Un dispositivo para recoger una muestra biológica, que comprende:

un recipiente (10) que tiene un primer extremo abierto y un extremo inferior un miembro (12) de separación dispuesto en el recipiente (10), siendo capaz el miembro (12) de separación de separar la muestra tras la centrifugación en componentes discretos; al menos un mecanismo de liberación de reactivo posicionado encima del miembro (12) de separación; y reactivo; al menos un reactivo (108) situado dentro del mecanismo de liberación de en donde dicho mecanismo de liberación de reactivo impide el contacto entre dicho reactivo (108) y dicha muestra biológica hasta después de la separación de dicha muestra biológica en componentes discretos

CAMPO DE LA INVENCIÓN

La presente invención se refiere a dispositivos y métodos para recoger y estabilizar una muestra biológica, particularmente una muestra de sangre completa, directamente de un paciente. Más concretamente, la presente invención se refiere a dispositivos de recogida de muestras que tengan un aditivo de estabilización contenido en la misma para estabilizar los ácidos nucleicos tras la recogida de muestras biológicas y para inhibir la degradación durante el almacenaje o transporte de la misma.

ANTECEDENTES DE LA INVENCIÓN

Las pruebas de diagnóstico pueden requerir la separación de una muestra de sangre completa de los pacientes dentro de componentes, tales como plasma o suero (es decir, los componentes de la fase más ligera) y células de la sangre roja (es decir, el componente de la fase más pesado. Por ejemplo, una muestra de plasma puede ser ensayada usando técnicas de amplificación conocidas para vigilar la carga vírica HIV RNA de pacientes infectados de HIV para diagnosticar y gestionar la enfermedad. Una respuesta del paciente a las drogas aprobadas, nuevas drogas y terapias de una combinación de drogas podrían ser evaluadas vigilando la carga vírica de HIV RNA del

20 paciente. En adición al virus HIV, hay un número de otras enfermedades infecciosas que se beneficiarían vigilando la carga viral, tales como el virus de la Hepatitis C. Actualmente, la comprobación del plasma viral se ejecuta típicamente extrayendo muestras de sangre completas mediante la perforación de venas por medio de una cánula o aguja fijadas a una jeringa o un tubo de recogida evacuado. La separación de la sangre en plasma y otros componentes celulares, o en suero y células de sangre rojas se efectúa entonces mediante la centrifugación de la jeringa o tubo en una centrífuga. Tales técnicas típicamente usan una barrera que se mueve entre las dos fases de la muestra que están separadas, manteniendo de ese modo la separación de componentes para el examen subsiguiente de los componentes individuales. Típicamente, las muestras debes entonces ser transportadas aun lugar diferente, tal como un laboratorio, en el que el personal efectúa ensayos específicos sobre las muestras. Generalmente, una cantidad considerable de tiempo transcurre entre la obtención de la muestra y el análisis de esta. Un problema común y recurrente, por lo tanto, es el mantenimiento de la muestra biológica de una manera

las manipulaciones y/o análisis precedente de las preparaciones de la muestra biológica. Actualmente, las muestras de sangre son recogidas en tubos EDTA y centrifugados para obtener plasma, Las muestras de plasma son entonces transportadas en tubos primarios o secundarios sobre hielo o sometidos a condiciones refrigeradas para posterior análisis. La fría temperatura de transporte reduce la degradación de vRNA.

EP-A-1106252 describe un tubo para la recogida de sangre que tiene cierres en ambos extremos y un separador mecánico capaz de separar la sangre recogida en

10 componentes discretos. Además este comprende un reagente (agente de estabilización de ácido nucleico) posicionado entre el miembro de separación t el extremo de fondo del tubo. Un tubo similar se halla en US-A-2003/108447. Existe la necesidad de un dispositivo estándar para reunir, procesar y transportar muestras de plasma para ser usadas con tecnologías de amplificación. Con la máxima preferencia, el dispositivo debe ser capaz de ayudar en la manipulación de normalización de muestras estándar, que proporcionan un sistema cerrado que aísla el plasma de de los componentes celulares, produce dilución mínima del plasma, e interferencia minimizada con el ensayo del ácido nucleico.

