Anticuerpo aislado que se une a un polipéptido que tiene por lo menos un 80% de identidad en la secuencia de aminoácidos con la secuencia de aminoácidos de la figura 2,

con o sin su péptido señal asociado, donde dicho anticuerpo es internalizado por una célula que expresa dicho polipéptido y donde dicho anticuerpo se conjuga a un agente inhibidor del crecimiento o un agente citotóxico, para su uso en un método de tratamiento que comprende inhibir el crecimiento de la célula que expresa dicha proteína

Composiciones y métodos para el tratamiento de un tumor de origen hematopoyético.

Campo de la invención

La presente invención se refiere a composiciones de materia para su uso en, por ejemplo, el tratamiento de tumor hematopoyético en mamíferos.

Antecedentes de la invención

Los tumores malignos (cáncer) son la segunda causa de muerte en los Estados Unidos, después de las enfermedades del corazón (Boring et al., CA Cancer J Clin., 43:7 [(1993]). El cáncer se caracteriza por el incremento en el número de células anormales, o neoplásicas, derivadas de un tejido normal que proliferan para formar una masa tumoral, la invasión de tejidos adyacentes por estas células tumorales neoplásicas, y la generación de células malignas que finalmente se extienden a través de la sangre o el sistema linfático hasta nódulos linfáticos regionales y hasta puntos distantes a través de un proceso denominado metástasis. En un estado canceroso, una célula prolifera bajo condiciones en las que no crecerían células normales. El cáncer se manifiesta en una gran variedad de formas, caracterizadas por diferentes grados de invasión y agresividad.

Los cánceres que implican células generadas durante la hematopoyesis, un proceso mediante el cual se generan elementos celulares de la sangre, tales como linfocitos, leucocitos, plaquetas, eritrocitos y células asesinas ("killers") naturales, se refieren como cánceres hematopoyéticos. Los linfocitos que se pueden encontrar en la sangre y el tejido linfático y que son críticos para la respuesta inmune se clasifican en dos clases principales de linfocitos: linfocitos B (células B) y linfocitos T (células T), que median en la inmunidad humoral y medida por células, respectivamente.

Las células B maduran en la médula ósea y dejan que la médula exprese un anticuerpo de unión a antígeno en su superficie celular. Cuando una célula B intacta encuentra primero el antígeno para el que su anticuerpo unido a membrana es específico, la célula empieza a dividirse rápidamente y su progenie a diferenciarse en células B de memoria y células efectoras denominadas "células plasmáticas". Las células B de memoria tienen una esperanza de vida más larga y continúan expresando el anticuerpo unido a membrana con la misma especificidad que la célula parenteral original. Las células plasmáticas no producen el anticuerpo unido a membrana, pero en cambio producen el anticuerpo en una forma que se puede secretar. Los anticuerpos secretados son la molécula efectora principal de la inmunidad humoral.

Las células T maduran en el timo que proporciona un ambiente para la proliferación y diferenciación de células T inmaduras. Durante la maduración de células T, las células T realizan el reajuste de genes que producen el receptor de células T y la selección positiva y negativa que ayuda a determinar el fenotipo de la superficie celular de la célula T madura. Los marcadores característicos de la superficie celular de células T maduras son el complejo CD3:receptor de célula T y uno de sus correceptores, CD4 o CD8.

En los intentos por descubrir dianas celulares eficaces para la terapia contra el cáncer, los investigadores han buscado identificar polipéptidos transmembrana u otros polipéptidos asociados a membranas que se expresan específicamente en la superficie de uno o más tipos particulares de células cancerosas en comparación con una o más células no cancerosas normales. A menudo, dichos polipéptidos asociados a membrana se expresan de manera más abundante en la superficie de las células cancerosas en comparación con la superficie de las células no cancerosas. La identificación de polipéptidos antígenos de la superficie celular asociados a tumores ha proporcionado la capacidad de reconocer específicamente células cancerosas para la destrucción a través de terapias basadas en anticuerpos. En este aspecto, cabe indicar que la terapia basada en anticuerpos se ha demostrado muy eficaz en el tratamiento de ciertos tumores. Por ejemplo, HERCEPTIN® y RITUXAN® (ambas de Genentech Inc, South San Francisco, California) son anticuerpos que se han utilizado satisfactoriamente para tratar el cáncer de mama y el linfoma de no Hodgkin, respectivamente. Más específicamente, HERCEPTIN® es un anticuerpo monoclonal humanizado derivado de ADN recombinante que se une selectivamente al dominio extracelular del protooncogén del receptor 2 del factor de crecimiento epidérmico humano (HER2). Se observa la sobreexpresión de la proteína HER2 en el 25-30% de cánceres de mama primarios. RITUXAN® es un anticuerpo monoclonal murino/humano quimérico modificado genéticamente dirigido contra el antígeno CD20 hallado en la superficie de linfocitos B normales u malignos. Estos anticuerpos se producen recombinantemente en células CHO.

