Una composición que comprende:

(a)un cristal de lipasa no fúngica reticulado con un agente reticulante multifuncional;

(b)una proteasa; y

(c)una amilasa, en forma amorfa

en la que el cristal de lipasa es activo a un pH de 2,0 a 9,0

Composición que contiene lipasa no fúngica, reticulada y métodos de uso.

Campo de la invención

Esta invención se refiere en general a composiciones que contienen enzimas y, más concretamente, a composiciones que contienen lipasa para el tratamiento de trastornos caracterizados por una baja secreción de lipasas.

Antecedentes de la invención

Las enfermedades metabólicas o gastrointestinales a menudo son el resultado de la ausencia de una enzima eficaz cuya función es necesaria en un punto determinado de la vía bioquímica. Por ejemplo, puede determinarse que unos niveles inapropiados de lipasa conducen a una diversidad de trastornos digestivos, incluyendo la malabsorción de grasas. La malabsorción de grasas se desarrolla a menudo en pacientes que padecen fibrosis quística, pancreatitis crónica y otras enfermedades del páncreas, cuando la secreción de lipasa pancreática disminuye por debajo del 5-10% de los niveles normales. Las consecuencias de la malabsorción de grasas que habitualmente se observan incluyen molestias abdominales, esteatorrea (deposiciones grasas), deficiencia en ácidos grasos esenciales (EFA), deficiencia en vitaminas liposolubles (por ejemplo, A, D, E y K), y una incapacidad generalizada para desarrollarse.

Un método reconocido para tratar enfermedades o trastornos asociados con una insuficiencia en lipasa es la terapia de sustitución oral. Este régimen de tratamiento incluye la administración oral de enzimas lipasas al individuo afectado para aumentar la digestión y la posterior absorción de los nutrientes. Las preparaciones disponibles en el mercado de lipasa pueden no tratar completamente los síntomas asociados con la insuficiencia en lipasa. Por ejemplo, la lipasa porciona disponible en el mercado puede no eliminar la esteatorrea pancreática provocada por la pancreatitis crónica o por la fibrosis quística. Los factores responsables de las dificultades en el tratamiento de la esteatorrea pueden incluir la destrucción de la lipasa sustituida por el jugo gástrico, la destrucción de la lipasa sustituida por las proteasas intraluminales, y el vaciado gástrico asincrónico del suplemento enzimático y los nutrientes de los alimentos.

Las lipasas que se emplean habitualmente en la terapia de sustitución son más activas a un pH alcalino, y muestran una pérdida significativa de actividad cuando el pH es menor que 5. Se ha indicado que la lipasa pancreática, por ejemplo, se desnaturaliza de forma irreversible a pH 4 o menor. Debido a esta inestabilidad, las terapias de sustitución basadas en lipasas pueden incluir administraciones repetidas de lipasas y/o la administración de altas dosis de las enzimas a los individuos afectados. Unas altas dosis de enzimas pueden estar asociadas con unos efectos secundarios indeseables.

Sumario de la invención

La invención se basa, en parte, en el descubrimiento de composiciones que incluyen lipasas en una forma cristalina reticulada que es muy resistente a la degradación proteolítica y ácida. Debido a que la lipasa cristalina reticulada muestra una alta estabilidad frente a proteasas y a ácidos, la composición puede administrarse en dosis bajas a pacientes que padecen trastornos gastrointestinales. En un aspecto, la invención proporciona una composición que incluye un cristal de lipasa reticulado, una proteasa, y una amilasa en forma amorfa. El cristal de lipasa en la composición se reticula con un agente reticulante multifuncional y es preferiblemente estable a pH 1-9. La enzima es activa a un pH de aproximadamente 2,0 a 9,0. Más preferiblemente, la enzima es activa a pH 4-7.

Una composición preferida incluye un cristal de enzima reticulado de Burkholderia cepacia ("BC"), una proteasa fúngica o vegetal, y una amilasa fúngica o bacteriana. Preferiblemente, la proteasa es bromelaína.

Preferiblemente, el cristal de lipasa es activo tras la exposición del cristal de lipasa durante periodos extensos de tiempo a proteasas, condiciones ácidas, temperaturas elevadas, o una combinación de éstas.

La invención también proporciona un método para tratar o prevenir la malabsorción de grasas en un mamífero, por ejemplo, un ser humano, que padece, o está en riesgo de padecer, un trastorno caracterizado por una baja actividad lipasa. El método incluye administrar al sujeto una composición que incluye un cristal reticulado de una lipasa, una proteasa y una amilasa, en una cantidad suficiente para prevenir o inhibir una baja actividad lipasa, o para reducir o prevenir los síntomas asociados con una baja actividad lipasa.