20 SUMARIO DE LA INVENCIÓN La presente invención se refiere a un dispositivo para reunir una muestra biológica que comprende un recipiente que tiene una porción de depósito para recibir la muestra, un miembro de separación dispuesto en el recipiente para separar la muestra entre sus componentes, y al menos un reactivo,, por ejemplo, un agente de

25 estabilización tal como para la estabilización del ácido nucleico, posicionado en el recipiente para interaccionar selectivamente con al menos un componente de la muestra separada. En una realización, el recipiente es un tubo que tiene un primer extremo y un segundo extremo, y el tubo puede ser parcialmente evacuado. Típicamente la muestra biológica es sangre completa. Preferiblemente, el reactivo está posicionado para impedir la interacción con la totalidad de la sangre. Más particularmente, el reactivo puede estar posicionado para interaccionar selectivamente con un componente de plasma o suero mientras está sustancialmente aislado de otros componentes de la sangre completa.

En una realización, el miembro de separación es un elemento de separación mecánico, y en una realización alternativa, el miembro de separación es un gel. El miembro gel de separación puede también estar físicamente separado del reactivo.

En particular, la presente invención se refiere a un dispositivo para recoger una 5 muestra biológica, que comprende: un recipiente que tiene un primer extremo abierto, y un extremo inferior cerrado; un miembro de separación dispuesto en el recipiente, siendo el miembro de separación capaz de separar tras la centrifugación la muestra en componentes 10 discretos; al menos un mecanismo de liberación de reactivo posicionado encima del

miembro de separación; y al menos un reactivo situado dentro del mecanismo de liberación de reactivo; en donde dicho mecanismo de liberación de reactivo impide el contacto entre dicho reactivo y dicha muestra biológica hasta después de la separación de dicha muestra biológica en componentes discretos.

La presente invención se refiere también a métodos para la recogida y preparación de una especie de plasma o suero para el ensayo subsiguiente, por ejemplo, el ensayo de ácido nucleico. Los métodos comprenden proporcionar un tubo para recibir una muestra de sangre completa. El tubo comprende un extremo superior y un extremo inferior, un miembro de separación dispuesto dentro del tubo para separar la muestra en sus componentes, y al menos un reactivo, por ejemplo, un agente de estabilización de ácido nucleico. Los métodos comprenden además recoger una muestra de sangre completa dentro del tubo, mantener la muestra de sangre

25 completa separada del reactivo, separar plasma o suero de otros componentes de la sangre, y mezclar el plasma o suero en el tubo con el reactivo. En particular, la presente invención se refiere a un método para la recogida y preparación de un espécimen, que comprende: proporcionar un tubo, en donde el tubo comprende un extremo superior que contiene un cierre y un extremo inferior cerrado, un miembro de separación dispuesto en el recipiente donde el miembro es capaz de separar la muestra en componentes discretos, y al menos un mecanismo de liberación de reactivo que comprenda un reactivo situado encima del miembro de separación;

recoger una muestra dentro del tubo, de modo que la muestra esté separada 35 del reactivo;

someter el tubo a un procedimiento de centrifugación que induce la separación de la mezcla en componentes discretos; activar el mecanismo de liberación de reactivo para permitir el contacto del reactivo con el componente discreto, siendo efectuada la activación manualmente o 5 mediante la acción del proceso que induce la separación; y

mezclar el componente discreto deseado de la muestra con el reactivo ya sea permitiendo el proceso que induce la separación para inducir el mezclado o mediante una operación de mezclado distinta.

Las realizaciones preferidas de la invención son evidentes a partir de las 10 reivindicaciones dependientes.

BREVE DESCRIPCIÓN DE LOS DIBUJOS

La Figura 1 es una vista en sección transversal de un dispositivo de recogida de sangre.

15 La Figura 2 es una vista en sección transversal del dispositivo de recogida de sangre de la Figura 1, durante la introducción de la muestra dentro del dispositivo, pero antes de la centrifugación.

La Figura 3 es una vista en sección transversal de la muestra de la Figura 2 girada a través de 180º y después de la centrifugación facilitando la separación en sus 20 componentes. La Figura 4 es una vista en sección transversal de una realización alternativa de...

