Uso de una formulación de dosificación que comprende micropartículas que consisten en copolímero de poli(lactidaglicolida) (PLGA) y diaraquidoilfosfatidilcolina (DAPC),

y que tienen incorporadas en las mismas gas de n-perfluorobutano (C4F10) para proporcionar imágenes de contraste por ultrasonidos mejoradas durante más de un minuto en el miocardio,

en el que las micropartículas son partículas porosas que tienen una estructura alveolada o una estructura semejante a una esponje,

en el que la formulación de dosificación es una suspensión isoosmótica preparada a partir de un polvo seco mediante reconstitución con un vehículo farmacéuticamente aceptable para formar una suspensión isoosmótica con anterioridad a su uso que tiene una concentración de micropartículas en el intervalo de 1,0 x 109 a 3,5 x 109 micropartículas/mL de suspensión o una concentración en peso de micropartículas en el intervalo de 25 a 50 mg de micropartículas/mL de suspensión, y

en el que las imágenes de contraste por ultrasonidos mejoradas se proporcionan durante más de un minuto en el miocardio, cuando las micropartículas se administran por vía intravenosa, después de la administración de una dosis en el intervalo de 0,5 a 4,0 mg de micropartículas/kg. de peso corporal

Formulación de dosificación para agente de contraste de ultrasonidos.

Antecedentes de la invención

La presente invención se refiere al campo general de los agentes de diagnóstico mediante imagen, y se refiere en particular a formulaciones de dosificación de los agentes de contraste por ultrasonidos específicas que proporcionan imágenes mejoradas e imágenes de larga duración.

Cuando se usan los ultrasonidos para obtener una imagen de los órganos y estructuras internas de un ser humano o de un animal, las ondas de ultrasonidos, ondas de energía sonora a una frecuencia por encima de la que es capaz de discernir el oído humano, se reflejan a medida que pasan a través del cuerpo. Diferentes tipos de tejido corporal reflejan las ondas de ultrasonidos de manera diferente y las reflexiones que se producen por las ondas de ultrasonidos que reflejan diferentes estructuras internas se detectan y se convierten electrónicamente en una pantalla visual.

Para algunos estados médicos, la obtención de una imagen útil del órgano o de la estructura de interés es especialmente difícil debido a que los detalles de la estructura no son discernibles adecuadamente del tejido circundante en una imagen por ultrasonidos producida mediante la reflexión de las ondas de ultrasonidos si está ausente un agente de mejora del contraste. La detección y la observación de ciertos estados fisiológicos y patológicos se pueden mejorar sustancialmente mediante la mejora del contraste en una imagen por ultrasonidos mediante la administración de un agente de contraste de ultrasonidos a un órgano u otra estructura de interés. En otros casos, la detección del movimiento del agente de contraste de ultrasonidos mismo es particularmente importante. Por ejemplo, un modelo preciso del flujo sanguíneo que se conoce se produce como consecuencia de anormalidades cardiovasculares particulares puede ser sólo discernible mediante la administración del agente de contraste de ultrasonidos a la corriente sanguínea y la observación bien del flujo sanguíneo o del volumen de sangre.

Los materiales que son útiles como agentes de contraste de ultrasonidos operan mediante ejercer un efecto sobre las ondas de ultrasonidos a medida que ellas pasan a través del cuerpo y se reflejan para crear la imagen a partir de la cual se efectúa el diagnóstico médico. Diferentes tipos de sustancias afectan a las ondas de ultrasonidos de diferentes modos y en grados variables. Además, ciertos de los efectos causados por los agentes de mejora del contraste se miden y se observan más fácilmente que otros. En la selección de una composición ideal para un agente de contraste de ultrasonidos, se debe preferir la sustancia que tenga el efecto más espectacular sobre la onda de ultrasonidos a medida que ella pasa a través del cuerpo. También, el efecto sobre la onda de ultrasonidos se debe medir fácilmente. Los gases son los medios preferidos para su uso como agentes de contraste de ultrasonidos. El gas se debe estabilizar con anterioridad a su uso bien como burbujas estabilizadas con un agente tensioactivo o mediante su encapsulación en liposomas o en micropartículas. Existen tres efectos principales de mejora del contraste que se pueden apreciar en una imagen por ultrasonidos: la retrodispersión, la atenuación del haz ondas, y la velocidad diferencial del sonido.