Las lipasas muy estables descritas en la presente son estables tras su administración a un sujeto. Por tanto, pueden administrarse sin preparaciones de microesferas con revestimiento entérico. Las lipasas descritas en la presente también pueden administrarse en dosis más bajas a un sujeto.

A menos que se defina de otra forma, todos los términos técnicos y científicos utilizados en la presente tienen el mismo significado que entienden habitualmente los expertos en la técnica a la cual pertenece esta invención. Aunque pueden utilizarse métodos y materiales similares o equivalentes a los descritos en la presente en la práctica o el ensayo de la presente invención, a continuación se describen métodos y materiales adecuados. En caso de conflicto, la presente solicitud, incluyendo las definiciones, dominará. Además, los materiales, los métodos y los ejemplos son sólo ilustrativos y no pretenden ser limitantes.

Otras características y ventajas de la invención serán evidentes a partir de la siguiente descripción detallada y a partir de las reivindicaciones.

Breve descripción de los dibujos

La Figura 1 es un histograma que muestra el efecto de diversas dosis de complejo de enzima reticulada de Burkholderia cepacia ("CLEC-BC") sobre el coeficiente medio de la absorción de grasas ("CFA").

La Figura 2 es un histograma que muestra el efecto de diversas dosis de CLEC-BC sobre la grasa media en las deposiciones.

La Figura 3 es un histograma que muestra el efecto de diversas dosis de CLEC-BC sobre el coeficiente medio de la absorción de grasas ("CPA").

La Figura 4 es un histograma que muestra el efecto de diversas dosis de una partícula que contiene CLEC-BC, amilasa, y una proteasa, sobre el coeficiente medio de la absorción de grasas ("CFA").

La Figura 5 es un histograma que muestra el efecto de diversas dosis de una partícula que contiene CLEC-BC, una amilasa y una proteasa, sobre la grasa media en las deposiciones.

La Figura 6 es un histograma que muestra el efecto de diversas dosis de una composición que contiene CLEC-BC, una amilasa y una proteasa, sobre el coeficiente medio de la absorción de proteínas ("CPA").

La Figura 7 es una gráfica que muestra el efecto de diversas lipasas terapéuticas sobre el CPA medio.

Descripción detallada de la invención

La invención proporciona composiciones que incluyen cristales de lipasa reticulados que son inesperadamente activos tras su exposición a condiciones rigurosas asociadas con el tracto gastrointestinal superior. Estas condiciones incluyen el entorno ácido (es decir, el pH bajo) del estómago y los altos niveles de proteasas presentes en el tracto gastrointestinal. En realizaciones preferidas, las composiciones se proporcionan en composiciones duraderas que pasan a través del entorno gástrico muy ácido del estómago y permiten el transporte de las enzimas en la composición al intestino de un sujeto.

Los componentes de proteasas pueden proporcionarse en forma cristalina o amorfa, no cristalina. Estas últimas enzimas degradan los carbohidratos y las proteínas presentes en las regiones intestinales.

Debido a la mayor estabilidad de los cristales de lipasa reticulados, las composiciones farmacéuticas de la invención tienen unas mayores actividades específicas en el tracto gastrointestinal. Como resultado, pueden administrarse en menores cantidades por dosis, y pueden administrarse menos veces a lo largo del régimen de tratamiento, a menos dosis, y en menos administraciones.

Composiciones que contienen cristales de lipasa reticulados estabilizados

La invención proporciona una composición que incluye un cristal de lipasa no fúngico, una proteasa y una amilasa en forma amorfa. El cristal de lipasa está presente en la composición como un cristal reticulado.

En general, puede utilizarse cualquier lipasa en la composición, con la condición de que pueda proporcionarse en una...

1. Una composición que comprende:

en la que el cristal de lipasa es activo a un pH de 2,0 a 9,0.

2. La composición según la reivindicación 1, en la que el cristal de lipasa es activo tras su exposición durante al menos una hora a un entorno que tiene un pH de 1,0 a 4,0.

3. La composición según la reivindicación 1, en la que el cristal de lipasa es activo tras su exposición durante al menos dos horas a un entorno que tiene un pH de 1,0 a 4,0.