Herrera et al. (2003), Szatrowski (2003) y K. Tobinai (2003) describen conjugados entre anticuerpos y toxinas.

En otros intentos por descubrir dianas celulares eficaces para la terapia contra el cáncer, los investigadores han buscado identificar (1) polipéptidos no asociados a membrana que son producidos específicamente por uno o más tipos particulares de células cancerosas en comparación a por uno o más tipos particulares de células normales no cancerosas, (2) polipéptidos que son producidos por células cancerosas en un nivel de expresión que es significativamente más elevado que el de una o más células normales no cancerosas, o (3) polipéptidos cuya expresión está limitada específicamente a sólo un tipo de tejido (o a un número muy limitado de diferentes tejidos) tanto en estado canceroso como no canceroso (por ejemplo, tejido de próstata normal y de tumor de próstata). Dichos polipéptidos pueden permanecer localizadas intracelularmente o se puede secretar por la célula cancerosa. Además, dichos polipéptidos pueden expresarse no por la propia célula cancerosa, sino por células que producen y/o secretan polipéptidos que tienen un efecto potenciador o un efecto de aumento del crecimiento en células cancerosas. Dichos polipéptidos secretados son a menudo proteínas que proporcionan células cancerosas con una ventaja de crecimiento sobre las células normales e incluyen cosas, tales como factores angiogénicos, factores de adhesión celular, factores de crecimiento, y similares. Se esperaría que la identificación de antagonistas de dichos polipéptidos no asociados a membrana sirviera como agentes terapéuticos eficaces para el tratamiento de dichos cánceres. Además, la identificación del patrón de expresión de dichos polipéptidos sería útil para el diagnóstico de cánceres particulares en mamíferos.

WO00/12130 describe una proteína RP105 expresada en células B maduras.

A pesar de los avances identificados anteriormente en la terapia contra el cáncer en mamíferos, existe una gran necesidad de agentes terapéuticos adicionales capaces de detectar la presencia de tumores en un mamífero y para inhibir de manera eficaz el crecimiento de células neoplásicas, respectivamente. Por consiguiente, un objetivo de la presente solicitud es identificar polipéptidos, polipéptidos asociados a membrana, secretados o intracelulares, cuya expresión está limitada específicamente a un único tipo de tejido (o un número muy limitado de diferentes tipos de tejido), tejidos hematopoyéticos, tanto en estado canceroso o no canceroso, y utilizar estos polipéptidos, y sus ácidos nucleicos codificantes, para producir composiciones de materia útiles en el tratamiento terapéutico para la detección de cáncer hematopoyético en mamíferos.

Descripción resumida de la invención

En la presente memoria, los solicitantes describen por primera vez la identificación de varios polipéptidos celulares (y sus ácidos codificantes o fragmentos de los mismos) que son expresados específicamente tanto por células tumorales como normales de un tipo de célula específico, por ejemplo, células generadas durante la hematopoyesis, es decir, linfocitos, leucocitos, eritrocitos y plaquetas. Todos los polipéptidos anteriores se refieren aquí como polipéptidos Antígenos tumorales de Origen Hematopoyético (polipéptidos "TAHO") y se espera que sirvan como dianas eficaces para la terapia contra el cáncer en mamíferos.

Por consiguiente, la solicitud describe una molécula de ácido nucleico aislada que tiene una secuencia de nucleótidos que codifica un polipéptido antígeno tumoral de origen hematopoyético (un polipéptido "TAHO") o un fragmento del mismo.

En ciertos aspectos, la molécula de ácido nucleico aislada comprende...

1. Anticuerpo aislado que se une a un polipéptido que tiene por lo menos un 80% de identidad en la secuencia de aminoácidos con la secuencia de aminoácidos de la figura 2, con o sin su péptido señal asociado, donde dicho anticuerpo es internalizado por una célula que expresa dicho polipéptido y donde dicho anticuerpo se conjuga a un agente inhibidor del crecimiento o un agente citotóxico, para su uso en un método de tratamiento que comprende inhibir el crecimiento de la célula que expresa dicha proteína.

