FORMULACION DE ACIDO 5-AMINOLEVULINICO EN DISOLVENTES NO ACUOSOS.

Composición anhidra caracterizada porque contiene una sustancia activa seleccionada de ácido 5-aminolevulínico (5-ALA) o/y un derivado del mismo disuelto o disperso en un líquido no acuso que presenta una constante dieléctrica e inferior a 80 a 25ºC que produce una estabilización del ácido 5-aminolevulínico (5-ALA) o/y un derivado del mismo

Formulación de ácido 5-aminolevulínico en disolventes no acuosos.

La invención se refiere a composiciones anhidras que contienen ácido 5-aminolevulínico o/y derivados del mismo disueltos o dispersos en un líquido no acuoso, así como a un sistema de doble cámara que comprende una formulación no acuosa de ácido 5-aminolevulínico en una primera cámara, así como un sistema de vehículo acuoso en una segunda cámara.

La terapia fotodinámica es un procedimiento nuevo y muy prometedor para el tratamiento de distintas enfermedades premalignas y malignas que están relacionadas con la proliferación celular. El principio de la terapia fotodinámica se basa en introducir un denominado fotosensibilizador en el tejido tumoral y convertir éste mediante irradiación con luz de longitud de onda adecuada en un principio activo citotóxicamente activo que finalmente provoca la destrucción de las células. La selectividad de este procedimiento se basa en un enriquecimiento más fuerte del sensibilizador en células tumorales que proliferan rápidamente en comparación con tejido normal. Mediante una irradiación con luz localmente limitada, el sensibilizar contenido en las células tumorales puede activarse específicamente, por lo que las células cancerígenas se destruyen cuidándose en gran parte el tejido sano.

Hasta la fecha, como fotosensibilizador se usó la mayoría de las veces una mezcla de administración intravenosa de derivados de hematoporfirina. Sin embargo, a pesar de los alentadores resultados clínicos en diferentes tipos de cáncer, estos derivados de hematoporfirina presentan distintas desventajas. En primer lugar, debido a la baja selectividad tumoral y a la eliminación sólo lenta del cuerpo, aparecen concentraciones de principio activo relativamente altas en el tejido normal. Por lo tanto, durante la irradiación tienen lugar reacciones fotoquímicas no deseadas en el tejido sano. En segundo lugar, este tratamiento produce una sensibilidad a la luz general, de manera que el paciente no puede exponerse a la luz del día durante aproximadamente cuatro semanas.

En determinados casos puede conseguirse una disminución de la alta concentración de principio activo en el tejido normal y, por tanto, de los efectos secundarios no deseados, especialmente en aplicaciones dermatológicas y ginecológicas mediante el desarrollo de formulaciones de principio activo de aplicación tópica en lugar de las formulaciones sistémicas conocidas. El documento WO95/05813 describe, por ejemplo, una tirita impregnada en 5-ALA para la aplicación dérmica. Para disminuir la sensibilidad a la luz se intenta además utilizar precursores de fotosensibilizadores que son fotoquímicamente inactivos y sólo se convierten en un fotosensibilizador dentro de la célula diana.

El ácido 5-aminolevulínico es una sustancia endógena que se sintetiza a partir de glicina y succinil-CoA. En el marco de la biosíntesis de hemo, a partir de ácido 5-aminolevulínico (5-ALA) se forma en varias etapas de reacción que transcurren rápidamente la protoporfirina IX fotoactiva de alta calidad que a continuación se hace reaccionar en una reacción lenta para dar hemo. Un mecanismo de regulación natural inhibe a concentración de hemo demasiado alta tanto la síntesis endógena de 5-ALA como también la degradación de protoporfirina IX.

Mediante la administración exógena de 5-ALA sintéticamente preparado se evita este mecanismo de regulación, que conduce a una producción elevada de protoporfirina IX. Además, como su degradación es inhibida por el mecanismo de control natural, la protoporfirina IX se enriquece en las células. La protoporfirina IX puede experimentar una reacción de oxidación fotoquímica con irradiación con luz y, por tanto, actúa de fotosensibilizador. En la absorción de un cuanto de luz por la molécula de sensibilizador, éste cambia inicialmente a un estado electrónicamente excitado (estado singlete) que tiene una vida relativamente corta y emite de nuevo su energía en exceso o en el plazo de un nanosegundo mediante la emisión de un fotón fluorescente o se convierte en un estado triplete que tiene una vida relativamente larga. La energía puede transferirse de este estado triplete a las moléculas de oxígeno presentes en la célula. El oxígeno singlete formado en esto actúa citotóxicamente, especialmente en células proliferantes, ya que reacciona con componentes celulares, por ejemplo, la membrana celular y mitocondrias, o desencadena la formación de radicales que dañan las células. Además, la irradiación del fotosensibilizador lleva a una radiación fluorescente características que puede usarse para reacciones de detección, por ejemplo para la detección de células proliferantes.

