COMPOSICION Y PROCEDIMIENTO PARA MODULAR LA INTERACCION DE LAS CELULAS T Y LAS CELULAS DENDRITICAS.

Utilización de una combinación de: l) un anticuerpo o un fragmento de unión a un antígeno del mismo a un receptor de lectina de tipo-C de SEC.

ID nº: 2 o variantes naturales que presentan más de 80% de homología con SEC.ID nº: 2 en la superficie de una célula dendrítica, o una parte, fragmento o epítopo de la misma, y unido al mismo 2) un antígeno o un fragmento o parte del mismo; en la preparación de una composición para aumentar una respuesta inmune en un humano o en otro mamífero, contra dicho antígeno

Composición y procedimiento para modular la interacción de las células T y las células dendríticas.

En la presente memoria se dan a conocer composiciones y un procedimiento para modular, y en particular, aumentar la respuesta inmune en un animal, tal como el hombre u otro mamífero, utilizando una combinación de un anticuerpo y de un antígeno unido a él.

En la presente memoria se dan a conocer composiciones y un procedimiento para modular la adhesión de las células dendríticas a las células T.

En la presente memoria se dan a conocer composiciones y un procedimiento para modular, y en particular reducir la adhesión de los receptores de lectina del tipo-C en la superficie de las células dendríticas a los receptores ICAM en la superficie de las células T. Modulando esta adhesión, ambas interacciones células T-células dendríticas, tales como la formación de agregados y la presentación antigénica, así como, por ejemplo, por consiguiente, las respuestas primarias dependientes de las células T, pueden resultar influidas, dando lugar a una modulación de la respuesta inmune.

Las composiciones y el procedimiento pueden utilizarse por tanto para alterar respuestas inmunes a antígenos específicos, así como respuestas inmunes causadas por alteraciones del sistema inmune, tal como puede tener lugar en enfermedades autoinmunes o en la alergia.

El procedimiento puede utilizarse además en el tratamiento de las infecciones por VIH y similares alteraciones del sistema inmunitario, así como para modular la respuesta inmune a los injertos o después de los trasplantes.

En la presente memoria se dan a conocer compuestos, composiciones y procedimientos para modular, y en particular aumentar la respuesta inmune en un animal, tal como el hombre u otro animal.

Más específicamente, se genera una respuesta inmune contra un antígeno específico, que aumenta o se promueve mediante la presentación de dicho antígeno o de una parte antigénica del mismo a las células dendríticas con un anticuerpo que puede unirse al receptor de lectina de tipo-C en la superficie de las células dendríticas, denominado DC-SIGN y representado por la SEC.ID nº:2. El antígeno presentado de esta forma penetra en la célula dendrítica, que a su vez presenta el antígeno a las células T causando de esta forma una respuesta inmune, o una respuesta inmune aumentada, contra el antígeno.

En la presente memoria se dan a conocer técnicas profilácticas así como diagnósticas, utilizando las composiciones y/o llevando a cabo las formas de realización de los procedimientos, tal como se describen anteriormente.

La invención se basa en el sorprendente descubrimiento de que la adhesión de las células dendríticas a las células T es mediada por un receptor de lectina de tipo-C en la superficie de las células dendríticas. Se descubrió asimismo que esta lectina de tipo-C se une a los receptores ICAM en la superficie de las células T. Con el término "receptores ICAM" se quiere significar tanto el receptor ICAM 2 como el ICAM 3, y en particular, el receptor ICAM-3.

La invención se basa además en el hallazgo de que la inhibición de este receptor de la lectina de tipo C, en las células dendríticas, tal como mediante inhibidores conocidos de las lectinas de tipo-C, y/o mediante anticuerpos específicos dirigidos contra el receptor de lectina de tipo-C, puede modular y más específicamente reducir, la adhesión de las células T a las células dendríticas, pudiendo influir por lo tanto la respuesta inmune, en particular las etapas iniciales de ésta.

El documento WO 96/23882 da a conocer un receptor murino y humano con dominios de lectinas de tipo-C que se expresa abundantemente en la superficie de las células dendríticas y en las células epiteliales tímicas. El receptor murino, denominado "DEC-205", se describe como una proteína de 205 kDa con un punto isoeléctrico de aproximadamente 7,5 que contiene dominios de lectina de tipo-10 C y que es homólogo al receptor macrófago de la manosa (MMR).

El documento WO 96/23882 da a conocer además anticuerpos monoclonales y policlonales contra DEC-205. Sin embargo, estos anticuerpos no pudieron bloquear la función de las células dendríticas. En particular, los anticuerpos monoclonales y policlonales anti-DEC-205, no pudieron inhibir la interacción entre las células dendríticas y las células auxiliadoras tanto in vitro (determinado por la incapacidad de anti-DEC-205 de inhibir la proliferación de las células T alogénicas en una reacción leucocítica mezclada de una forma) e in vivo (determinada por la incapacidad de anti-DEC-205 de inhibir una respuesta in vivo, es decir, en un injerto local con respecto al huésped) (reacción GVH). Estos resultados sugieren que el receptor DEC-205 no está implicado en la interacción de las células T con las células dendríticas (es decir, la adhesión) y que los anticuerpos anti-DEC-205 no pueden utilizarse para modular la respuesta inmune.