2. Anticuerpo según la reivindicación 1 que es un anticuerpo monoclonal.

3. Anticuerpo según la reivindicación 1, que es un fragmento de anticuerpo.

4. Anticuerpo según la reivindicación 1, que es un anticuerpo quimérico o un anticuerpo humanizado.

5. Anticuerpo según cualquiera de las reivindicaciones 1 a 4, que está conjugado a un agente inhibidor del crecimiento.

6. Anticuerpo según cualquiera de las reivindicaciones 1 a 4, que está conjugado a un agente citotóxico.

7. Anticuerpo según la reivindicación 6, donde el agente citotóxico se selecciona del grupo que consiste en toxinas, antibióticos, isótopos radioactivos y enzimas nucleolíticos.

8. Anticuerpo según la reivindicación 7, donde el agente citotóxico es una toxina.

9. Anticuerpo según la reivindicación 8, donde la toxina se selecciona del grupo que consiste en maitansinoide y caliqueamicina.

10. Anticuerpo según la reivindicación 9, donde la toxina es un maitansinoide.

11. Anticuerpo según cualquiera de las reivindicaciones 1 a 10, que es producido en bacterias.

12. Anticuerpo según cualquiera de las reivindicaciones 1 a 11, que es producido por células CHO.

13. Anticuerpo según cualquiera de las reivindicaciones anteriores, donde dicha célula es una célula hematopoyética.

14. Anticuerpo según la reivindicación 13, donde dicha célula hematopoyética se selecciona del grupo que consiste en un linfocito, leucocito, plaqueta, eritrocito y células asesinas naturales.

15. Anticuerpo según la reivindicación 14, donde dicho linfocito es una célula ß o una célula T.

16. Anticuerpo según la reivindicación 14, donde dicho linfocito es una célula cancerosa.

17. Anticuerpo según la reivindicación 16, donde dicho tratamiento comprende además exponer dicha célula cancerosa a un tratamiento con radiación o un agente quimioterapéutico.

18. Anticuerpo según la reivindicación 17, donde la célula cancerosa se selecciona del grupo que consiste en una célula de linfoma, una célula de mieloma y una célula de leucemia.

19. Anticuerpo según la reivindicación 18, donde el tratamiento causa la muerte de la célula.

20. Anticuerpo según cualquiera de las reivindicaciones anteriores, donde la proteína tiene la secuencia de aminoácidos mostrada en la figura 2, con o sin su secuencia señal.

21. Utilización de un anticuerpo que se une a un polipéptido que tiene por lo menos un 80% de identidad en la secuencia con la secuencia de aminoácidos de la figura 2, con o sin su péptido señal asociado, para la fabricación de un medicamento para inhibir el crecimiento de una célula que expresa dicha proteína, donde dicho anticuerpo se conjuga a un agente inhibidor del crecimiento o un agente citotóxico y es internalizado por la célula que expresa dicha proteína.

22. Utilización según la reivindicación 21, donde el anticuerpo es un anticuerpo monoclonal.

23. Utilización según la reivindicación 21, donde el anticuerpo es un fragmento de anticuerpo.

24. Utilización según la reivindicación 21, donde el anticuerpo es un anticuerpo quimérico o un anticuerpo humanizado.

25. Utilización según cualquiera de las reivindicaciones 21 a 24, donde el anticuerpo está conjugado a un agente inhibidor del crecimiento.

26. Utilización según cualquiera de las reivindicaciones 21 a 24, donde el anticuerpo está conjugado a un agente citotóxico.

27. Utilización según la reivindicación 26, donde el agente citotóxico se selecciona del grupo que consiste en toxinas, antibióticos, isótopos radioactivos y enzimas nucleolíticos.

28. Utilización según la reivindicación 27, donde el agente citotóxico es una toxina.

29. Utilización según la reivindicación 28, donde la toxina se selecciona del grupo que consiste en maitansinoide y caliqueamicina.

30. Utilización según la reivindicación 29, donde la toxina es un maitansinoide.

31. Utilización según cualquiera de las reivindicaciones 21 a 30, donde el anticuerpo es producido en bacterias.

32. Utilización según cualquiera de las reivindicaciones 21 a 30, donde el anticuerpo es producido en células CHO.

33. Utilización según cualquiera de las reivindicaciones 21 a 32, donde dicha célula es una célula hematopoyética.

34. Utilización según la reivindicación 33, donde dicha célula hematopoyética se selecciona del grupo que consiste en un linfocito, leucocito, plaqueta, eritrocito y células asesinas naturales.

35. Utilización según la reivindicación 34, donde dicho linfocito es una célula ß o una célula T.

36. Utilización según la reivindicación 34, donde dicho linfocito es una célula cancerosa.

37. Utilización según cualquiera de las reivindicaciones 21 a 36, donde la proteína tiene la secuencia de aminoácidos mostrada en la figura 2, con o sin la secuencia señal.