METODO PARA HACER POLIPEPTIDOS ACILADOS.
Método para hacer un polipéptido que comprende al menos un residuo de lisina que es acilado en su grupo Eamino,
dicho método comprendiendo las siguientes fases: #(i) cultivo de una célula de levadura que comprende una secuencia polinucleótida que codifica una molécula precursora de dicho polipéptido bajo condiciones adecuadas para la expresión de dicha molécula precursora, comprendiendo la molécula precursora el polipéptido deseado y una extensión N-terminal, siendo dicha extensión N-terminal seccionable del polipéptido deseado en un sitio de seccionamiento de lisina y teniendo la fórmula siguiente: Xn ----- X1 - Lys donde Lys es un sitio de seccionamiento y X n ----- X 1 es una secuencia péptida con una longitud de 2-14 residuos aminoácidos que tiene la función de prevenir o minimizar la acilación del grupo epsilon-amino libre en el sitio de seccionamiento Lys en la fase (iii) y que tiene la función adicional de proteger el polipéptido precursor expresado contra el seccionamiento endoproteolitico con la condición de que ninguna X sea Lys y de que al menos una X sea His o Glu o Asp; #(ii) la separación de la molécula precursora expresada del caldo de cultivo; #(iii) preferentemente la acilación del grupo epsilon-amino en al menos un residuo de lisina en el polipéptido deseado sin acilar el grupo epsilon-amino del sitio de seccionamiento de lisina en la extensión N-terminal; #(iv) la eliminación de la extensión N-terminal de la molécula precursora acilada por seccionamiento enzimático y #(v) el aislamiento del polipéptido acilado por medios adecuados.
Tipo: Resumen de patente/invención.
Solicitante: NOVO NORDISK A/S.
Nacionalidad solicitante: Dinamarca.
Dirección: NOVO ALLE,2880 BAGSVAERD.
Inventor/es: BALSCHMIDT, PER, KJELDSEN, THOMAS, BORGLUM, JONASSEN, IB, EGEL-MITANI, MICHI, MARKUSSEN, JAN, DIERS,IVAN.
Fecha de Publicación: .
Fecha Concesión Europea: 15 de Octubre de 2008.
Clasificación PCT:
- C07K1/00 QUIMICA; METALURGIA. › C07 QUIMICA ORGANICA. › C07K PEPTIDOS (péptidos que contienen β -anillos lactamas C07D; ipéptidos cíclicos que no tienen en su molécula ningún otro enlace peptídico más que los que forman su ciclo, p. ej. piperazina diones-2,5, C07D; alcaloides del cornezuelo del centeno de tipo péptido cíclico C07D 519/02; proteínas monocelulares, enzimas C12N; procedimientos de obtención de péptidos por ingeniería genética C12N 15/00). › Procedimientos generales de preparación de péptidos.
- C07K14/605 C07K […] › C07K 14/00 Péptidos con más de 20 aminoácidos; Gastrinas; Somatostatinas; Melanotropinas; Sus derivados. › Glucagones.
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