En el caso de 5-ALA se trata de una sustancia químicamente extremadamente inestable que está sometida a un amplio espectro de reacciones de descomposición (véanse, por ejemplo, Granick y Mauzerall, J. Biol. Chem. 232 (1958), 1119-1140; Franck y Stratmann, Heterocycles 15 (1991), 919-323, Jaffe y Rajagopalan, Bioorg. Chem. 18 (1990), 381-394; Butler y George, Tetrahedron 48 (1992), 7879-7886; Novo y col., J. Photochem. Photobiol. B: Biol. 34 (1996), 143-148; Scott, Biochem. J. 62 (1955), 6 P; Dalton y col. Pharm. Res. 16 (1999), 288-295). Estas reacciones de descomposición se representan esquemáticamente en la Figura 1. Como a-aminocetona, el 5-ALA forma una base de Schiff dímera (DHPY) que se oxida fácilmente para dar el compuesto aromático PY. Como reacciones secundarias pueden producirse las reacciones para dar porfobilinógeno o pseudoporfobilinógeno. La primera etapa de reacción de todas las fases de degradación, la formación de la base de Schiff mediante las fases intermedias inestables representadas en la Figura 1, es un equilibrio fuertemente dependiente del pH acelerando valores de pH mayores de, por ejemplo, superiores a pH 5, la descomposición de 5-ALA. Sólo una disolución acuosa ácida de HCI de 5-ALA ha demostrado ser suficientemente estable. Sin embargo, la optimización del valor de pH no es adecuada como medio para estabilizar el 5-ALA como fármaco ya que terapéuticamente no puede utilizarse un medio fuertemente ácido.

Además de la inestabilidad de 5-ALA, su marcado carácter iónico representa un problema en lo referente a la biodisponibilidad. El 5-ALA se encuentra en el intervalo de pH fisiológicamente tolerable (pH 5 a 8) como ión bipolar, es decir, con grupo carboxilo disociado y con grupo amino protonado. Como es sabido, las sustancias cargadas de este tipo atraviesan pésimamente la membrana, es decir, sólo son transportadas a pequeña escala por epitelios y por membranas celulares. Por tanto, la biodisponibilidad es baja. Esto también aclara el hecho de que el 5-ALA en las aplicaciones clínicas de hasta la fecha deba usarse en dosis muy altas.

Por tanto, el objetivo de la presente invención era proporcionar composiciones que contenían 5-ALA en las que se eliminaran al menos parcialmente las desventajas conocidas por el estado de la técnica y que poseyeran especialmente una estabilidad química mejorada y una mejor permeabilidad de membrana.

Este objetivo se alcanza mediante la incorporación de 5-ALA o/y derivados del mismo en líquidos no acuosos con una constante dieléctrica e < 80 a 25ºC, siendo estos líquidos preferiblemente fisiológicamente tolerables y miscibles con agua. Ejemplos de tales líquidos son 1,2-propilenglicol y glicerina.

Por tanto, un objeto de la invención es una composición anhidra que contiene una sustancia activa seleccionada de 5-ALA o/y un derivado del mismo disuelto o disperso en un líquido no acuoso que presenta una constante dieléctrica e inferior a 80 a 25ºC que provoca una estabilización del ácido 5-aminolevulínico (5-ALA) o/y un derivado del mismo.

Según la invención, la composición comprende una sustancia activa seleccionada de ácido 5-aminolevulínico o/y un derivado del mismo. Por "derivado" se entienden especialmente sales, ésteres, complejos y compuestos de adición. Se prefiere especialmente la sustancia activa ácido 5-aminolevulínico o una sal o éster del mismo. Los ejemplos preferidos de sales y ésteres son clorhidrato, sulfato, nitrato, fosfato, borato, tannato, lactato, glicolato, succinato, citrato, tartrato, embonato de 5-ALA, o metilato, etilato, propionato, butirato, hexanoato, octanoato, dodecanoato, miristato, palmitato, oleato de 5-ALA.

Debido a la disolución o dispersión en líquidos no acuosos, la sustancia activa 5-ALA se presenta preferiblemente al menos parcialmente en una forma enol que se forma predominantemente en líquidos menos polares que el agua. La presencia...

