación de la piel, mucosas, […]