4. La composición según la reivindicación 1, en la que el cristal de lipasa es activo tras su exposición durante al menos cinco horas a un entorno que tiene un pH de 1,0 a 4,0.

5. La composición según la reivindicación 1, en la que el agente reticulante multifuncional es bis(succinimidil)suberato.

6. La composición según la reivindicación 1, en la que la lipasa se deriva de una lipasa bacteriana.

7. La composición según la reivindicación 6, en la que la lipasa bacteriana es una lipasa de Pseudomonas.

8. La composición según la reivindicación 7, en la que la lipasa de Pseudomonas es la lipasa de Burkholderia cepacia.

9. La composición según la reivindicación 1, en la que la amilasa se selecciona del grupo que consiste en una amilasa de Bacillus y una amilasa de Aspergillus.

10. La composición según la reivindicación 1, en la que la proteasa es una proteasa fúngica.

11. La composición según la reivindicación 1, en la que la proteasa es un cristal de proteasa.

12. La composición según la reivindicación 11, en la que el cristal de proteasa es un cristal de proteasa reticulado.

13. La composición según la reivindicación 1, en la que la proteasa está en una forma no cristalina.

14. La composición según la reivindicación 1, en la que la composición está en forma de polvo.

15. La composición según la reivindicación 1, en la que la composición es una suspensión acuosa.

16. La composición según la reivindicación 1, en la que la composición está en forma de cápsula o de comprimido.

17. La composición según la reivindicación 1, en la que el cristal de lipasa muestra una actividad específica frente al aceite de oliva mayor que 500, 1000, 4000, 5000, 6000, 7000, 8000, 9000 o más unidades por mg de lipasa.

18. La composición según la reivindicación 1, que comprende además un vehículo farmacéuticamente aceptable.

19. La composición según la reivindicación 1, en la que la composición es una composición farmacéutica.

20. La composición según una cualquiera de las reivindicaciones 1, 18 ó 19, en la que la composición está presente en una formulación adecuada para la administración oral a un sujeto.

21. La composición según la reivindicación 18, en la que el vehículo farmacéutico se selecciona del grupo que consiste en un diluyente, un excipiente y un adyuvante.

22. La composición según la reivindicación 18, en la que el vehículo es un vehículo polimérico.

23. La composición según la reivindicación 22, en la que el vehículo polimérico es un polímero biodegradable.

24. La composición según la reivindicación 22, en la que la composición está encapsulada dentro de una matriz del vehículo polimérico.

25. La composición según la reivindicación 24, en la que al menos 50% de la composición permanece encapsulada dentro de la matriz tras la exposición del vehículo polimérico a un entorno que tiene un pH de 1,0 a 3,0 durante al menos una hora.

26. El uso de la composición según la reivindicación 1 para la preparación de una composición farmacéutica para tratar o prevenir un trastorno gastrointestinal en un mamífero.

27. El uso según la reivindicación 26, en el que la composición se administra por vía oral.

28. El uso según la reivindicación 26, en el que el mamífero es un ser humano.

29. El uso según la reivindicación 26, en el que el trastorno gastrointestinal se selecciona del grupo que consiste en pancreatitis e insuficiencia pancreática.

30. El uso según la reivindicación 26, en el que el sujeto padece o está en riesgo de padecer fibrosis quística.

31. El uso de la composición según la reivindicación 1 para la preparación de una composición farmacéutica para tratar o prevenir la malabsorción de grasas en un mamífero que padece o que está en riesgo de padecer un trastorno que se caracteriza por una baja secreción de lipasas.

32. El uso según la reivindicación 31, en el que la composición se administra por vía oral al mamífero.

33. El uso según la reivindicación 31, en el que el mamífero es un ser humano.

34. El uso según la reivindicación 31, en el que la composición se administra de modo preprandial al sujeto.

35. El uso según la reivindicación 31, en el que la composición se administra de modo prandial al sujeto.

36. El uso según la reivindicación 31, en el que la composición se administra de modo postprandial al sujeto.

37. El uso según la reivindicación 31, en el que la composición se administra al mamífero en una cantidad suficiente para aumentar el coeficiente de absorción de grasas en el mamífero hasta más del 60%.

38. El uso según la reivindicación 31, en el que la composición se administra al mamífero en una cantidad suficiente para aumentar el coeficiente de absorción de grasas en el mamífero hasta más del 80%.

39. El uso según la reivindicación 26, en el que la composición se administra al mamífero en una cantidad suficiente para aumentar el coeficiente de absorción de proteínas en el mamífero hasta más del 60%.