1. Composición anhidra caracterizada porque contiene una sustancia activa seleccionada de ácido 5-aminolevulínico (5-ALA) o/y un derivado del mismo disuelto o disperso en un líquido no acuso que presenta una constante dieléctrica e inferior a 80 a 25ºC que produce una estabilización del ácido 5-aminolevulínico (5-ALA) o/y un derivado del mismo.

2. Composición según la reivindicación 1, caracterizada porque los derivados se seleccionan de sales y ésteres de 5-ALA.

3. Composición según la reivindicación 1 a 2, caracterizada porque la sustancia activa se presenta predominantemente en la forma enol.

4. Composición según una de las reivindicaciones precedentes, caracterizada porque el líquido no acuoso se selecciona de alcoholes, éteres, ésteres, poli(alquilenglicoles), fosfolípidos, DMSO, N-vinilpirrolidona, N,N-dimetilacetamida y mezclas de los mismos.

5. Composición según una de las reivindicaciones precedentes, caracterizada porque el líquido no acuoso es miscible al menos parcialmente con agua.

6. Composición según una de las reivindicaciones precedentes, caracterizada porque la sustancia activa está presente en una proporción del 1 al 25% en peso, especialmente del 1 al 15% en peso referido al peso total de la composición.

7. Composición según una de las reivindicaciones precedentes, caracterizada porque comprende además coadyuvantes o/y aditivos que son habituales en la cosmética o farmacia.

8. Composición según una de las reivindicaciones precedentes, caracterizada porque se presenta como disolución, suspensión, emulsión, microemulsion, gel, pomada, aerosol, espuma, supositorio u óvulo.

9. Composición según una de las reivindicaciones precedentes, caracterizada porque está en forma de un preparado farmacéutico.

10. Composición según la reivindicación 9, caracterizada porque puede aplicarse tópicamente.

11. Composición según una de las reivindicaciones precedentes, caracterizada porque contiene otro fármaco.

12. Kit, especialmente para uso terapéutico o diagnóstico, que comprende

a) una composición anhidra que contiene ácido 5-aminolevulínico (5-ALA) o/y un derivado del mismo según una de las reivindicaciones 1 a 11 y

b) una composición que contiene agua.

13. Kit según la reivindicación 12, caracterizado porque el componente b) contiene una disolución acuosa que es adecuada para ajustar un valor de pH fisiológico en la mezcla entre los componentes a) y b).

14. Kit según una de las reivindicaciones 12 a 13, caracterizado porque el componente b) contiene una disolución de NaOH o KOH o/y un tampón de fosfato o/y carbonato.

15. Kit según una de las reivindicaciones 12 a 14, caracterizado porque se presenta en forma de un sistema de doble cámara estando dispuesto el componente a) en una primera cámara del sistema y el componente b) en una segunda cámara del sistema.

16. Uso de una composición que contienen una sustancia activa seleccionada de 5-ALA o un derivado del mismo según una de las reivindicaciones 1 a 11 o de un kit según una de las reivindicaciones 12 a 15 para la preparación de un fármaco para la terapia o el diagnóstico de enfermedades asociadas a proliferación celular.

17. Uso según la reivindicación 16, caracterizado porque la composición se aplica tópica o sistémicamente.

18. Uso según la reivindicación 16 ó 17 en la terapia o el diagnóstico de enfermedades tumorales.

19. Uso según una de las reivindicaciones 16 a 18 en una terapia fotodinámica.

20. Uso según la reivindicación 18 ó 19, caracterizado porque la enfermedad es un carcinoma de células basales, un carcinoma escamoso, enfermedad de Bowen, queratosis actínica, condiloma acuminado (CIN), neoplasia intraepitelial de la vulva (VIN) o una enfermedad cancerígena nodular o subcutánea.

21. Uso según la reivindicación 20, caracterizado porque la enfermedad es psoriasis o acné.

22. Uso de una composición según una de las reivindicaciones 1 a 11 o de un kit según una de las reivindicaciones 12 a 15 para la preparación de una prueba diagnóstica o medicamento para la terapia fotodinámica.

23. Kit que comprende una composición de aplicación tópica según la reivindicación 10 y al menos un componente seleccionado de

(a) un material foliáceo esencialmente impermeable a la luz,

(b) agentes para unir el material foliáceo sobre un sitio de aplicación, y

(c) agentes para aplicar la composición sobre un sitio de aplicación.

24. Kit según la reivindicación 23, que comprende además

(d) un sistema de tampón acuoso.

25. Uso de un líquido no acuoso con una constante dieléctrica inferior a 80 a 25ºC para estabilizar ácido 5-aminolevulínico (5-ALA) o/y un derivado del mismo disolviendo o dispersando el ácido 5-aminolevulínico o/y el derivado del mismo en el líquido no acuoso.