Curtis et al., en Proc. Natl. Acad. Sci. USA, 89 (1992), págs 8.356-8.360, así como en el documento WO 93/01820, describen un receptor gp120 no CD4 aislado y clonado a partir del tejido de la placenta humana. Este receptor gp120 se expresa en las células de mamíferos que no muestran altos niveles de CD4, como placenta, músculo esquelético, cerebro, células neurales y mucosas, así como otros tejidos y células que incluyen colon, timo, corazón, células T, células B, y macrófagos (pero no en el hígado o en el riñón). La secuencia aminoácida del receptor gp120 de la lectina de tipo-C que se da a conocer en SEC ID nº 1 y nº 2 de WO93/01820 posee un alto grado de homología secuencial (>98%) con las lectinas de tipo-C que se ha descubierto se encuentran presentes en las células dendríticas.

Curtis y el documento WO 93/01820 consideran además el papel que este receptor de lectina de tipo-C desempeña en la infección de las células y tejidos mencionados anteriormente con VIH, es decir, uniendo la glicoproteína gp120 de la envuelta principal del VIH antes de la internalización del virión en la célula. Se encontró que la inhibición del receptor gp120 de la lectina de tipo-C puede reducir o inhibir la infección por VIH de estas células/tejidos. Como inhibidores apropiados, el documento WO 93/01820 da a conocer hidratos de carbono de manosa, hidratos de carbono de fucosa, lectinas vegetales tales como la concanavalina A, antibióticos específicos tal como la pradimicina A, y azúcares tales como N-acetil-D-glucosamina y galactosa (que sin embargo se describen como menos potentes). Estos compuestos y composiciones que las contienen se utilizan para inhibir in vivo o in vitro la unión del VIH a la superficie celular.

El documento WO 93/01820 considera además que la unión de VIH a las células COS-7 puede inhibirse mediante preincubación de gp120 con un anticuerpo monoclonal anti-gp120 (denominado "anticuerpo 110.1". Sin embargo, este anticuerpo no está dirigido contra las lectinas de tipo-C, sino contra la proteína gp120.

Sin embargo, ni Curtis ni el documento WO 93/01820 mencionan o sugieren la presencia de tal lectina de tipo-C en las células dendríticas, ni estas referencias mencionan o sugieren su papel en la interacción células T-células dendríticas, durante las etapas iniciales de la respuesta inmune.

El documento WO-95/32734 describe composiciones puente (o de entrecruzamiento) Fc?RII (CD32) y su utilización para modular la respuesta inmune a antígenos específicos. Esta referencia se basa en el hallazgo de que el puente de moléculas FC?RII (CD32) o las células de presentación antigénica (APCs) perjudican la expresión de las moléculas coestimulatorias esenciales B7-1/2 (es decir, evita su aumento regulado) y provoca por tanto perjuicios en la expresión (es decir, causa la modulación a la baja de) la molécula de adhesión ICAM-3, con la consecuencia funcional de una capacidad alterada de los monocitos para coestimular la activación de las células T antígeno específicas (es decir, dando lugar a la modulación de la no reactividad de las células T antígeno específicas). El agente puente se selecciona de entre las moléculas IgG humanas agregadas o de sus fragmentos Fc; anticuerpos monoclonales bi o multivalentes para Fc?RII o fragmentos suyos, o una fusión de dos o más partes IgG Fc humanas.

El documento WO 95/32734 se refiere por tanto a modular (es decir, inhibiendo) la señal de coestimulación requerida por la activación de las células T (es decir, además de la señal primaria de la interacción...

1. Utilización de una combinación de: l) un anticuerpo o un fragmento de unión a un antígeno del mismo a un receptor de lectina de tipo-C de SEC.ID nº: 2 o variantes naturales que presentan más de 80% de homología con SEC.ID nº: 2 en la superficie de una célula dendrítica, o una parte, fragmento o epítopo de la misma, y unido al mismo 2) un antígeno o un fragmento o parte del mismo; en la preparación de una composición para aumentar una respuesta inmune en un humano o en otro mamífero, contra dicho antígeno.

2. Utilización según la reivindicación 1, en la preparación de una composición, para aumentar una o más interacciones entre una célula dendrítica y una célula T.

3. Utilización según la reivindicación 1 y/o 2, en la preparación de una composición para aumentar la adhesión entre una lectina de tipo-C en la superficie de una célula dendrítica y un receptor ICAM-2 o ICAM-3 en la superficie de una célula T.

4. Utilización según la reivindicación 1, en la que el antígeno está enlazado covalentemente a o está fusionado con el compuesto que puede unirse a la lectina de tipo-C.

5. Utilización según la reivindicación 1 ó 4, en la que el antígeno se selecciona de entre antígenos cancerosos que pueden utilizarse para generar una respuesta inmune contra las células tumorales que contienen o expresan dicho antígeno, o antígenos tal como se utilizan en las vacunas contra enfermedades infecciosas.

6. Utilización según cualquiera de las reivindicaciones 1 a 5, en la que el anticuerpo es un anticuerpo monoclonal.