Se han usado una variedad de polímeros naturales y sintéticos para encapsular los agentes de contraste de ultrasonidos, tales como el aire, en un esfuerzo para preparar un agente de contraste que dure más tiempo después de su administración. Schneider y colaboradores, Invest. Radiol., Volumen 27, páginas 134-139 (1992) describe partículas de polímero, sintético, rellenas de aire, de tres micrómetros. Estas partículas se informan que son estables en el plasma y bajo la presión aplicada. Sin embargo, a 2,5 MHz, su ecogenicidad era baja. Otro tipo de suspensión de microburbuja se ha obtenido a partir de albúmina tratada con ultrasonidos. Feinstein y colaboradores, J. Am. Coll. Cardiol. Volumen 11, páginas 59-65 (1988). Feinstein describe la preparación de microburbujas que son de tamaño apropiado para su paso transpulmonar con una excelente estabilidad in vitro. Sin embargo, estas microburbujas son de vida corta in vivo, y tienen un período de semidescomposición del orden de unos pocos segundos (lo que es aproximadamente igual a un paso de circulación) debido a su inestabilidad bajo presión. Gottlieb, S. y colaboradores, J. Am. Soc. Echo, Volumen 3, página 328 (1990), Abstract; y Shapiro, J. R. y colaboradores, J. Am. Coll. Cardiol., Volumen 16, páginas 1603-1607 (1990).

Las microburbujas encapsuladas en gelatina se han descrito también en el Documento WO 80/02365 de Rasor Associates, Inc. Estas se forman mediante "coalescencia" de la gelatina. Las microburbujas de gas encapsuladas dentro de una envoltura de un material que contiene flúor se describen en el Documento WO 96/04018 de Molecular Biosystems, Inc.

Las microburbujas estabilizadas en microcristales de galactosa (SHU 454 y SHU 508) han sido informadas por Fritzch y colaboradores. Fritzsch, T y colaboradores., Invest Radiol. Volumen 23 (Suplemento 1), páginas 302-305 (1988); y Fritzsch, T y colaboradores., Invest Radiol. Volumen 25 (Suplemento 1), páginas 160-161 (1990). Las microburbujas duran hasta 15 minutos in vitro pero menos de 20 segundos in vivo. Rovai, D. y colaboradores., J. Am. Coll. Cardiol., Volumen 10, páginas 125-134 (1987); y Smith, M. y colaboradores., J. Am. Coll. Cardiol., Volumen 13, páginas 1622-1628 (1989). El Documento EP 398 935 de Schering Aktiengesellschaft describe la preparación y el uso de gases o líquidos volátiles microencapsulados para la formación de imágenes mediante ultrasonidos, en el que las microcápsulas se forman a partir de polímeros o polisacáridos sintéticos. La Patente Europea 458 745 de Sintetica describe microbalones de aire o de gas unidos mediante una membrana de polímero depositada de manera interfacial que se puede dispersar en un vehículo acuoso para su inyección en un animal huésped o para su administración por vía oral, rectal, o uretral, para propósitos terapéuticos o de diagnóstico.

El Documento WO 92/18164 de Delta Biotechnology Limited describe la preparación de micropartículas mediante secado por pulverización de una disolución acuosa de proteína para formar esferas huecas que tienen un gas ocluido en las mismas, para su uso en la formación de imágenes. El Documento WO 93/25242 describe la síntesis de micropartículas para la formación de imágenes mediante ultrasonidos que consisten en un gas contenido en una envoltura de policianoacrilato o de poliéster. El Documento WO 92/21382 describe la fabricación de agentes de contraste en micropartículas que incluyen una matriz unida covalentemente que contiene un gas, en el que la matriz es un carbohidrato. Las Patentes de EE.UU. N^os 5.334.381, 5.123.414 y 5.352.435 de Unger describen liposomas para su uso como agentes de contraste de ultrasonidos, que incluyen gases, precursores de gases, tales como un precursor gaseoso activado mediante el pH o activado por la luz, así como también otros agentes mejoradores del contraste líquidos o sólidos.