1. Un dispositivo para recoger una muestra biológica, que comprende: un recipiente (10) que tiene un primer extremo abierto y un extremo inferior 5 cerrado;

un miembro (12) de separación dispuesto en el recipiente (10), siendo capaz el miembro (12) de separación de separar la muestra tras la centrifugación en componentes discretos;

al menos un mecanismo de liberación de reactivo posicionado encima del

10 miembro (12) de separación; y al menos un reactivo (108) situado dentro del mecanismo de liberación de

reactivo; en donde dicho mecanismo de liberación de reactivo impide el contacto entre 15 dicho reactivo (108) y dicha muestra biológica hasta después de la separación de dicha muestra biológica en componentes discretos.

2. El dispositivo de la reivindicación 1, en el que el miembro (12) de separación está situado en el extremo inferior cerrado.

3. El dispositivo de la reivindicación 1, en el que el miembro (12) de separación está situado intermedio entre los extremos superior e inferior.

4. El dispositivo de la reivindicación 1, en el que el mecanismo de liberación de 25 reactivo está situado en el primer extremo abierto.

5. El dispositivo de la reivindicación 1, en el que el recipiente es un tubo (100) que tiene un cierre (102) en el primer extremo abierto.

30 6. El dispositivo de la reivindicación 5, en el que el mecanismo de liberación de reactivo está asegurado al cierre (102).

7. El dispositivo de la reivindicación 5, en el que el mecanismo de liberación de

reactivo está soportado por un miembro estructural integral sobre las paredes 35 interiores del tubo (100).

8. El dispositivo de la reivindicación 7, en el que el miembro estructural comprende nervios (188) integrales.

9. El dispositivo de la reivindicación 5, en el que el tubo (100) es evacuado a una presión inferior que la presión atmosférica.

10. El dispositivo de la reivindicación 1, en el que el reactivo (108) es un agente de estabilización del ácido nucleico.

11. El dispositivo de la reivindicación 10, en el que el agente de estabilización del ácido nucleico está posicionado para contactar selectivamente un componente de plasma o suero separado de la totalidad de la sangre.

15 12. El dispositivo de la reivindicación 1, en el que el miembro (12) de separación es un elemento de separación mecánico.

13. El dispositivo de la reivindicación 1, en el que el miembro (12) de separación es un gel (101).

14. El dispositivo de la reivindicación 13, en el que el miembro (101) de separación de gel está físicamente separado del reactivo (108).

15. El dispositivo de la reivindicación 1, en el que el miembro (12) de

25 separación tiene una densidad intermedia de plasma y componentes celulares remanentes, o intermedia de glóbulos rojos de sangre y suero.

16. El dispositivo de la reivindicación 1, en el que el miembro (12) de separación es un filtro.

17. El dispositivo de la reivindicación 1, en el que el reactivo (108) está en una forma seleccionada del grupo compuesto de una solución, suspensión u otro líquido, una pastilla, una tableta, una cápsula, un material seco de pulverización, un material seco congelado, un polvo, una partícula, un gel, cristales o material liofilizado.

18. El dispositivo de la reivindicación 1, en el que el reactivo (108) es un estabilizador de proteínas.

19. El dispositivo de la reivindicación 1, en el que la activación del mecanismo de liberación del reactivo permite que el reactivo (108) contacte el componente discreto deseado de la muestra biológica separada mientras permanece libre de contactos con componentes no deseados.

20. El dispositivo de la reivindicación 1, en el que el mecanismo de liberación 10 de reactivo comprende un sistema de activación pasivo.

21. El dispositivo de la reivindicación 20, en el que el mecanismo de liberación de reactivo permite que el reactivo contacte el componente discreto mediante la desaplicación de una cubierta del montaje de. mecanismo de liberación de reactivo.

22. El dispositivo de la reivindicación 20, en el que el mecanismo de liberación de reactivo contacta el componente discreto mediante la apertura de una puerta de salida de reactivo en el montaje de mecanismo de liberación.

20 23. El dispositivo de la reivindicación 1, en el que el mecanismo de liberación de reactivo se activa mediante la centrifugación de la muestra biológica.

