PROCEDIMIENTO PARA LA RECUPERACION FACILITADA DE PROTEINAS HETEROLOGAS A PARTIR DE CELULAS BACTERIANAS.
Procedimiento para la recuperación de polipéptido heterólogo a partir de células bacterianas,
que comprende: #(a) cultivar las células, que comprenden un primer ácido nucleico que codifica el polipéptido heterólogo y una secuencia de señal para la secreción del polipéptido heterólogo, estando dicho primer ácido nucleico unido a un primer promotor inducible, un segundo ácido nucleico que codifica la lisozima fágica, y un tercer ácido nucleico que codifica una proteína que muestra actividad digestora de ADN bajo el control de una secuencia de señal para la secreción de la proteína digestora de ADN, en el que dichos segundo y tercer ácidos nucleicos están operativamente unidos a un segundo promotor que es el mismo para ambos, y en el que ambos están unidos sobre el mismo constructo de ácido nucleico, y en el que el segundo promotor es o bien #(i) inducible o #(ii) un promotor constitutivamente débil o un promotor con un nivel basal bajo que no requiere la adición de un inductor para funcionar como un promotor, y en el que el primer promotor inducible y el segundo promotor son diferentes entre sí y, cuando el segundo promotor es un promotor inducible, responden a diferentes inductores; #(b) añadir un inductor específico para la inducción de la expresión del ácido nucleico que codifica el polipéptido heterólogo a partir del primer promotor inducible, #(c) únicamente cuando el cultivo se realiza mediante (a)(i) anterior, añadir un segundo inductor específico para el segundo promotor inducible tras la acumulación de aproximadamente 50% o más de la acumulación máxima del polipéptido heterólogo que se debe recuperar, #(d) lisar las células, y #(e) recuperar el polipéptido heterólogo acumulado del caldo lisado.
Tipo: Resumen de patente/invención.
Solicitante: GENENTECH, INC..
Nacionalidad solicitante: Estados Unidos de América.
Dirección: 1 DNA WAY,SOUTH SAN FRANCISCO, CA 94080-.
Fecha de Publicación: .
Fecha Solicitud PCT: 21 de Octubre de 1999.
Fecha Concesión Europea: 26 de Noviembre de 2008.
Clasificación PCT:
- C07K14/65 QUIMICA; METALURGIA. › C07 QUIMICA ORGANICA. › C07K PEPTIDOS (péptidos que contienen β -anillos lactamas C07D; ipéptidos cíclicos que no tienen en su molécula ningún otro enlace peptídico más que los que forman su ciclo, p. ej. piperazina diones-2,5, C07D; alcaloides del cornezuelo del centeno de tipo péptido cíclico C07D 519/02; proteínas monocelulares, enzimas C12N; procedimientos de obtención de péptidos por ingeniería genética C12N 15/00). › C07K 14/00 Péptidos con más de 20 aminoácidos; Gastrinas; Somatostatinas; Melanotropinas; Sus derivados. › Factores de crecimiento de tipo insulina (Somatomedinas), p. ej. IGF-1, IGF-2.
- C07K16/28 C07K […] › C07K 16/00 Inmunoglobulinas, p. ej. anticuerpos mono o policlonales. › contra receptores, antígenos celulares de superficie o determinantes celulares de superficie.
- C12N1/06 C […] › C12 BIOQUIMICA; CERVEZA; BEBIDAS ALCOHOLICAS; VINO; VINAGRE; MICROBIOLOGIA; ENZIMOLOGIA; TECNICAS DE MUTACION O DE GENETICA. › C12N MICROORGANISMOS O ENZIMAS; COMPOSICIONES QUE LOS CONTIENEN; PROPAGACION, CULTIVO O CONSERVACION DE MICROORGANISMOS; TECNICAS DE MUTACION O DE INGENIERIA GENETICA; MEDIOS DE CULTIVO (medios para ensayos microbiológicos C12Q 1/00). › C12N 1/00 Microorganismos, p.ej. protozoos; Composiciones que los contienen (preparaciones de uso médico que contienen material de protozoos, bacterias o virus A61K 35/66, de algas A61K 36/02, de hongos A61K 36/06; preparación de composiciones de uso médico que contienen antígenos o anticuerpos bacterianos, p. ej. vacunas bacterianas, A61K 39/00 ); Procesos de cultivo o conservación de microorganismos, o de composiciones que los contienen; Procesos de preparación o aislamiento de una composición que contiene un microorganismo; Sus medios de cultivo. › Lisis de microorganismos.
- C12N15/70 C12N […] › C12N 15/00 Técnicas de mutación o de ingeniería genética; ADN o ARN relacionado con la ingeniería genética, vectores, p. ej. plásmidos, o su aislamiento, su preparación o su purificación; Utilización de huéspedes para ello (mutantes o microorganismos modificados por ingeniería genética C12N 1/00, C12N 5/00, C12N 7/00; nuevas plantas en sí A01H; reproducción de plantas por técnicas de cultivo de tejidos A01H 4/00; nuevas razas animales en sí A01K 67/00; utilización de preparaciones medicinales que contienen material genético que es introducido en células del cuerpo humano para tratar enfermedades genéticas, terapia génica A61K 48/00; péptidos en general C07K). › Vectores o sistemas de expresión especialmente adaptados a E. coli.
Países PCT: Austria, Bélgica, Suiza, Alemania, Dinamarca, España, Francia, Reino Unido, Grecia, Italia, Liechtensein, Luxemburgo, Países Bajos, Suecia, Mónaco, Portugal, Irlanda, Finlandia, Chipre.
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