Otros autores han estudiado el efecto del gas que está encapsulado, y han sugerido el uso de los gases fluorados para mejorar la formación de imagen en comparación con el aire. La Patente de EE.UU. Nº 5.393.524 de Quay describe el uso de agentes, que incluyen los hidrocarburos perfluorados, para la mejora del contraste en una imagen obtenida mediante ultrasonidos. El agente consiste en pequeñas burbujas, o microburbujas, de gases seleccionados, las cuales exhiben períodos de vida prolongados en disolución y son lo suficientemente pequeñas para atravesar los pulmones, lo que permite su uso en la formación de imágenes mediante ultrasonidos del sistema cardiovascular y de otros órganos vitales. El Documento EP 554213 de Bracco describe el uso de gases de hidrocarburos fluorados para impedir el colapso de las microvesículas por exposición a la presión en la corriente sanguínea. El Documento WO 95/23615 de Nycomed describe microcápsulas para la formación de imágenes que se forman mediante coacervación de una disolución, por ejemplo, una disolución de proteína, que contiene un hidrocarburo perfluorado. El Documento WO 95/03357 de Massachusetts Institute of Technology describe micropartículas formadas de polímeros de bloques de polietilen glicol-copolímero de poli(lactida-co-glicolida) que tienen agentes para...

1. Uso de una formulación de dosificación que comprende micropartículas que consisten en copolímero de poli(lactidaglicolida) (PLGA) y diaraquidoilfosfatidilcolina (DAPC), y que tienen incorporadas en las mismas gas de n-perfluorobutano (C₄F₁₀) para proporcionar imágenes de contraste por ultrasonidos mejoradas durante más de un minuto en el miocardio,

en el que las micropartículas son partículas porosas que tienen una estructura alveolada o una estructura semejante a una esponje,

en el que la formulación de dosificación es una suspensión isoosmótica preparada a partir de un polvo seco mediante reconstitución con un vehículo farmacéuticamente aceptable para formar una suspensión isoosmótica con anterioridad a su uso que tiene una concentración de micropartículas en el intervalo de 1,0 x 10⁹ a 3,5 x 10⁹ micropartículas/mL de suspensión o una concentración en peso de micropartículas en el intervalo de 25 a 50 mg de micropartículas/mL de suspensión, y

en el que las imágenes de contraste por ultrasonidos mejoradas se proporcionan durante más de un minuto en el miocardio, cuando las micropartículas se administran por vía intravenosa, después de la administración de una dosis en el intervalo de 0,5 a 4,0 mg de micropartículas/kg. de peso corporal.

2. El uso de acuerdo con la reivindicación 1, en el que el n-perfluorobutano (C₄F₁₀) se proporciona en una cantidad entre 75 y 500 µg/mL de volumen administrado de suspensión de micropartículas.

3. El uso de acuerdo con la reivindicación 2, en el que el n-perfluorobutano (C₄F₁₀) se proporciona en una cantidad entre 100 y 400 µg/mL de volumen administrado de suspensión de micropartículas.

4. El uso de acuerdo con la reivindicación 3, en el que el n-perfluorobutano (C₄F₁₀) se proporciona en una cantidad entre 150 y 350 µg/mL de volumen administrado de suspensión de micropartículas.

5. El uso de acuerdo con la reivindicación 1, que proporciona imágenes por ultrasonidos mejoradas en el miocardio durante más de 2 minutos.

6. El uso de acuerdo con cualquiera de las reivindicaciones precedentes, en el que el vehículo farmacéuticamente aceptable para formar una suspensión isoosmótica con anterioridad a su uso es agua estéril.

7. El uso de acuerdo con la reivindicación 1, en el que el polvo seco de las micropartículas se reconstituye con agua estéril con anterioridad a su uso mediante la adición de agua al vial o jeringuilla del polvo seco y agitación para producir una suspensión isoosmótica de micropartículas.

8. El uso de acuerdo con la reivindicación 1, en el que la dosis se selecciona del grupo que consiste en 0,5 mg de micropartículas/kg de peso corporal, 2,0 mg de micropartículas/kg de peso corporal, y 4,0 mg de micropartículas/kg de peso corporal.

9. El uso de acuerdo con la reivindicación 1, en el que el copolímero de poli(lactidaglicolida) tiene una relación de lactida a glicolida de 1:1 y un peso molecular medio ponderado en el intervalo de 20 a 40 kDa.

10. El uso de una o más de las reivindicaciones precedentes, en el que la diaraquidoilfosfatidilcolina se incorpora en el PLGA en una relación de entre 0,01 a 30% (peso de DAPC/peso de PLGA).

11. El uso de acuerdo con la reivindicación 10, en el que el DAPC se incorpora con el PLGA en una relación de entre 1 a 12% (peso de DAPC/peso de PLGA).

12. El uso de acuerdo con las reivindicaciones 9 a 11, en el que el PLGA tiene una relación de lactida a glicolida de 1:1 y un peso molecular medio ponderado en el intervalo de 20 a 40 kDa, y el DPAC se incorpora con el PLGA en un intervalo de entre 5 y 6,6% (peso de DAPC/peso de PLGA).