24. El dispositivo de la reivindicación 1, en el que el mecanismo de liberación

de reactivo se activa mediante un acto manual después de la separación de la muestra 25 biológica.

25. El dispositivo de la reivindicación 1, en el que el recipiente (10) comprende además un anticoagulante.

30 26. Un método para la recogida y preparación de una muestra, que comprende: proporcionar un tubo (100), en el que el tubo (100) comprende un extremo superior que contiene un cierre (102) y un extremo inferior cerrado, un miembro (12, 101) de separación, dispuesto en el recipiente donde el miembro es capaz de separar la muestra en componentes discretos, y al menos un mecanismo de liberación de

35 reactivo que comprende un reactivo (108) situado encima del miembro de separación;

recoger una muestra dentro del tubo (100), de modo que la muestra es separada del reactivo (108); someter el tubo (100) a un procedimiento de centrifugación que induce la separación de la muestra en componentes discretos;

5 activar el mecanismo de liberación de reactivo para permitir el contacto del reactivo (108) con el componente discreto, efectuada la activación ya sea manualmente o mediante la acción del procedimiento que induce la separación; y

mezclar el componente discreto deseado de la muestra con el reactivo (108) ya sea permitiendo el proceso que induce la separación para inducir el mezclado o 10 mediante una operación de mezclado distinta.

27. El método de la reivindicación 26, en el que la muestra es totalmente sangre.

15 28. El método de la reivindicación 27, en el que las operaciones de someter el tubo (100) a un procedimiento que induzca la separación de la muestra y la activación del mecanismo de liberación de reactivo comprenden:

colocar el tubo (100) dentro de una centrífuga con el extremo superior enfrentado hacia arriba; y 20 centrifugar el tubo para inducir la separación de plasma o suero de los componente de la sangre remanente, y activar el mecanismo de liberación de reactivo manualmente o permitir que el mecanismo lo active tras la centrifugación.

25 29. El método, de la reivindicación 28, en el que el componente discreto en contacto con el reactivo (108) es plasma.

30. El método de la reivindicación 28, en el que el reactivo (108) es un agente de estabilización del ácido nucleico.

31. El método de la reivindicación 26, en el que la operación de mezclado comprende la inversión manual del tubo (100).

32. El método de la reivindicación 26, en el que el miembro (12) de separación 35 es un elemento de separación mecánico.

33. El método de la reivindicación 26, en el que el miembro (12) de separación es un gel (101).

34. El método de la reivindicación 33, en el que el miembro (101) de separación 5 de gel está separado físicamente del reactivo (108).

35. El método de la reivindicación 26, en el que el miembro (12) de separación es un filtro.

10 36. El método de la reivindicación 26, en el que el reactivo (108) está en una forma seleccionada del grupo compuesto de una solución, suspensión u otro líquido, una pastilla, una tableta, una cápsula, un material seco de pulverización, una material seco congelado, unos polvos, una partícula, un gel, cristales o un material liofilizado.

15 37. El método de la reivindicación 26, en el que el mecanismo de liberación de reactivo comprende un sistema de activación pasivo.

38. El método de la reivindicación 37, en el que el mecanismo de liberación de

reactivo permite que el reactivo (108) contacte el componente discreto mediante la 20 desaplicación de una cubierta del montaje de mecanismo de liberación de reactivo.

39. El método de la reivindicación 37, en el que el mecanismo de liberación de reactivo permite que el reactivo contacte el componente discreto mediante la apertura de una puerta de salida de reactivo en el montaje de mecanismo de liberación.

40. El método de la reivindicación 26, en el que el mecanismo de liberación de reactivo es activado por centrifugación de la muestra biológica.

41. El método de la reivindicación 26, en el que el mecanismo de liberación de

30 reactivo se activa mediante una acción manual después del procedimiento de separación de la muestra biológica.

42. El método de la reivindicación 26, en el que el reactivo (108) es un agente de estabilización del ácido nucleico.

43. El método de la reivindicación 26, en el que el reactivo (108) es un estabilizador de proteínas.

44. El método de la reivindicación 26, en el que el mecanismo de liberación de reactivo se asegura al cierre (102) antes de la separación.